国家自然科学基金(50273019)
- 作品数：7 被引量：101H指数：5
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- 相关机构：山东大学大连理工大学更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 酿酒酵母工业菌株胁迫条件耐受性分析被引量：37
- 2006年
- 对酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)工业菌株胁迫条件,包括高浓度酒精、高渗透压、高温、营养饥饿、氧化胁迫、糠醛毒性的耐受性进行了分析,同时测定了抗生素G418对这些菌株的最低抑菌浓度。结果表明,所测定的酵母菌株对这些逆境条件的耐受性有明显差别,表现出良好耐受性的是6508和安琪酵母菌株,同时多倍性的酿酒酵母工业菌株的耐受性均比单倍性实验室菌株高。
- 刘向勇张小华鲍晓明
- 关键词：耐受性酿酒酵母发酵
- 酒精生产酵母菌株木糖代谢工程及其发酵工艺的初步研究
- ＜正＞燃料酒精是公认的最有发展前景的可再生清洁能源之一,以木质纤维素为原料是燃料酒精规模化应用的前瞻性研究课题。木糖是木质纤维素水解物中含量仅次于葡萄糖的一种单糖,对木糖的有效利用是木质纤维素生物转化生产酒精的关键环节之...
- 鲍晓明史文龙王颖
- 关键词：共发酵木糖乙醇
- 文献传递
- 酿酒酵母工业菌株中XI木糖代谢途径的建立被引量：32
- 2005年
- 根据代谢工程原理,采取多拷贝整合策略,利用整合载体pYMIKP,将来自嗜热细菌Thermusthermophilus的木糖异构酶(XI)基因xylA和酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)自身的木酮糖激酶(XK)基因XKS1,插入酿酒酵母工业菌株NAN-27的染色体中,得到工程菌株NAN-114。酶活测定结果显示,NAN-114中XI和XK的活性均高于出发菌株NAN-27,表明外源蛋白在酿酒酵母工业菌株中得到活性表达。对木糖、葡萄糖共发酵摇瓶实验结果表明,工程菌NAN-114消耗木糖4.6g/L,产生乙醇6.9g/L,较出发菌株分别提高了43.8%和9.5%。首次在酿酒酵母工业菌株中建立了XI路径的木糖代谢途径。
- 沈煜王颖史文龙刘向勇鲍晓明曲音波
- 关键词：木糖木糖异构酶木酮糖激酶工程菌株代谢途径活性表达
- 木糖异构酶在酿酒酵母细胞表面的展示被引量：2
- 2006年
- 将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus的木糖异构酶基因xylA,与酿酒酵母(Sac-charomyces cerevisiae)a-凝集素表面展示载体pYD1的Aga2p亚基C端序列融合。编码融合蛋白的基因序列前接上半乳糖诱导型启动子。用LiAc完整细胞法转化酿酒酵母EBY100。含重组质粒的菌株EBY100/pYD-xylA经半乳糖诱导表达外源融合蛋白,免疫荧光显微镜结果显示外源蛋白被锚定在细胞壁上,木糖异构酶活性测定结果表明,细胞壁上酶活测定值为1.52U,木糖异构酶在酿酒酵母细胞壁上得到活性表达。
- 沈煜侯进王芳鲍晓明曲音波
- 关键词：木糖异构酶酿酒酵母木糖
- 木糖异构酶在酿酒酵母表面表达及对木糖代谢影响的初步研究被引量：8
- 2006年
- 利用α-型酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表面展示系统的载体,将来源于嗜热细菌Thermus thermophilus的木糖异构酶基因xylA,插入到酿酒酵母蔗糖酶信号肽序列与α-凝集素的C端编码序列之间,形成融合表达框,构建重组质粒pSY-xy222,转化酿酒酵母H158。含重组质粒的菌株H158-SXI木糖异构酶活性测定表明,细胞壁上酶活测定值为1.53 U,木糖异构酶在酿酒酵母细胞壁上得到活性表达。木糖葡萄糖共发酵结果显示,重组菌株木糖利用率较出发菌株提高了17.8%。
- 侯进沈煜鲍晓明
- 关键词：酵母表面展示木糖异构酶酿酒酵母
- P137G点突变对嗜热细菌木糖异构酶酶活性及热稳定性的影响被引量：2
- 2006年
- 利用重叠延伸法对嗜热细菌(Thermus thermphilus)的木糖异构酶基因xylA进行体外P137G定点突变,通过酿酒酵母表达载体XM204将突变基因xylA137引入酿酒酵母H158中,得到重组菌株H158-XI137.酶活分析表明,H158-XI137在中温条件下的酶活有很大的提高,与对照菌株H158-XI相比,30℃时的酶活提高1倍,并且拓宽了最适反应pH,但是其热稳定性大大降低.结果表明,嗜热细菌木糖异构酶137位的Pro对维持其热稳定性起到重要的作用,并且对其酶学性质有很大的影响.
