国家自然科学基金(30200264) 作品数:18 被引量:121 H指数:6 相关作者: 贺伟峰 郑峻松 吴军 陈希炜 易绍萱 更多>> 相关机构: 第三军医大学西南医院 第三军医大学 第三军医大学新桥医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
激活T细胞负性共刺激信号对大鼠同种异体肾移植存活的影响 被引量:5 2006年 目的观察激活负性共刺激信号程序性死亡因子及配体(PD1-PDL1)对延长移植肾存活的效能。方法以PDL1Ig基因重组腺病毒为载体,将PDL1Ig基因转入BN大鼠供肾,以Lewis大鼠为受体,行同种肾移植为转染组,并以未转染BN供肾移植给Lewis受体为对照组;观察移植肾存活时间和术后肾功能变化。结果转染组移植肾存活(36±7.3)d,较对照组移植肾存活时间(8.6±1.2)d明显延长;移植组术后血清肌酐较同期对照组明显为低。结论PDL1基因局部转染可明显延长移植肾存活时间。 冯嘉瑜 张艮甫 黄赤兵 王平贤 范明齐关键词:基因治疗 肾脏移植 共刺激信号 肾移植大鼠慢性排斥反应模型的建立 被引量:2 2005年 目的:建立一种方便、实用的慢性器官移植排斥反应模型,为研究器官移植后慢性排斥反应的发病机制、预防和治疗提供平台。方法:以近交系F344大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合。施行原位异体肾移植。移植后即给与环孢素腹腔注射。并于术后4周后行病理检查。结果:所有手术均于60min内完成。所有的受体均存活超过60天,围手术期死亡数为零。受体无急性排斥反应发生。4周后可见典型的慢性排斥反应发生。结论:建立了大鼠慢性排斥反应肾移植模型。为研究慢性排斥反应的发生、进展和干预治疗提供了良好的平台。 冯宁翰 钱立新 华立新 夏国伟 吴军 贺伟峰 宋宁宏 乔迪 徐正铨 张炜 吴宏飞 眭元庚关键词:肾移植 排斥反应 Treg细胞对细胞毒性T淋巴细胞抗胃癌效应中释放穿孔素、干扰素的影响 被引量:3 2008年 目的观察Treg细胞对细胞毒性T淋巴细胞(CTL)抗胃癌效应中释放穿孔素、干扰素的影响。方法构建CTL细胞对MFC胃癌细胞有效杀瘤体系,加入0.5×10^5到50.0×10^5不同剂量的Treg细胞,观察CTL杀瘤活性抑制并检测穿孔素、干扰素浓度。结果Treg数量达到5.0×10^5后CTL杀瘤活性受明显抑制,穿孔素、干扰素浓度明显降低(P〈0.05)。结论Treg可通过降低CTL细胞分泌穿孔素、干扰素而抑制其杀瘤活性。 曾冬竹 雷晓 石彦 郑峻松 罗华星 余佩武关键词:胃癌 穿孔素 干扰素 CD154胞外区基因局部修饰对大鼠移植肾存活的影响 被引量:5 2004年 目的 观察CD15 4胞外区基因局部修饰大鼠供肾对延长移植肾存活的效能。方法 以CD15 4基因重组腺病毒为载体 ,将CD15 4胞外区基因转入BN大鼠供肾 ,以Lewis大鼠为受体 ,行同种肾移植为转染组 ,并以未转染BN供肾移植给Lewis受体为对照组 ;观察移植肾存活时间和术后肾功能变化。结果 转染组移植肾存活 ( 2 8± 7.3 )d ,较对照组移植肾存活时间 ( 8.6± 1.2 )d明显延长 ;移植组术后血清肌酐较同期对照组明显为低。结论 CD15 冯嘉瑜 张艮甫 王平贤 范明齐 贺伟峰关键词:CD154 基因治疗 肾脏移植 共刺激信号 细胞因子及胸腺微环境影响T_(reg)细胞增殖机制研究 被引量:11 2003年 目的 通过体外培养体系添加细胞因子和在体细胞因子胸腺注射的方法,探索扩增低比例低增殖活性的Treg细胞的有效体内外方法。方法采用不同浓度细胞因子IL-10和TGF-β1作为诱导剂,分析二因子体外诱导Treg细胞增殖的有效性及最适浓度,同时以二因子胸腺注射的方法,分析在成年鼠体内诱导Treg细胞增殖的可能性。结果 150 ng/mlIL-10浓度能够明显诱导Treg细胞增殖,经48、96、144 h诱导后,其增殖比例分别达到10%、18%和20%,而TGF-β1的使用浓度需达到300ng/ml;IL-10胸腺注射后同样可提高Treg细胞的比例[第7天(5.50±1.38)%,P<0.05;第10天(6.65±2.54)%,P<0.01];TGF-β1诱导后第5天的比例为(5.19±1.69)%,较对照组也有明显升高(P<0.05)。结论体外培养体系添加诱导因子增殖的方法是扩增低比例低增殖活性Treg细胞的首选方法,IL-10体内外诱导Treg细胞增殖的效能均强于TGF-β1。 郑峻松 吴军 易绍萱 贺伟峰 陈希炜 解志杰 彭双发关键词:调节性T细胞 细胞增殖 细胞因子 胸腺 双向电泳-质谱法分析人CD4^+CD25^+T细胞与CD4^+CD25^-T细胞蛋白质组差异 被引量:2 2003年 目的 用双向凝胶电泳-质谱法(2-DE/MS)分析人CD4+ CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞表达的蛋白质组,建立二者之间的差异表达谱。