国家高技术研究发展计划(2011AA10A210)
- 作品数：31 被引量：179H指数：7
- 相关作者：张培君龚玉梅周洪友刘思国于申业更多>>
- 相关机构：吉林大学北京市农林科学院畜牧兽医研究所内蒙古农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生化学工程生物学更多>>
- 禽霍乱巴氏杆菌的分离 鉴定与致病性研究被引量：24
- 2013年
- 禽巴氏杆菌病又称禽霍乱,是由多杀性巴氏杆菌所引起的鸡、火鸡、鸭、鹅等禽类的一种出血性、败血性传染病。禽巴氏杆菌病在我国有些地区的养鸡场发病严重,常造成严重的经济损失,是危害养禽业的重要传染病之一。2011年10月广西某鸡场发生产蛋鸡急性致死病例,流行病学与临床剖检结果疑似禽巴氏杆菌感染所致疾病。分离的病原镜检可见革兰染色阴性、瑞氏染色两极浓染的小杆菌,16SrRNA序列分析表明,该菌与禽巴氏杆菌的同源性为98%,经分型PCR鉴定该菌为A型巴氏杆菌。致病性试验结果表明,该菌对鸡表现为较高的致病性,人工感染100CFU即能导致10周龄的鸡3d内死亡。药敏试验结果表明,该菌对环丙沙星、恩诺沙星、四环素、痢特灵、氧氟沙星敏感,通过鸡场彻底消毒并结合使用恩诺沙星和四环素进行治疗,控制了该病的发生。
- 于成接丁优玲华亚峰金梅林张安定
- 关键词：多杀性巴氏杆菌PCR
- 鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因缺失株平衡致死系统的构建及生物学特性分析被引量：1
- 2019年
- 本研究旨在构建基于减毒鼠伤寒沙门菌的平衡致死系统。将打靶基因片段Cat基因重组入鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因位置,之后将温敏型质粒pCP20转入菌体中用以消除Cat基因片段,通过PCR技术两步法筛选出缺失株Δasd LH430;将asd+的原核表达质粒pYA3493转入Δasd LH430,经PCR及测序鉴定表明鼠伤寒沙门菌平衡致死系统Δasd LH430(pYA3493)构建成功。对构建的基因缺失株研究表明,该缺失株失去了在二氨基庚二酸(DAP)阴性环境中生存的能力;糖发酵试验表明,缺失菌株在利用碳源的能力方面与亲本菌株保持一致;9种生化试验结果显示,缺失菌株遗传了亲本菌株的生化特性;遗传稳定性试验表明,缺失菌株能够稳定遗传缺失的423 bp的基因片段;将绿色荧光基因转入所构建的平衡致死系统,成功构建携带绿色荧光基因的重组菌Δasd LH430(pYA-gfp),对其研究表明该重组菌能够有效表达绿色荧光蛋白。本研究成功构建了鼠伤寒沙门菌平衡致死系统Δasd LH430(pYA3493),能够有效表达所携带的基因,该系统可作为疫苗活载体来携带外源基因。
- 张明亮孙长江顾敬敏崔子寅韩文瑜
- 关键词：鼠伤寒沙门菌生物学特性
- 生防菌哈茨木霉Trichoderma harzianum T4对西瓜根围土壤细菌群落的影响被引量：7
- 2013年
- 采用平板培养、末端限制性片段长度多态性(terminal restriction fragment length polymorphism,T-RFLP)以及变性梯度凝胶电泳(denatured gradient gel electrophoresis,DGGE)的方法相结合探讨生防菌哈茨木霉Trichoderma harzianum T4对大棚西瓜根围土壤细菌群落及氨氧化细菌群落的影响,为其在田间应用的生态安全性的评估提供支撑。末端限制性片段长度多态性以及变性梯度凝胶电泳的结果均表明哈茨木霉T4施入田间约四周内对根围土壤细菌群落产生明显的影响,随后这种扰动现象逐渐减小。对DGGE中受影响条带的测序结果表明,生防菌T4促进了假单胞菌Pseudomonas,芽孢杆菌Bacillus,苍白杆菌Ochrobactrum以及中慢生根瘤菌Mesorhizobium等细菌类群的生长,对短杆菌Brevibacterium,克雷白氏肺炎杆菌Klebsiella pneumoniae,根瘤菌Rhizobium sp等表现出抑制作用。生防菌T4对根围土壤中氨氧化细菌群落并没有产生明显的影响。可见,生防菌木霉T4引入初期对根围土壤中细菌群落产生明显的扰动,但这种干扰是短暂的,并没有对根围土壤细菌群落形成持续的影响。
- 夏飞张于旭热王伟
- 关键词：生防菌T-RFLP土壤细菌群落生态安全性
- 向日葵黄萎病室内接种方法的研究被引量：1
- 2015年
- 黄萎病是我国向日葵上一种严重的土传维管束病害。本研究针对其特点,对向日葵黄萎病病菌大丽轮枝孢菌的几种常用接种方法进行了测试。结果表明,其病原菌8种接种方法以接种孢子量为1×107cfu/m L时所产生的发病程度最重。采用蘸根接种法发病率最高,可达到82.7%,病情指数62.1,发病所需时间为14.33 d;叶片针刺涂抹方法发病最快,时间最短为13.67 d,发病率为79.8%,病情指数60.5,且发病均匀。两种方法具有重复性好、试验周期短、鉴定效率高等优点,且操作简便、材料易得。
- 闫洁王颖赵君景岚周洪友
- 关键词：接种量发病率孢子量
- 向日葵黄萎病生防菌Y1-2剂型的研制
- 向日葵是我国重要的油料作物之一,内蒙古、宁夏、甘肃、新疆是向日葵主产区。近年来,由于大面积重茬种植,向日葵黄萎病呈逐年加重的趋势,并且已经成为向日葵生产中重要的病害之一。向日葵黄萎病是大丽轮枝菌(Verticillium...
