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“九五”国家科技攻关计划(TJ99-LA01)

作品数：13 被引量：89H指数：6
相关作者：胡以平姚玉成李建秀訾晓渊王新民更多>>
相关机构：第二军医大学郑州大学延边大学更多>>
发文基金：“九五”国家科技攻关计划上海市科学技术发展基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 13篇中文期刊文章

领域

  • 12篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 11篇基因
  • 10篇乙型
  • 10篇乙型肝炎
  • 10篇乙型肝炎病毒
  • 10篇转基因
  • 10篇转基因小鼠
  • 10篇小鼠
  • 10篇肝炎
  • 10篇肝炎病毒
  • 10篇病毒
  • 3篇蛋白
  • 3篇细胞
  • 3篇X蛋白
  • 2篇动物
  • 2篇动物模型
  • 2篇乙型肝炎病毒...
  • 2篇克隆
  • 2篇肝细胞
  • 2篇肝组织
  • 2篇肝组织损伤

机构

  • 13篇第二军医大学
  • 3篇郑州大学
  • 1篇延边大学

作者

  • 12篇胡以平
  • 10篇姚玉成
  • 9篇李建秀
  • 8篇訾晓渊
  • 6篇熊俊
  • 6篇王新民
  • 4篇金艳花
  • 4篇苏小平
  • 3篇丛文铭
  • 3篇朱海英
  • 3篇倪文君
  • 2篇张钦宪
  • 2篇李文林
  • 2篇刘红
  • 2篇田甜
  • 1篇巴月
  • 1篇葛军辉
  • 1篇何志颖
  • 1篇孙伟
  • 1篇苏娟

传媒

  • 9篇第二军医大学...
  • 3篇癌变．畸变．...
  • 1篇国外医学（遗...