方法提取人脾脏源CD4+ CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞总蛋白质,双向电泳分离蛋白,比较两种细胞的蛋白质组表达差异,对差异蛋白质点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser des-orption/ionization time of flying mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)进行鉴定。结果胶图差异分析发现25个表达水平存在明显差异的蛋白质点,其中17个点在CD4+CD25-T细胞上调,8个点在CD4+CD25+T细胞上调。质谱初步鉴定出15个差异蛋白质点。结论CD4+ CD25+T细胞和CD4+ CD25-T细胞表达蛋白质组存在差异,这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究调节性T细胞功能相关蛋白质。 彭双发 吴军 徐宁志 郑峻松 贺伟峰 易绍萱 陈希炜 袁军关键词:CD4^+CD25^+调节性T细胞 蛋白质组 用负载供体抗原的致耐受性树突状细胞延长大鼠移植肾存活 被引量:10 2003年 目的 研究负载供体抗原的致耐受性受体树突状细胞(Dendritic cells,DC)对移植肾存活的影响。方法 以BN、Lewis大鼠为肾移植供、受体;受体骨髓源性DC负载供体淋巴细胞抗原并与共刺激阻断剂CTLA4Ig共孵育;将上述DC于肾移植前24 h经股静脉注入受体(治疗组),未注射DC的受体为对照组;观察各组移植肾存活时间,术后第20天,MTT法检测受体脾细胞对供体及无关抗原刺激的反应。结果移植肾存活时间:与对照组相比,治疗组移植肾存活时间显著延长[(54.6±9.5)d vs(8.3±0.8)d,P<0.01]。术后第20天,治疗组脾细胞对供体抗原刺激的反应明显低于正常对照[(0.17±0.04)vs(0.74±0.06),P<0.01],而受体对无关抗原刺激的反应与正常对照无显著差异[(0.72±0.04)vs(0.69±0.07),P>0.05]。结论 负载供体抗原的致耐受性受体DC可以特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应、明显延长大鼠移植肾存活时间。 黄赤兵 吴军 张艮甫 陈希炜 贺伟峰关键词:树突状细胞 抗原负载 免疫耐受 大鼠双侧供肾移植模型的建立 被引量:3 2005年 目的:首创了一种可以同时取供体的双肾作供肾的大鼠肾移植模型。方法:以近交系Brown鄄Norway大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合。结果:手术均于60min内完成。所有的受体均存活超过7天,围手术期死亡数为0。结论:首创双侧供肾大鼠肾移植模型是一种节省、可靠、实用的大鼠肾移植模型。 冯宁翰 钱立新 华立新 郑峻松 宋宁宏 眭元庚 张炜 吴宏飞关键词:肾移植 一种从培养上清获得高滴度腺病毒的方法 被引量:1 2003年 目的 寻找一种有效的提高腺病毒滴度而又不损害其活性的方法。方法 腺病毒原液升华冻干后溶解稀释,通过斑点形成实验和免疫组化方法检验其感染活性。结果 升华冻干后稀释的腺病毒液感染滴度达到4.4×10^(12)pfu。结论 冻干、稀释是一种提高腺病毒滴度的有效方法。 杨世昕 吴军 罗高兴 易绍萱 贺伟峰 黄赤兵 周立新 李彦 张宁 陈希炜 张小蓉关键词:滴度 腺病毒 冻干 免疫组化法 一种双侧供肾大鼠肾移植模型的建立 被引量:11 2006年 目的探讨同时取大鼠双侧肾脏分别移植的可行性,其目的是节省实验费用、缩短手术时间。方法以近交系Brown-Norway大鼠为供者,同时取其双肾作为供肾,原位灌洗;近交系Lewis大鼠为受者,切除其左肾,移植供肾1只。以冠状动脉造影支架为支撑行供肾静脉与受者肾静脉端端吻合,供肾动脉与受者的腹主动脉行端侧吻合,供肾输尿管膀胱瓣与受者的膀胱吻合。受者术中预置右侧肾脏血管体外结扎线,术后3d结扎。结果每只供鼠手术耗时约40min,热缺血时间约10s,冷缺血时间约20min。40次实验均获成功,移植肾功能正常,在不用免疫抑制剂的情况下,受者存活时间均超过7d。结论同时取双侧肾脏分别移植给2个受者是可行的,可降低实验成本;要获得相同数量的供肾,同时取双肾的耗时较仅取单侧肾脏大大缩短。 冯宁翰 钱立新 华立新 宋宁宏 吴军 贺伟峰 冯嘉瑜 郑峻松 乔迪 眭元庚 吴宏飞 张炜关键词:肾移植