- 东保柱王颖赵君景岚周洪友
- 关键词：剂型
- 文献传递
- 猪链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗在小鼠的免疫效力分析被引量：8
- 2012年
- 本研究旨在开发一种用于防制猪链球菌病和副猪嗜血杆菌病的新型二联基因工程疫苗,并对其免疫效应进行评价。选择猪链球菌2型蛋白溶血素SLY、HP0197和副猪嗜血杆菌外膜蛋白D15和HPS06257 4种蛋白,重组表达并纯化,添加一定比例的佐剂制成含有不同组分的亚单位疫苗。研究表明该二联亚单位疫苗及各单苗能够引起小鼠良好的体液免疫,并能保护机体分别抵抗致死剂量猪链球菌2型(SS2)和副猪嗜血杆菌(HPS)强毒株的攻击。此外,调理吞噬试验表明疫苗高免血清能够有效杀死细菌,并赋予机体被动抵抗SS2和HPS感染的能力。研究证实制备的猪链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗在小鼠具备良好的免疫保护效力。
- 赵建平魏燕鸣宋岱松张强朱剑周明光李冉康超金梅林
- 关键词：猪链球菌2型副猪嗜血杆菌免疫保护
- 哈茨木霉T4厚垣孢子水分散粒剂的研制被引量：10
- 2013年
- [目的]研制一种新型生物农药制剂——哈茨木霉T4厚垣孢子水分散粒剂。[方法]通过对UV保护剂、稳定剂、黏结剂、崩解剂的筛选及其生物相容性和水分散粒剂的性能研究,建立哈茨木霉T4厚垣孢子水分散粒剂的制备方法。[结果]最佳配方为保护剂抗坏血酸0.5%,稳定剂羧甲基纤维素钠4%,润湿分散剂烷基萘磺酸盐(EFW)4%,黏结剂淀粉5%,崩解剂可溶性淀粉4%。[结论]获得的哈茨木霉T4厚垣孢子水分散粒剂孢子含量为4.5×108cfu/g,悬浮率为43.8%,润湿时间为1.0 s,崩解时间为52 s,热贮分解率25.9%,产品各项指标均达到国家标准。
- 李秀明李卿韦灵林王伟
- 关键词：厚垣孢子水分散粒剂生物相容性
- 萎缩芽孢杆菌CAB一1菌株中几丁质酶基因的克隆及原核表达
- 由植物病原真菌引起的植物真菌病害对农业增产增收造成了巨大的威胁,长期以来,种植抗病品种和施用化学农药在防治真菌病害中发挥了巨大的作用,但由于多数病原真菌容易发生遗传变异,因此,出现抗性菌株的现象经常发生,并且高剂量的施用...
- 石磊周红妹郭庆港李社增马平
- 关键词：生物防治几丁质酶原核表达
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌tbpB基因的PCR-RFLP分型
- 2013年
- 本研究应用生物学软件Vector NTI对副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)的转铁结合蛋白tbpB进行基因分型研究,通过选择AluⅠ、AvaⅡ和RsaⅠ3种限制性内切酶对15株Hps标准株和12株分离株的tbpB基因进行RFLP分析。经过生物学软件Vector NTI精确分型,标准株得到了11个基因型,其中基因型Ⅰ(AAA)包括血清型1、3和15,Ⅱ(BBB)包括血清型2、9和11;分离株的分型产生了10种基因型,其中6种为新的基因型。这一结果证实了Hps流行株的多样性,说明该方法对于猪革拉泽氏病流行病学规律的研究具有实用意义,同时,需要对更多的分离株做进一步的研究。
- 李淑芳龚玉梅侯娜赵成全赵兴绪张培君
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 大肠杆菌肽聚糖合成酶MraY在杆状病毒系统中的表达被引量：1
- 2013年
- 磷酸-N-乙酰胞壁酸酯-胸腺喷丁转位酶(MraY)是参与大肠杆菌细胞壁合成的一种膜蛋白。由于该蛋白不能通过大肠杆菌表达系统进行过表达制备重组蛋白,本研究采用杆状病毒表达系统,通过PCR从大肠杆菌基因组中扩增出目的基因MraY,纯化后克隆于pFastBac 1质粒中构建重组转移质粒pFastBac-MraY。将其转化DH10感受态,构建重组杆粒Bacmid-MraY,并转染于Sf9昆虫细胞中进行重组杆状病毒制备和目的蛋白表达,采用western blot和间接免疫荧光鉴定结果表明,目的蛋白在昆中细胞Sf9中获得表达,分子量为41 ku并以可溶性形式表达。该蛋白的表达为MraY的高级结构的解析以及噬菌体溶菌机制的研究奠定了基础。
- 许莉莉于申业田秋丰衣菲刘思国
- 关键词：杆状病毒表达系统间接免疫荧光
