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一种大规模制备双链RNA的简单方法及其在斑节对虾中的应用被引量：3: 2010年; RNA干扰(RNAi)是由双链RNA(dsRNA)诱发的特异性沉默目的基因表达的过程,一种大规模制备双链RNA的方法可以便利RNAi技术的应用。以斑节对虾kazal型蛋白激酶抑制剂(KPI)基因为例,详细介绍了一种以体内载体表达大量制备dsRNA(>300nt)的方法。使用商业载体pGEMT和pDRIVE,以2步克隆法构建含有发夹环(hairpin loop)dsRNA表达载体,转化RNA酶Ⅲ缺陷的大肠杆菌HT115(DE3)进行体内转录制备dsRNA。构建的发夹RNA表达载体含有494bp的正向靶序列和403bp的反向互补靶序列,其中正向靶序列多出的91bp即可成为loop环,而无需再次克隆加入。培养30mL的细菌,即可得到1mg纯化的dsRNA,而其成本仅为使用商业化体外转录试剂盒的四分之一。为评估RNAi效果,按照每1克虾体肌肉注射2μg dsRNA的剂量,在dsRNA注射后0,6,12和24h采集血淋巴,RT-PCR检测KPI mRNA的基因转录水平。与对照组GFP-dsRNA和NaCl注射组相比,KPI-dsRNA注射组可以在24h内沉默血淋巴中的KPI基因。结果表明该方法是可大规模制备长的dsRNA的方法。; 梁艳Vanvimon SaksamerpromeKallaya Sritunyalucksan黄倢; 关键词：斑节对虾 RNA干扰双链RNA

多溴联苯醚在胶州湾养殖水域含量水平与分布被引量：11: 2010年; 2008年5月和8月,在胶州湾养殖区设置9个站位,分别进行水样和沉积物采集,利用5975气相色谱-质谱联用仪(GC/MS)进行多溴联苯醚测定。结果显示,在该水域水体中共检出4种多溴联苯醚单体,总浓度范围为ND～630.8 pg/L,其中BDE-47是主要污染物;沉积物中共检出8种多溴联苯醚单体,总浓度范围为(189.2～1349.7)×10-12。BDE-47、-99是沉积物中主要污染物。该海域多溴联苯醚的分布特征是靠近胶州湾东北岸的9号、8号站最高。另外,大沽河、桃源河入海口附近的1号站相对偏高,呈现出由东、西向中间方向逐渐递减的趋势。总体结果表明:多数站位8月份∑PBDEs含量高,5月份含量低。; 周明莹张惠珍夏斌崔毅乔向英陈碧鹃冷凯良; 关键词：养殖水域 GC/MS 多溴联苯醚

星突江鲽精子的超微结构被引量：2: 2009年; 应用扫描电镜和透射电镜观察了星突江鲽Platichthys stellatus精子的超微结构。星突江鲽的精子由头部、中段和尾部组成。头部呈球形,主要结构为细胞核。核前端无顶体,后端有植入窝,植入窝较浅,凹入深度约为细胞核直径的1/4。核中染色质致密,但存在染色质较浅的头部凹陷和核泡。中段包括中心粒复合体和袖套。近端中心粒的长轴与基体的长轴相互垂直,呈"T"字型排列,基体的长轴与精子的长轴平行。袖套很浅,其最深处只达到线粒体下端的1/3处。在袖套线粒体的外面,具有大量的椭圆形囊泡存在。尾部细长,主要由轴丝构成,为典型的"9+2"微管结构。鞭毛较粗,长有两排侧鳍,侧鳍不对称。鞭毛细胞质中可见大小不一的椭圆形囊泡存在,囊泡的分布不均匀,一侧囊泡数量较多,另一侧偏少。鞭毛的这种结构与精子的运动相适应。; 刘长琳庄志猛陈四清邹健李学文; 关键词：星突江鲽精子超微结构

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