福建省自然科学基金(E0510018)
- 作品数:2 被引量:6H指数:1
- 相关作者:陈宏文方柏山聂金峰胡宗定更多>>
- 相关机构:华侨大学天津大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 无电荷超滤膜酶膜反应器中的辅酶截留被引量:1
- 2008年
- 构建了无电荷超滤膜酶膜反应器,考察了影响辅酶截留率的多种因素。实验结果表明,连续超滤膜反应器中加入聚乙烯亚胺(PEI,50 kDa),NAD+能够有效地被超滤膜截留。在Tris-HCl缓冲液中,PEI/NAD+摩尔比为5:1时,达到较高的辅酶截留率(R=0.823)。溶液离子强度的增加减少辅酶的截留率,但可增加超滤膜超滤流速。在含盐溶液中,添加0.5%或1.0%的牛血清白蛋白可增加NAD+截留率。本装置对NADH的截留率高于NAD+的截留率,因此PEI适用于辅酶再生体系。同时还考察了1,3-丙二醇酶催化体系中PEI对甘油脱氢酶和1,3-丙二醇氧化还原酶酶活力的影响。
- 陈宏文方柏山胡宗定
- 关键词:酶膜反应器辅酶截留聚乙烯亚胺
- 克雷伯杆菌1,3-丙二醇氧化还原酶的分离纯化及其酶学性质被引量:5
- 2009年
- 在有氧条件下,利用DEAE Sepharose Fast Flow弱阴离子离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B亲和层析,同时分离并提纯克雷伯杆菌胞内的1,3-丙二醇氧化还原酶和甘油脱氢酶.研究表明,1,3-丙二醇氧化还原酶的纯化倍数为35.86倍,回收率为5.17%,该酶最适表观反应温度为57℃,最适反应pH值为9.5.在30℃及pH-8.0~10.0时,该酶具有良好的稳定性.在45℃和pH-9.5条件下,该酶以1,3-丙二醇和NAD^+为底物,其米氏常数K。分别为15.8,0.2mmol·L_。.1,3一丙二醇氧化还原酶对生理反应底物3-羟基丙醛活性最大,对其他醇类也有氧化能力.Mn^2+对酶有显著激活作用,巯基保护剂能明显提高酶的活力.
- 陈宏文聂金峰方柏山陈国华(英文审校)
- 关键词:1,3-丙二醇氧化还原酶克雷伯杆菌甘油脱氢酶酶学性质纯化