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杭州市重大科技创新项目(20080212A10)
作品数:
2
被引量:16
H指数:2
相关作者:
吴建祥
洪健
孟春梅
黎军英
董晓辉
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相关机构:
生物技术有限公司
浙江大学
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发文基金:
杭州市重大科技创新项目
浙江省科技厅公益性技术应用研究(分析测试)计划项目
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相关领域:
农业科学
生物学
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齿兰环斑病毒外壳蛋白的原核表达、抗体制备及检测应用
被引量:5
2010年
齿兰环斑病毒(Odontoglossumringspot virus,ORSV)是感染兰花的主要病毒之一.用RT-PCR方法从感染ORSV兰花中克隆到该病毒的477 bp外壳蛋白基因(CP),外壳蛋白基因再亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建重组原核表达载体pET-32a-CP;将重组表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化获得分子量约为37 ku含硫氧还蛋白的融合蛋白.以纯化的重组蛋白为抗原免疫新西兰大白兔制备ORSV外壳蛋白的多克隆抗体,并用制备的多抗建立了可靠、灵敏、特异的检测ORSV的免疫捕获RT-PCR及dot-blot ELISA方法,为该兰花病毒病的诊断、兰花抗病育种和脱毒苗的建立打下了基础.
章颉
孟春梅
荣松
张超
洪健
吴建祥
关键词:
齿兰环斑病毒
原核表达
多克隆抗体
DOT-BLOT
单抗免疫斑点法和组织印迹法检测侵染蝴蝶兰的建兰花叶病毒
被引量:12
2009年
应用抗建兰花叶病毒(CymMV)的单克隆抗体,建立了快速检测蝴蝶兰病样的免疫斑点法(Dot—ELISA)和组织印迹法(Tissueblot—ELISA)。CymMV单抗稀释8000倍时.Dot—ELISA可检出病毒粗汁液的最大稀释度为1:10240;Tissueblot—ELISA中样品1次平切后1~5次印迹与Dot—ELISA样品1:80稀释结果相当,6-8次印迹与Dot—ELISA1:320稀释结果相当,前8次印迹均可以得到满意的检测效果。Tissueblot—ELISA的灵敏度略低于Dot—ELISA,使用单抗的结果比多抗特异性强,操作更为简便,适合大量兰花样品的快速检测。
董晓辉
孟春梅
黎军英
吴建祥
荣松
张超
洪健
关键词:
建兰花叶病毒
免疫斑点法
单克隆抗体
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