年份

  • 1篇2007
  • 2篇2004
  • 7篇2003
  • 3篇2002
共 13 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
乙型肝炎病毒X蛋白在肝细胞癌发生中的作用被引量：1
2004年
乙型肝炎病毒是引起包括肝细胞癌在内的慢性肝脏疾病的重要致病因素 ,但HCC的发病机制仍不清楚。最近研究发现 ,乙型肝炎病毒x基因(HBx)是HBV复制和扩散所必需的基因 ,在乙肝慢性化和肝细胞癌的发生中具有重要作用。HBx基因是HBVDNA中最小的一个基因 ,全长465bp,表达产物为17kDa的X蛋白。X蛋白具有多种功能 :可对多种病毒和细胞的启动子、增强子成分发挥反式激活作用 ;可与P53蛋白结合 ;可参与多条信号转导通路 ;具有抑制DNA切除修复的作用 ;参与细胞周期调控和细胞凋亡 ;具有蛋白激酶和蛋白酶抑制剂功能 ;可与胰岛素样生长因子Ⅱ相互作用。在乙肝慢性化和HCC的发生中 ,X蛋白参与了多条途径 。
田甜訾晓渊胡以平
关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝细胞癌
后基因组时代的基因工程小鼠被引量：13
2003年
基因工程小鼠是当今生命科学中集成度最高的综合性研究体系之一 ,在认识“基因 -蛋白质 -生命现象”、制备人类疾病研究的实验动物模型 ,以及新药开发的评价体系等领域中具有重要作用。随着生命科学中功能基因组学的兴起和模式生物时代的到来 ,使得生物医药研究对基因工程小鼠的需求日趋增加 ,同时也促使基因工程小鼠技术体系得到了快速的发展。然而 ,在基因工程小鼠的产生中 ,仍存在着一些问题。它们的解决 。
胡以平曾溢滔
关键词：转基因小鼠基因剔除小鼠
乙型肝炎病毒x基因转基因小鼠的表型分析被引量：2
2003年
目的 :研究乙型肝炎病毒 X蛋白致转基因小鼠的表型效应。 方法 :采用免疫组织化学和组织病理学方法分析转基因小鼠中 X蛋白的表达部位及其病理学改变。结果 :免疫组织化学检测发现 X蛋白在转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤组织中均有表达 ,从 F0 代到 F3代小鼠 ,X蛋白在肝细胞中的分布逐渐从细胞质向细胞核转移。病理学分析显示 ,表达 X蛋白的转基因小鼠出现了皮肤组织结构异常、肝组织和肺组织轻度变性等病理学变化。 结论 :乙型肝炎病毒 x基因转基因小鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和皮肤等组织中表达 X蛋白 ,部分转基因小鼠出现的皮肤组织、肝组织和肺组织病理性损伤可能与 X蛋白有关 ;各代转基因小鼠肝细胞中 X蛋白的分布具有规律性的变化 ,可用于研究
熊俊訾晓渊姚玉成金艳花李建秀苏小平王新民倪文君丛文铭胡以平
关键词：乙型肝炎病毒X基因转基因小鼠病理学
HBVpreS2-S基因诱发的体液免疫引起乙肝转基因小鼠肝组织损伤被引量：2
2003年
目的 :探讨乙型肝炎病毒 (HBV) pre S2 - S基因诱发的体液免疫在乙型肝炎发病机制中的作用。 方法 :用含 HBVpre S2 - S基因的质粒 pc DNA3- S2 - S经胫骨前肌肌肉注射免疫正常 BAL B/ c小鼠获得抗血清 ,将抗血清经尾静脉注射到转基因小鼠 BAL B/ c- Tg N(pre S2 - S/ ayw)体内 ,不同时间点静脉采血检测小鼠血清 HBs Ag、抗 HBs抗体、前 S2抗原、前 S2抗体、转氨酶、尿素氮和肌酐的变化 ,并处死动物检查肝、脾、肾、肠、肺和肌肉组织的病理学改变。 结果 :DNA免疫正常小鼠后 8～14周 ,抗 HBs抗体的浓度维持在 130～ 14 0 m IU/ ml;免疫后小鼠抗血清转移到转基因小鼠 BAL B/ c- Tg N(pre S2 - S/ ayw)后 2、4、7和 14 d,小鼠血清中未检测到 HBs Ag和前 S2抗原 ,抗 HBs抗体持续阳性 ,前 S2抗体 14 d时转阴 ;AL T2、4 d升高 ,7d恢复到正常 ;AST14 d内始终高于正常值 ,4 d时达高峰 ;尿素氮异常 ,γ- GT与肌酐正常。转基因小鼠肝脏出现急性乙型肝炎的改变 ,初期 (2 d、4 d)血窦内和汇管区有淋巴细胞浸润 ,4 d肝细胞开始肿胀 ;中期 (7d)全小叶出现肝细胞气球样变 ,肝小叶内出现肝细胞点灶性坏死伴单个核细胞浸润 ,汇管区轻度单个核细胞的浸润 ;后期 (14 d)时肝细胞肿胀明显减轻 。
刘红姚玉成葛军辉李建秀苏娟张钦宪胡以平
关键词：乙型肝炎病毒体液免疫转基因小鼠乙型肝炎
单克隆抗体诱发乙肝转基因小鼠肝组织损伤被引量：3
2003年
目的 :诱导整合有乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组、无病理学反应的转基因小鼠产生病理学改变 ,建立研究急性肝炎发生机制及治疗药物筛选的转基因动物模型。方法 :采用尾静脉注射方法将 3种 HBV单克隆抗体 HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab分别或混合导入整合有 HBV全基因组的转基因小鼠体内 ,使之与体内的抗原结合产生免疫学反应 ,随后进行血清学及常规病理学的研究。结果 :3种单克隆抗体单独或混合处理均引起 HBV转基因小鼠肝细胞的病理学损伤 ,以 HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab混合处理组损伤较为严重 ;但小鼠血清转氨酶基本表现正常。 结论 :体液免疫反应可以诱导 HBV转基因小鼠组织细胞发生损伤 ,并产生与急性肝炎相似症状的病理学改变 ,HBs Ab及 HBs Ab+HBc Ab处理的
胡卫江余宏宇姚玉成李建秀孙伟郝光荣胡以平
