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环鸟苷二磷酸代谢相关基因PXO_03877的原核表达被引量：1: 2011年; 分别利用表达载体pET-32a(+)和pGEX-4T-1,对水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,简称Xoo)中环鸟苷二磷酸代谢相关基因PXO_03877进行了原核表达,并进行可溶性检测。结果显示,用pET-32a(+)载体构建的表达质粒载体经诱导后,重组蛋白大多位于沉淀而非上清中,经诱导条件优化后,蛋白仍以包涵体形式存在;而利用pGEX-4T-1载体表达的含有GST标签的重组蛋白为可溶性蛋白,可用于下一步纯化后进行功能分析。; 王红敏田芳陈华民何晨阳; 关键词：水稻白叶枯病菌 PGEX-4T-1

水稻草状矮缩病毒P2基因多克隆抗体的制备及应用被引量：4: 2012年; 为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究。通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的P2基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDEST17上。将重组载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导后获得分子量约为29kDa含HIS标签的融合蛋白。以诱导的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到l:8192。并用制备的抗体建立了特异、灵敏的检测RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blot ELISA方法,为该病毒的检测、诊断提供了保障,同时也为P2蛋白的结构和功能研究奠定了基础。; 杨靓邓萍王开放刘妍刘小娟吴祖建; 关键词：原核表达多克隆抗体

水稻条纹病毒胁迫下的水稻蛋白质组学被引量：6: 2011年; 采用双向电泳联用MOLDI-TOF-TOF质谱对水稻感病品种武育粳3号和抗病品种KT95-418感染水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)前后的叶片进行蛋白质组学分析。结果显示,RSV基因组编码的病害特异蛋白(disease specificprotein,SP)在武育粳3号中的积累量明显高于KT95-418中。其他25个蛋白经质谱成功鉴定,包括RSV NS2蛋白,寄主中与光合作用、细胞氧化还原状态和离子平衡状态及蛋白的合成、转运与翻译后修饰等相关的蛋白。对这些差异表达的蛋白与水稻感、抗病的作用进行了分析。; 张晓婷谢荔岩林奇英吴祖建谢联辉; 关键词：水稻条纹病毒水稻品种蛋白质组学

泛素融合降解蛋白基因UFD1对植物抗病和抗逆性的调控功能分析: 2012年; 采用反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)克隆获得1个番茄泛素融合降解蛋白(ubiquitin fusion degradation protein,UFD)基因片段UFD1,并应用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)技术分析该基因对植物抗病性和抗逆性的调控功能.结果表明:在本氏烟(Nicotiana benthamiana)植株中UFD1基因的沉默导致Cf-4/Avr4和Cf-9/Avr9介导的过敏性反应(hypersensitive response,HR)以及水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)诱导的HR显著减弱,烟草野火病坏死症状明显减轻,在高盐胁迫下叶片叶绿素含量显著降低,但对菌核病病害症状以及抗干旱能力的影响不明显.表明UFD1基因是植物抗病和抗逆性的重要调控因子,它可能对Cf-4/Cf-9介导的基因对基因抗性、对Xoo的非寄主抗性和耐盐性起正向调控作用,而对烟草野火病抗性起负调控作用.; 赖亿玉黎飞徐幼平蔡新忠; 关键词：抗病性抗逆性

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转基因生物新品种培育专项(2009ZX08009-044B)