湖北省科技攻关计划(2006AA3011)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
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- 小鼠巨细胞病毒抑制神经干细胞分化及其机制研究被引量：7
- 2006年
- 目的探讨小鼠巨细胞病毒(MCMV)对体外培养的神经干细胞(NSCs)分化的影响及其机制。方法体外分离、培养BABL／c胎鼠NSCs,利用NSCs向神经细胞分化模型,用感染复数(MOI)为1的含Lacz报告基因的重组MCMV毒株RM461进行感染,通过免疫组化、流式细胞术和RT-PCR检测MCMV感染后Nestin、GFAP和NSE阳性细胞比率及对神经干细胞分化相关信号分子Wnt-1和neurogenin 1(Ngn1)基因表达的影响。结果体外分离培养的NSCs,神经干细胞特异性标志Nestin表达强阳性,并可进一步分化为GFAP阳性的星形胶质细胞和NF-200、NSE阳性的神经元。当NSCs分化培养2 d,感染组和未感染组Nestin阳性细胞分别为(62．2±1．8)％和(37．2±2．4)％(t= 4．62,P<0．01),差异有统计学意义;而GFAP阳性细胞的比例分别为(37．4±1．6)％和(50．3±1．8)％(t=9．89,P<0．01),NSE阳性细胞的比例分别为(8．9±0．8)％和(23．4±1．3)％(t=5．09, P<0．01),差异均有统计学意义。感染组和未感染组Wnt-1基因的相对表达量分别为0．14±0．03和0．32±0．04(t=7．21,P<0．01),Ngn1基因的相对表达量分别为0．09±0．01和0．21±0．02(t= 10．73,P<0．01),差异均有统计学意义。结论(1)CMV可抑制NSCs分化,这可能是CMV致脑发育异常的重要机制;(2)CMV感染可抑制Wnt-1和Ngn-1的基因表达而影响NSCs分化,人为调控这两条通路可能为探寻防治CMV感染致脑发育异常的方法提供新策略。
- 周玉峰方峰董永绥周华甄宏刘瑾李革
- 关键词：巨细胞病毒干细胞细胞分化胞间信号肽类和蛋白质类神经组织蛋白质类
- 星形胶质细胞条件培养液促进胚胎干细胞分化为神经元样细胞的实验研究被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨星形胶质细胞条件培养液在体外能否促进胚胎干细胞(ESCs)向神经元方向分化。方法:在Bain等建立的4-/4+方案基础上,分成两组:单用ATRA组和ATRA联合胎脑星形胶质细胞条件培养液组,分3阶段诱导ESCs定向生成神经元样细胞。形态学观察及畸胎瘤形成试验对ESCs的全能性进行鉴定;免疫组化染色法检测nestin、GFAP、NSE和NF-200的表达对诱导过程进行动态监测。结果:(1)体外培养的小鼠ESC-D3细胞在胚胎成纤维饲养层细胞上连续传代培养,仍保持向3胚层分化的能力。(2)在诱导分化阶段,联合诱导组分化细胞NF-200和NSE的表达阳性率高于单用ATRA组。(3)联合诱导组最终诱导ESCs生成纯度高达73.5%神经元样细胞。结论:采用胚胎脑星形胶质细胞条件培养液可较高产率及纯度地促进ESCs生成神经元样细胞,值得推广应用。
- 周玉峰方峰付劲蓉李革董永绥
- 关键词：胚胎干细胞神经元星形细胞
