国家自然科学基金(81071158)
- 作品数：19 被引量：100H指数：7
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- 靶向载基因及穿膜肽超声造影剂转染缺氧人脐静脉内皮细胞的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨P-选择素靶向载基因及穿膜肽超声造影剂的制备及转染缺氧损伤型人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的可行性。方法采用机械振荡法及碳二亚胺法制备P一选择素靶向载绿色荧光蛋白基因及穿膜肽超声造影剂，检测其形态分布、浓度、粒径，采用激光共聚焦显微镜观察基因和穿膜肽的分布，用荧光分光光度法计算基因及穿膜肽的包封率。体外培养HUVEC，用过氧化氢处理制备HUVEC缺氧模型，并分为靶向和非靶向载基因及穿膜肽造影剂组进行转染实验。用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况，流式细胞仪检测转染率，并用SPSS17．0统计软件进行t检验及直线相关分析。结果制备的P一选择素靶向载基因及穿膜肽超声造影剂平均粒径约（2．15±0．36）u脚，计数为（1．58±0．23）×10’个／ml。激光共聚焦显微镜下观察到基因和穿膜肽均匀分布在造影剂壁上，基因和穿膜肽的包封率分别为28％[Y=0．932x一0．09（r=0．993，P〈0．05）]和25％[Y=5．875x一0．81（r=0．987，P〈0．05）]。转染24h后，荧光显微镜下观察到靶向和非靶向载基因及穿膜肽造影剂组均有绿色荧光蛋白的表达，流式细胞仪检测靶向组和非靶向组平均转染率分别约为（18．74±0．47）％和（15．34±0．22）％（t=10．923，P〈0．001）。结论P-选择素靶向载基因及穿膜肽超声造影剂能够转染缺氧损伤的HUVEC，这为靶向基因投递提供了新的思路。
- 田菊王志刚任建丽张清凤刘利
- 关键词：造影剂基因穿膜肽转染内皮细胞
- 超声联合阳离子微泡造影剂体外增强基因转染被引量：7
- 2012年
- 目的探讨超声介导自制阳离子微泡破坏、增强基因转染的效果,并与普通脂质微泡对比,寻找一种更可靠、完善的基因载体工具。方法采用水浴机械震荡法,加入DC-胆固醇制备阳离子微泡,观察其物理特性并检测其体外载基因能力。将微泡和质粒DNA加入人脐静脉血管内皮细胞后分为6组,观测不同微泡浓度对细胞存活率的影响,应用荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪检测基因转染率,MTT法分析细胞存活率。结果自制阳离子微泡形态规整、分散度好,最大载基因率为39.7%。超声联合阳离子微泡能够增强基因转染,与普通脂质微泡组相比差异有统计学意义;随着微泡浓度增加,细胞损伤增大。结论采用自制阳离子微泡可在体外实现较高效率的基因转染。
- 张清凤王志刚李攀郑元义田菊王星
- 关键词：超声微泡造影剂基因转移技术
- 多巴酚丁胺负荷二维应变评价心肌存活性的研究
- 目的 探讨二维应变技术联合负荷超声评价犬急性心肌梗死模型中存活心肌的应用价值.方法 24只健康杂种犬,阻断其左冠状动脉前降支90 min后恢复血流灌注120 min,建立急性心肌缺血再灌注模型.运用二维应变-斑点追踪技术...
