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外源激素诱导母犬同期发情和排卵试验被引量：1: 2015年; 为取得良好的同期发情效果和排卵率,采用PMSG和HCG激素联合使用诱导母犬发情和排卵。采用外部观法和公犬试情的发情鉴定方法,观察PMSG和HCG对犬诱导发情的影响,结果:PMSG连用5 d的Ⅱ实验组和连用7 d的Ⅲ实验组均表现出100%的发情率,并且均高于连用3 d的Ⅰ试验组的发情率(40%)和空白对照组的发情率(0%)。同时,利用外科手术的方法观察发情母犬排卵情况,结果:Ⅴ组和Ⅵ组2个实验组均获得了100%发情率,发情母犬分别获得55%和75%的排卵率,且排卵率两者差异显著(P<0.05)。试验证明外源使用PMSG和HCG可以有效诱导乏情期母犬同期发情和排卵。; 张跃骏李静李飞翔毛爱国陈方良韦云芳汪斌唐树生万九生; 关键词：工作犬外源激素同期发情诱导排卵

准确确定昆明犬排卵时间的研究被引量：2: 2018年; 为了准确确定昆明犬的排卵时间,适时配种以提高昆明犬的配种效率,试验采用外部观察法,阴道细胞涂片法,试情法,排卵检测试剂盒,测定母犬外周血中雌激素(E2)、促黄体生成素(LH)和孕酮(P)水平,超声波诊断等方法综合判断母犬排卵的最佳时间,通过外科手术观察卵巢输卵管发育排卵情况并进行活体取卵试验验证。结果表明:昆明犬母犬的排卵时间是在LH峰值出现后的48~72 h,即阴道出血后的9~10 d,阴道涂片角质化细胞达到90%,此时P浓度达到(12.79±1.25)ng/m L,超声波诊断可见卵泡。取卵准确率达80%,卵母细胞成熟率为55.0%,平均每只昆明犬取卵4枚。说明根据发情外部表现、阴道黏液涂片、超声波诊断、LH及P水平检测共同运用可以准确确定昆明犬的排卵时间,并通过外科手术进行活体取卵试验,在输卵管内可以收集到发育成熟的卵母细胞。; 李静万九生韦云芳陈方良毛爱国唐树生陈超曹剑魏红江卿玉波龙维虎郭建雄; 关键词：昆明犬发情排卵时间孕酮

流式细胞仪精子分离技术在工作犬繁育中的应用展望被引量：1: 2013年; 动物的性别控制是指通过人为作用使雌性动物按照人们的意愿繁殖出所需性别后代的一门生物技术，该技术具有巨大的利用价值。在人类领域，性别控制最重要的意义在于帮助具有性连锁遗传病的患者选择后代性别，避免遗传病的发生；; 韦云芳唐树生万九生黎立光陈方良杜晓鹏; 关键词：精子分离技术流式细胞仪工作犬性别控制雌性动物

新生昆明犬成纤维细胞系的建立及生物学特性分析被引量：1: 2015年; 本研究旨在探索和建立新生昆明犬成纤维细胞体外培养的技术方法并观察其生物学特性。试验以新生昆明犬耳部皮肤组织为材料,采用胶原酶消化法和细胞冷冻保存技术建立了昆明犬成纤维细胞系,并对所构建的细胞系进行生物学特性研究。结果表明:新生昆明犬成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态;冻存前和复苏后细胞的存活率分别为93.3%和90.8%;生长曲线呈"S"形,倍增时间约为32 h;对所制备的染色体核型分析显示2n=78(XX),细胞染色体中二倍体占主体,约为90%。该细胞系的建立,不仅使昆明犬这一国家种质资源在细胞水平得以保存,而且也为今后开展功勋犬的体细胞克隆等研究奠定了基础。; 韦云芳毛爱国万九生李静李鸿辉陈方良袁再美杜晓鹏唐树生魏红江; 关键词：昆明犬成纤维细胞体外培养冷冻保存

昆明犬胎儿成纤维细胞系的建立及生物学特性分析被引量：9: 2014年; 本研究旨在探索和建立昆明犬胎儿成纤维细胞体外分离、培养的技术方法并观察其生物学特性。试验利用剖腹手术法获得发育30d的昆明犬胎儿12个,性别鉴定结果为7公5母。公、母胎儿体尺和体重分别为:体长1.90cm±0.14cm和2.00cm±0.05cm,体宽0.90cm±0.13cm和0.90cm±0.15cm;体重0.68g±0.17g和0.66g±0.06g,差异均不显著(P>0.05)。以昆明犬胎儿组织为材料,采用胶原酶消化法和细胞冷冻保存技术建立了昆明犬胎儿成纤维细胞系,并对所构建的细胞系进行生物学特性研究。结果表明,分离的胎儿成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,生长曲线呈S型,倍增时间约为36h;冻存前和复苏后的存活率分别为96.1%和94.6%;染色体核型分析显示2n=78(XY),并在体外培养多代后仍能保持正常核型。本研究建立的昆明犬胎儿成纤维细胞系可在体外快速贴壁生长、增殖,进行稳定培养,这不仅使昆明犬遗传资源在细胞水平得以保存,且所获成纤维细胞能作为相关研究中所需细胞的来源。; 韦云芳万九生李静陈方良王佳徐陶袁再美程鲁光富国文毛爱国潘伟荣岳锐唐树生魏红江; 关键词：昆明犬成纤维细胞生物学特性性别鉴定

流式细胞仪分离工作犬XY精子的研究被引量：8: 2015年; [目的]探索适用于犬性别控制的流式细胞仪分离精子的方法。[方法]采集昆明犬和德国牧羊犬的精液,采用不同浓度(6、8、10、12μl/ml)的Hoechst 33342对精液进行染色,探讨不同浓度的荧光染料Hoechst 33342及公犬个体对精子分离效果的影响。[结果]当Hoechst 33342浓度分别为6、8、10μl/ml时,X和Y精子的DNA差异不能被分辨成双峰,只有当Hoechst 33342为12μl/ml时,X/Y双峰能有效并稳定地分离。不同公犬的鲜精死精率与X/Y精子分离速度呈明显负相关性,而分离准确率则与鲜精死精率无明显相关性。[结论]当Hoechst 33342浓度为12μl/ml时,流式细胞仪能将警犬X、Y精子成功分离。选择适宜的种公犬对提高精子的分离效率和分离精液的品质都有重要意义。; 韦云芳张跃骏唐树生陈方良程鲁光黎立光刘庆杜晓鹏毛爱国汪斌万九生; 关键词：流式细胞仪性别控制

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公安部应用创新计划(2011YYCXKMJQ167)