关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠动物模型单克隆抗体
乙肝病毒X蛋白诱导HeLa细胞和转基因小鼠肝细胞凋亡的研究被引量：4
2007年
背景与目的:探讨乙型肝炎病毒X蛋白在细胞凋亡中的作用。材料与方法:采用基因重组技术构建乙型肝炎病毒x基因的真核表达载体pcDNA3-HBx。脂质体FuGE NE6转染HeLa细胞,并用蛋白印迹检测pcDNA3-HBx在HeLa细胞中的表达。流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:成功构建了可在真核细胞中稳定表达X蛋白的HBx基因真核表达载体pcDNA3-HBx。稳定转染pcDNA3-HBx DNA的HeLa-Xs细胞的凋亡率为9.8%,较空白HeLa细胞的凋亡率(0.4%)以及对照细胞HeLa-Vs细胞的凋亡率(1.3%)高;两只转基因小鼠肝细胞的细胞凋亡率分别为54.4%和40.4%,较正常小鼠肝细胞的细胞凋亡率(6.8%)明显增高。结论:X蛋白可在体外和体内诱导细胞凋亡。
张南訾晓渊熊俊姚玉成李文林巴月朱海英李建秀王新民胡以平
关键词：乙型肝炎病毒X蛋白转基因小鼠
EST技术及其在基因全长cDNA克隆上的应用策略被引量：31
2002年
随着人类基因组计划的顺利进行 ,EST技术被广泛应用于基因识别、绘制基因表达图谱、寻找新基因等研究领域。利用人类基因组研究不断产生的数据 ,从 ESTs即 c DNA的部分序列入手 ,通过同源筛选 ,获得基因部分乃至全长 c DNA序列 ,避免或减轻了构建与筛选 c DNA文库等繁琐的实验室工作。本文从原理。
何志颖姚玉成
关键词：基因克隆生物信息学
乙型肝炎病毒(adr亚型)preS2-S基因转基因小鼠的建立被引量：6
2003年
目的 :建立可表达乙型肝炎病毒 (adr亚型 )包膜中蛋白的转基因小鼠品系。 方法 :通过原核显微注射法制备带有乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因的转基因小鼠。应用 PCR方法筛选乙型肝炎病毒 pre S2 - S基因转基因首建者 (founder)小鼠 ,再以免疫组织化学法分析乙型肝炎病毒蛋白在这些小鼠中的表达特性 ,PCR和免疫组化均阳性的转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配用于传代培育 ,并用 PCR法检测其子代小鼠。结果 :共注射受精卵 6 9枚。选取存活受精卵 5 8枚分别植入 4只假孕小鼠 ,产仔并存活 2 3只。经尾组织 DNA PCR筛选得到 5只整合 pre S2 - S基因的 founder小鼠 ,免疫组织化学法发现其中3只小鼠的肝脏中表达 HBs Ag,进而对其中表达较强的阳性鼠进行保种。结论 :所建立的乙型肝炎病毒 (adr亚型 ) pre S2 - S基因转基因小鼠品系具有表达乙肝病毒中蛋白的生物学特性 。
苏小平姚玉成訾晓渊赵书民熊俊李建秀王新民丁佳许燕余宏宇胡以平
关键词：乙型肝炎病毒MHBS转基因小鼠
乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠的建立被引量：13
2003年
目的 :建立乙型肝炎病毒核心抗原 (ayw亚型 )转基因小鼠模型。 方法 :采用受精卵显微注射的方法制备转基因小鼠 ,以 PCR、免疫组化和 H- E染色法分析导入基因在小鼠基因组中的整合、肝脏中的表达及肝组织的病理变化。结果 :得到 6只基因组中整合了核心抗原基因的首建者 (founder)小鼠 ,其中 1只在肝细胞核和胞浆均有 HBc Ag的表达。将肝脏中表达的小鼠继续传代 ,F1 代 10只小鼠中的 4只小鼠肝细胞有 HBc Ag的表达。 结论 :建立了乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠 ,核心抗原基因能够在小鼠肝脏中表达 。
刘红姚玉成何金李文林李建秀苏小平张钦宪胡以平
关键词：乙型肝炎病毒核心抗原转基因小鼠动物模型
乙型肝炎病毒preS2蛋白在转基因小鼠肝脏中的表达被引量：5
2003年
目的 :分析乙型肝炎病毒 pre S2蛋白在 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用。方法 :采用原核显微注射法将质粒 pc DNA3.1- pre S/ St注射入小鼠受精卵雄原核 ,制备转基因小鼠。PCR法在基因组水平筛选 3′末端缺失的 pre S/ S基因转基因小鼠首建者 (founder)及后代 ;免疫组织化学法在蛋白水平检测 pre S2蛋白在这些小鼠中的表达 ;H- E染色分析转基因小鼠肝组织的病理学变化。结果 :经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后 ,共出生 15只新生小鼠 ,其中存活 7只 ,经 PCR检测后获得 2只 founder转基因小鼠 ,命名为 C5 7- Tg N (pre S/ St) SMMU。免疫组织化学检测发现转基因小鼠肝细胞质中有 pre S 2蛋白表达 ,H- E染色发现转基因小鼠肝组织中央静脉周围有淋巴细胞聚集。将这 2只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配 ,进行传代培育 ,PCR法筛选阳性转基因小鼠 ,目前已传至 F2 代。 结论 :本研究成功建立了稳定遗传 3′末端缺失的 pre S/ S基因并表达 pre S2蛋白的转基因小鼠 C5 7- Tg N((pre S/ St) SMMU,它将是体内研究 3′末端缺失的 pre S/
金艳花訾晓渊姚玉成熊俊李建秀苏小平王新民倪文君丛文铭杨康鹃胡以平
关键词：乙型肝炎病毒PRES2蛋白转基因小鼠
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