- 卢岷王志刚冉海涛张茂惠曹小玲张群霞
- 关键词：存活心肌多巴酚丁胺负荷超声心动图
- 新型穿膜肽作为基因运输载体的实验研究被引量：4
- 2011年
- 目的人工设计合成穿膜肽新序列(CGRLWMRWYSPWARRYGC),并于体外考察其作为基因载体的潜力。方法采用Na-芴甲氧羰基(Fmoc)法固相合成穿膜肽新序列,并用异硫氰酸荧光素(FITC)标记N端。高效液相色谱及质谱仪检测其纯度及相对分子质量,流式细胞仪及共聚焦显微镜观察其穿膜能力,荧光显微镜和流式细胞仪观察其携带增强型绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)进入细胞表达情况,MTT评价穿膜肽与质粒复合物的细胞毒性,琼脂糖凝胶电泳检测穿膜肽与质粒的亲和力及对质粒的保护作用。结果合成的穿膜肽纯度为96.13%,相对分子质量为2 348.42,流式细胞仪检测显示荧光阳性细胞平均约占98.81%,共聚焦显微镜可见荧光标记的穿膜肽分布于细胞内;穿膜肽携带质粒在人脐静脉内皮细胞中的表达率平均约为11.44%;不同电荷比的复合物对细胞的活性没有明显影响(P>0.05);琼脂糖凝胶电泳显示当穿膜肽与质粒的电荷比大于2∶1时,质粒不能迁移出来,电荷比为4∶1、8∶1和16∶1的复合物能够抵抗DNA酶Ⅰ的消化作用,以8∶1最为明显。结论人工设计合成的新型穿膜肽能够作为一种潜在的基因运输载体。
- 田菊王志刚任建丽张清凤
- 关键词：固相合成穿膜肽基因载体
- 心肌声学造影评价心肌微循环的临床应用进展被引量：5
- 2012年
- 心肌微循环改变是诸多心血管疾病发生发展的病理生理学基础,及时有效地探查微循环灌注情况对诊断、治疗及判断心血管疾病预后有重要意义。心肌声学造影是诊断心肌微循环灌注的一种新技术,本文就其评估心肌微循环的临床应用进展做一综述。
- 李宜蓁王志刚
- 关键词：心肌声学造影心肌微循环
- 声触诊组织量化技术无创动态评估兔耳增生性瘢痕硬度
- 2013年
- 探讨声触诊组织量化(VTQ)技术无创评估兔耳增生性瘢痕(HS)形成过程中的硬度变化。方法运用VTQ技术在兔耳HS模型形成过程的不同时间点(术前1天,术后第1、3、5、7、11、16、20、28、36、45、60、90、120天)测量其剪切波速度(SWV),比较相邻时间点的SWV值,同时测量二维图灰阶值,对HS剪切波速度值(HSSWV)及灰阶值进行对比分析。结果 HS形成过程中SWV值比较:除术前1天与术后第1天(P=0.099)、术后第60天与术后第90天(P=0.053)差异无统计学意义外,其余相邻时间点差异均有统计学意义(P均<0.05)。兔耳HS形成过程中,HSSWV值与灰阶值呈正相关(r=0.568,P<0.001);而在兔耳HS增生期(术后11～45天),HSSWV值与灰阶值高度相关(r=0.813,P<0.001)。结论应用VTQ技术测得的HSSWV值在量化评估HS硬度改变方面有重要应用价值。
- 游玉芳王志刚郑元义张花宋卫香
- 关键词：剪切波速度增生性瘢痕
- 高频超声生物显微镜动态观察局部注射二丙酸倍他米松治疗病理性瘢痕被引量：1
- 2014年
- 目的采用高频超声生物显微镜(HFB,40MHz)观察二丙酸倍他米松治疗病理性瘢痕的临床效果。方法对39例接受二丙酸倍他米松局部注射治疗患者(治疗组)和20例未接受任何治疗患者(对照组)以40MHz探头行高频超声,于第1、31、61、91天测量瘢痕横径、垂直厚度;以DFY型超声图像诊断仪测量其面积、平均灰度值、声强值;结合温哥华瘢痕量表(VSS)对瘢痕评分。结果治疗组:第31、61、91天较治疗前横径、垂直厚度明显减小(P均<0.05),面积、平均灰度值、平均声强值明显减小(P均<0.05),VSS评分明显降低(P均<0.01);第61天较第31天、第91天较第61天以上各参数均明显减小(P<0.05),评分明显降低(P<0.01)。对照组:各参数及评分均降低,但差异无统计学意义(P均>0.05)。结论高频超声显微镜能无创、定量观察二丙酸倍他米松局部治疗后病理性瘢痕改变,对评价治疗情况有一定临床价值。
