国家自然科学基金(81071712)
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 相关作者：王昊杜军刘浩王险峰张帆更多>>
- 相关机构：中山大学石家庄市疾病预防控制中心惠州市第三人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- TGF-β1诱导人前列腺癌PC3细胞上皮间叶化的研究
- 2013年
- 上皮细胞间叶化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)与肿瘤侵袭转移密切相关,转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)已被证实为肿瘤EMT的主要诱导剂。该研究旨在探讨TGF-β1对人前列腺癌PC3细胞EMT发生的诱导作用。经TGF-β1处理的PC3细胞,在相差倒置显微镜下观察到细胞形态由上皮型向间叶型转化;细胞划痕和Transwell实验检测细胞的迁移能力较对照组显著增强;Real-time PCR、Western blot和细胞免疫荧光验证TGF-β1能上调间叶型标记蛋白的表达及下调上皮型标志蛋白的表达。进一步发现,TGF-β1对转录因子Snail的表达没有明显的影响,但是能促进Snail的入核,干扰Snail能逆转TGF-β1对PC3细胞EMT发生的诱导作用。该研究表明,TGF-β1能够介导Snail的入核而激活Snail,促进前列腺癌PC3细胞的发生。
- 陈丹扬刘浩王昊王险峰杜军
- 关键词：TGF-Β1SNAIL前列腺癌
- 吲哚胺加双氧酶的表达调控THP-1巨噬细胞的极化被引量：6
- 2014年
- 目的研究吲哚胺加双氧酶(IDO)对巨噬细胞表型转化的影响。方法以10 ng/mL佛波酯诱导THP-1人单核细胞,建立分化的巨噬细胞模型,分别以100 U/mL IFN-γ和100 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激分化的THP-1细胞,获得M1型和M2型巨噬细胞,利用实时定量PCR(qRT-PCR)、流式细胞术和Western blot法检测巨噬细胞HLA-DR、CC型趋化因子受体7(CCR7)、IL-12p35、IL-10、CXCR4和IDO的表达变化。采用细胞转染实验对分化的THP-1细胞进行IDO的过表达和针对IDO基因的siRNA干扰实验,检测其IL-12p35、CCR7、IL-10和CXCR4的表达变化。结果 IFN-γ可诱导THP-1细胞向M1型发生转化并上调IDO的表达。而在巨噬细胞内过表达IDO促进THP-1向M2型极化,沉默细胞内的IDO基因则导致THP-1细胞极化为M1型。结论 IDO表达可调控巨噬细胞极化。
- 王险峰王昊张帆刘浩杜军
- 关键词：IFN-Γ免疫耐受
- 小鼠成纤维细胞激活蛋白多克隆抗体的制备及应用
- 2014年
- 目的:表达和纯化小鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)二肽基肽酶催化核心序列(FAPαc)融合蛋白(His-FAPαc),制备兔抗小鼠FAPα多克隆抗体,并用此抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况。方法:将本实验室构建好的原核表达质粒pET28a(+)-FAPαc转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达目的蛋白His-FAPαc;用纯化的目的蛋白免疫新西兰大白兔,获得兔抗小鼠FAPα多克隆抗体;用免疫印迹法和酶联免疫吸附试验检测该多克隆抗体与重组蛋白His-FAPαc的反应性及检测该多克隆抗体的效价,并用该抗体检测FAPα在肿瘤细胞和成纤维细胞以及肿瘤间质中的表达情况。结果:HisFAPαc融合蛋白可与兔抗小鼠FAPα多克隆抗体特异性结合;该多克隆抗体的效价高,特异性好,并且能检测小鼠胚胎成纤维细胞(Mouse embryo fibroblast cells;MEF)及结肠癌和乳腺癌的间质细胞高表达FAPα的全长序列蛋白。结论:制备的兔抗小鼠FAPα多克隆抗体能够有效地识别小鼠胚胎成纤维细胞和肿瘤间质细胞表达的FAPα蛋白,为研究FAPα在肿瘤的发生、发展及转移中的作用和以FAPα为靶点而开展的的抗肿瘤研究奠定基础。
- 江冠民谢婉莹张坤水邱瑜张秋桂杜军
- 关键词：成纤维细胞激活蛋白多克隆抗体肿瘤转移肿瘤间质
- 人肺腺癌耐顺铂细胞A549/CDDP获得侵袭转移能力的分子机制被引量：1
- 2013年
- 目的:研究人肺腺癌耐顺铂细胞A549/CDDP获得侵袭转移能力的分子机制。方法:细胞划痕实验和Transwell侵袭实验比较A549和A549/CDDP的转移侵袭能力的差别,以及LY294002对A549/CDDP侵袭转移能力的影响。蛋白质免疫印迹技术检测AKT,NF-κB,STAT3信号通路的激活情况,MTT法检测A549和A549/CDDP对顺铂的敏感性,以及PI3K/AKT通路抑制剂LY294002对A549/CDDP细胞对顺铂的敏感性的影响。结果:A549/CDDP对顺铂的耐药性以及侵袭转移能力相对于A549有明显增强。Western blot结果表明:A549/CDDP细胞AKT通路被激活,NF-κB,STAT3通路没有明显变化。LY294002能够明显抑制A549/CDDP的侵袭转移能力并且能够提高A549/CDDP对于顺铂的敏感性。结论:A549/CDDP细胞相对于A549细胞的侵袭转移能力明显增强,其机制与PI3K/AKT信号通路的激活有关。
- 陈新来胡惠军潘勇权邹伟文周文泉古彩红王昊
- 关键词：A549CDDPLY294002
