黑龙江省卫生厅科研项目(2007-021)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
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- 发文基金：黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
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- 稳定表达nucleostemin-siRNA的肿瘤细胞克隆的筛选和鉴定
- 2009年
- 目的:用脂质体法建立nucleostemin(NS)基因特异性siRNA阳性细胞克隆,为深入研究NS基因在胃癌细胞增殖调控中的作用和机制提供理想的生物学模型。方法:试剂盒法将真核表达载体PCDNA4/C-NS-silencer质粒大量扩增,然后以限制性切酶PVUI酶切线性化处理,用LipofectamineTM2000 Reagent将PCDNA4/C-NS-silencer及其对照空载体转染胃癌SGC-7901细胞,经Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定细胞克隆外源基因整合阳性。结果:经Zeocin抗生素压力筛选后两组细胞均收获多个细胞克隆;PCR结果表明两组细胞克隆外源基因整合阳性。结论:成功建立表达NS-siRNA的胃癌SGC-7901细胞克隆。
- 郑学芝周冬云孙卫念红李丽徐秋玲
- 关键词：细胞克隆
- Nucleostemin基因沉默对食管癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨RNA干扰沉默Nucleostemin(NS)基因后对食管癌Eca-109细胞株增殖和凋亡的影响。方法用NS基因特异性siRNA表达载体转染食管癌Eca-109细胞株,通过绘制细胞生长曲线和克隆形成实验检测细胞增殖能力;CCK-8法测试细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测NS基因表达量的变化,TUNEL法和DNA Ladder检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,S组细胞的增殖速率降低,24、48及72h细胞增殖抑制率分别为60.32%、72.29%和86.00%;NS基因表达量下降;细胞凋亡指数增加(18.28%),可见梯状DNA降解带。结论 NS基因沉默导致食管癌Eca-109细胞株增殖抑制,凋亡增加。
- 郑学芝孙卫张绪东李丽徐秋玲周冬云
- 关键词：NUCLEOSTEMINRNA干扰食管癌细胞增殖