- 涂鹏王志刚张群霞游玉芳
- 关键词：超声检查病理性瘢痕倍他米松
- 超声定位辐照载血卟啉微泡治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨超声定位辐照载血卟啉微泡介导药物靶向释放技术治疗兔VX2肝移植瘤的效果。方法利用35只新西兰大白兔建立肝VX2移植瘤模型,并随机均分为超声定位辐照载血卟啉微泡组(US+LMLH组)、超声定位辐照血卟啉组(US+HP组)、超声定位辐照空白脂质微泡组(US+MB组)、单纯载血卟啉微泡组(LMLH组)、单纯血卟啉组(HP组)、单纯超声辐照组(US组)和生理盐水对照组(C组)。治疗前后用二维超声、CDFI及CEUS观察肿瘤大小、回声及血流灌注情况,计算肿瘤体积大小及生长抑制率;同时观察不同处理组肝内转移及远处转移情况;并用透射电镜观察肿瘤细胞的超微结构。结果US+LMLH组肿瘤内部呈混合回声,CDFI及超声造影显示肿瘤的滋养血管明显减少,生长抑制率高于其他各组;在肝内及远处转移方面,US+LMLH组较少转移,明显优于其他各组;超微结构显示US+LMLH组细胞膜破坏,线粒体明显肿胀。结论超声定位辐照载血卟啉微泡能有效激活血卟啉,具有较强的体内抑瘤效果。
- 张勇王志刚康娟冉海涛任建丽李攀
- 关键词：超声检查微泡血卟啉声动力疗法肝肿瘤
- 叶酸受体靶向液态氟碳纳米粒造影剂的制备及体外寻靶被引量：11
- 2012年
- 目的制备叶酸受体靶向的被脂质包裹的液态氟碳纳米粒造影剂,鉴定其基本性质,观察其体外靶向性能。方法以氯仿将偶联叶酸的磷脂[DSPE-PEG(2000)]按照一定比例溶解在成膜材料中,用旋转蒸发仪去除有机溶剂成膜,加入磷酸盐缓冲液重新水合后,在悬液中逐滴加入适量液态氟碳,均质乳化后得到叶酸受体靶向的纳米粒造影剂。在人卵巢癌SKOV3细胞中验证该造影剂的靶向性能(靶向造影剂组),并与不带叶酸的普通造影剂组和游离叶酸干预组相比较。结果叶酸受体靶向液态氟碳纳米粒造影剂外观与普通造影剂无明显差别。体外靶向实验发现此纳米粒造影剂聚集且牢固地黏附于SKOV3细胞,而普通造影剂组和游离叶酸干预组则未见明显特异性结合。结论成功制备了偶联叶酸的被脂质包裹的液态氟碳纳米粒造影剂,该造影剂对高表达叶酸受体的SKOV3细胞具有较强的亲和力,有望成为卵巢癌靶向显影与治疗的理想分子探针。
- 周洋郑元义冉海涛余进洪王志刚
- 关键词：叶酸受体靶向液态氟碳造影剂
- 腺苷负荷声学造影评价犬心肌血流灌注被引量：2
- 2012年
- 目的探讨腺苷负荷声学造影方法定量评价不同程度缺血心肌的可行性。方法 28只健康杂种犬分为正常对照组(3只)和实验组(25只),开胸建立不同程度左前降支狭窄模型。分别实施静息、腺苷负荷心肌声学造影及氯化三苯基四氮唑、伊文思蓝染色。使用QLab高级量化软件选取ROI分析,获得曲线峰值强度(A),曲线斜率(β)和灌注量(A×β)。结果根据冠脉造影结果将实验组分为3个亚组:Ⅰ组50%～75%狭窄,Ⅱ组76%～99%狭窄,Ⅲ组100%梗阻。负荷前A值、β值和A×β值在正常对照组和实验组中逐级下降,而Ⅰ组与正常对照组间差异无统计学意义(P均>0.05);负荷后正常对照组A值、β值和A×β值均增加,Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组减少。缺血和梗死情况与标本染色一致。结论负荷声学造影可以定量评价犬缺血区心肌缺血程度。
- 李宜蓁李兴升王志刚卢岷
- 关键词：腺苷心肌灌注显像冠状血管
