国家自然科学基金(30200296)
- 作品数：5 被引量：43H指数：3
- 相关作者：魏于全杨金亮宋鑫柳斌赵霞更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院四川大学新乡医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用蛋白印迹-免疫沉淀-质谱法筛选卵巢癌肿瘤抗原被引量：2
- 2005年
- 背景与目的肿瘤抗原的筛选对卵巢癌的早期诊断有重要意义。目前,噬菌体抗体库技术(phageantibodylibrary)、核糖体展示技术(ribosomedisplay)和血清学筛选重组cDNA表达文库(serologicalanalysisofrecombinantcDNAexpressionlibraries,SEREX)技术等作为常用的肿瘤抗原筛选方法已得到广泛应用。本研究采用蛋白印迹鄄免疫沉淀鄄质谱方法筛选和鉴定卵巢癌肿瘤抗原,以期建立一种新的筛选肿瘤抗原的方法及技术路线。方法应用蛋白印迹(Westernblot)法筛选出差异明显的卵巢癌患者血清,用该血清与SKOV3细胞裂解物反应,免疫沉淀富集抗原,与正常血清的免疫沉淀样品比较,获得差异蛋白条带,然后进行质谱鉴定、生物信息学分析。结果采用蛋白印迹筛选到标记为7号的卵巢癌患者血清,与其他血清比较有明显的差异,经免疫沉淀、聚丙烯酰胺凝胶电泳与正常血清免疫沉淀样品比较,发现在接近66.2ku的位置处有一差异蛋白条带,经质谱鉴定、生物信息学分析为热休克蛋白(heatshockprotein,HSP)70及细胞角蛋白(cytokeratin)9。结论采用蛋白印迹鄄免疫沉淀鄄质谱法进行卵巢癌肿瘤抗原的筛选和鉴定是一种行之有效的方法。
- 柳斌杨金亮宋鑫黄欣阚兵秦慧文艳君赵霞魏于全
- 关键词：卵巢肿瘤免疫沉淀质谱
- 血清蛋白质组学的研究进展被引量：3
- 2005年
- 宋鑫杨金亮魏于全
- 关键词：血清蛋白蛋白质组学
- 几种双向凝胶电泳蛋白质检测方法的比较被引量：32
- 2006年
- 本研究对蛋白质染色法进行比较和分析,以求获得满足蛋白质组研究所需的适宜的蛋白质检测法。实验采用2-D电泳分离急性早幼粒白血病细胞株NB4的全蛋白及1-D电泳分离蛋白质分子量标准物,从蛋白质检测的灵敏性、质谱兼容性、操作的简便性等角度,比较了传统考马斯亮蓝染色法、胶体考马斯亮蓝染色法、改良考马斯亮蓝染色法和银染法4种蛋白质着色法对凝胶分离蛋白质的检测影响,探讨了影响蛋白质染色与鉴定的影响因素。结果显示,银染检测灵敏度最高,但质谱鉴定相容性差,鉴定率近10%;改良考马斯亮蓝染色法检测灵敏度也高,可达4ng/spot,质谱鉴定率可接近55%。结论:改良考马斯亮蓝染色法的蛋白质检测灵敏度高,与质谱兼容好,能满足蛋白质组研究需要。
- 秦慧刘霆柳斌宋鑫黄欣杨金亮赵霞魏于全
- 关键词：蛋白质组双向凝胶电泳蛋白质检测银染
- 肾母细胞瘤相关基因新进展被引量：4
- 2006年
- 与肾母细胞瘤相关的基因和染色体位点一直是国内外研究热点,主要包括WT1、WT2、染色体16q FWT1和FWT2、P53、βcatenin和1p和7p等。本文结合国内外最新科研成果,对这些基因的功能研究及其与肾母细胞瘤的关系进行综述。
- 吴红波赵美英李建华魏于全文艳君
- 关键词：儿童肾母细胞瘤基因突变
- 应用蛋白质组技术对维甲酸耐药相关蛋白的初步分析被引量：2
- 2006年
- 目的探讨采用蛋白质组学技术研究维甲酸的耐药机制。方法提取维甲酸敏感细胞株NB4及维甲酸耐药细胞株MR2的总蛋白,进行双向凝胶电泳识别差异表达蛋白,经质谱分析、数据库搜索进行蛋白鉴定。结果单张凝胶电泳图上呈现约600多个蛋白点,组间的匹配性较好,初步筛选出三个表达差异蛋白,经鉴定分别为DJ-1蛋白、热休克蛋白70及KIAA1289未知功能蛋白。结论应用双向电泳连接质谱的蛋白质组学方法有助于筛选到耐药相关的表达蛋白,为进一步研究维甲酸耐药机制提供分子基础。
- 秦慧刘霆杨金亮杨寒朔孟文彤阚兵魏于全赵霞柳斌宋鑫
- 关键词：蛋白质组学双向凝胶电泳