- 郭亭鲍晓明
- 关键词：木糖异构酶定点诱变热稳定性脯氨酸
- 木酮糖激酶表达水平对酿酒酵母木糖代谢产物流向的影响被引量：14
- 2004年
- 在酿酒酵母中分别引入真菌和细菌的木糖代谢关键酶 ,木糖还原酶基因XYL1、木糖醇脱氢酶基因XYL2和木糖异构酶基因xylA .并在此基础上以共转化策略超表达下游关键酶木酮糖激酶基因XKS1.与亲本菌株相比 ,用pMA91和YEp2 4质粒表达XKS1的重组菌株 ,木酮糖激酶 (xylulokinase,XK)活性分别提高了 14和6 7倍 .在限氧条件下 ,重组菌株对木糖和葡萄糖的共发酵结果显示 ,表达XYL1,XYL2以及XKS1的重组菌株HSXY 2 5 1木糖消耗为 12 4 g/L ,提高了 12 0 9% ,乙醇产量达到 9 4 g/L ,提高了 36 % ,副产物木糖醇产量为 0 7g/L ,下降了 84 9% .
- 沈煜郑华军王颖鲍晓明曲音波白凤武
- 关键词：木糖木酮糖激酶酿酒酵母代谢产物乙醇
- 稳定高效表达木糖还原酶基因工业酿酒酵母的构建及木糖醇发酵的初步研究被引量：14
- 2006年
- 将树干毕赤氏酵母(Pichia stipitis)木糖还原酶基因XYL1连接到适用于酿酒酵母工业菌株的多拷贝整合载体pYMIKP中,构建得到表达质粒pYMIKP-XYL1,转化酿酒酵母工业菌株Saccharomyces cerevisiae6508。在G418平板上筛选转化子,得到含高拷贝木糖还原酶基因的酿酒酵母重组菌株XGH2,,该菌株的木糖还原酶比活力为0.8 U/mg(蛋白),比出发菌株提高了80倍以上,表明外源基因在工业菌株中实现了高效表达。摇瓶发酵结果显示,重组菌株XGH2木糖消耗为27.9 g/L,木糖消耗率为51%;木糖醇产量为30.2 g/L,木糖醇的转化率大于1.0 g/g木糖。
- 李敏马涛生举正郭亭鲍晓明
- 关键词：木糖还原酶酿酒酵母
- 木糖代谢工程在酿酒酵母工业菌株中的建立
- 王颖史文龙刘向勇沈煜鲍晓明白凤武曲音波
- 文献传递
- 在木糖代谢重组酿酒酵母中超表达NADH激酶对木糖代谢的影响(英文)
- 辅酶代谢不平衡是限制重组酿酒酵母利用木糖的一个重要因素。在本工作中,为研究NADH转变成NADPH对代谢的影响,我们将POS5基因或者去除了线粒体导肽的POS5基因分别引入木糖利用重组酿酒酵母,实现NADH激酶在酵母线粒...
- 侯进鲍晓明Goutham VemuriLisbeth Olsson
- 关键词：NADPHXYLOSE
- 文献传递
