国家自然科学基金(81102294) 作品数:10 被引量:37 H指数:5 相关作者: 叶欣 丁浩强 夏文杰 邵媛 陈扬凯 更多>> 相关机构: 广州血液中心 广东食品药品职业学院 中山大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市医药卫生科技项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
血小板输注无效患者HLA和HPA基因型及其抗体特异性的分析 被引量:6 2014年 目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)和人类血小板抗原(HPA)复合抗体诱发的血小板输注无效(PTR)患者的HPA/HLA基因型及抗体特异性.方法 选择2010年1月至2012年6月,于广州血液中心行血小板(PLT)配型的PTR患者中,6例同时具有HLA-Ⅰ类抗体和HPA抗体的患者作为研究对象(本研究遵循的程序符合广州血液中心人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象的知情同意).采用酶联免疫吸附试验方法检测患者HLA抗体及PLT特异性糖蛋白(GP)抗体,应用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法对患者HLA及HPA 1~17进行基因分型,根据HLA/HPA基因型和单克隆抗体特异性俘获血小板抗原实验(MAIPA)的抗体检测结果确认抗体特异性.结果 6例PTR患者的抗HLA-Ⅰ类抗体中,以抗HLA-A*2、-A* 11及-B* 40最为常见;PLT特异性GP抗体以GPⅡb/Ⅲa抗体阳性为主,占83.3%(5/6);经MAIPA PLT抗体特异性分析,3例(50.0%,3/6)患者存在抗HPA-3a抗体,2例(33.3%,2/6)患者HPA-3b抗体呈阳性,仅1例(16.7%,1/6)患者的HPA-5b抗体呈阳性.结论 临床上,对存在复合抗体的疑难PTR患者进行HLA/HPA基因型及其抗体特异性分析,能避免患者HLA/HPA抗体相应的PLT抗原输注,寻找与患者HLA/HPA基因型相匹配的献血者,可提高患者的PLT输注疗效,避免血液资源的浪费. 邓晶 徐秀章 叶欣 王嘉励 夏文杰 邵媛 陈扬凯 丁浩强关键词:血小板 血小板输注 HLA抗原 血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)及HLA-Ⅰ类混合抗体引起血小板输注无效的检测 被引量:6 2014年 目的探讨血小板混合抗体引起的血小板输注无效(PTR)的检测方法。方法提取1名骨髓增生异常综合征PTR患者的DNA 200μL,通过PCR-SSP方法做血小板特异性抗原(HPA)和人类白细胞抗原(HLA)基因分型,以ELISA法检测患者血浆中的血小板特异性糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)和HLA抗体,用Luminex试剂盒检测HLA-Ⅰ类抗体特异性,以MAIPA法鉴定HPA抗体特异性。结果患者HPA基因型为1aa、2ab、3bb、4aa、5aa、6aa、9aa和15bb;HLA-Ⅰ类抗原为HLA-A*02、A*33,HLA-B*46、B*58;从患者血浆中检出GPⅡb/Ⅲa及HLA-Ⅰ类抗体。该患者的PTR是由GPⅡb/Ⅲa及HLA-Ⅰ类混合抗体引起。结论对于反复输血的患者,输注ABO、Rh(D)同型、HLA和HPA交叉配型相合的相容性血小板,可有效减少PTR的发生。 陈扬凯 邓晶 徐秀章 夏文杰 叶欣 丁浩强 刘静 曾四海 邵媛 王嘉励 李辉 付涌水关键词:血小板输注无效 HPA HLA抗体 反复输血 父母血小板血型不合引起新生儿同种免疫性血小板减少症的初步研究 被引量:5 2012年 目的探讨由于父母血小板血型不合产生血小板抗体,诱导新生儿发生同种免疫性血小板减少症的相关性。方法收集22例临床上确诊为新生儿免疫性血小板减少症(NIT)的患儿为研究对象,采用ELISA方法检测患儿及其父母的血小板相关抗体,应用PCR-SSP法对患儿及父母进行HLA及HPA基因分型,根据相应的抗原进行抗体特异性分析。结果 22例NIT患儿中,14例是由于同种免疫性因素引起的,其中27.3%(6例)由HLA抗体引起,13.6%(3例)由HPA抗体引起,22.7%(5例)由HLA+HPA抗体引起;9.1%(2例)由于被动免疫性因素引起;27.3%(6例)由自身抗体引起。其中,同种免疫性抗体以抗HLA-A2、19,抗-B40及抗HPA-3a多见。结论在新生儿免疫性血小板减少症中,主要以父母血小板血型不合引起新生儿同种免疫性血小板减少症为主,临床产前诊断预防和产后治疗具有重要意义。 邓晶 夏文杰 叶欣 徐秀章 邵媛 陈扬凯 丁浩强 罗广平 王嘉励关键词:血小板 广州地区无偿献血者HLA抗体筛查和特异性分析初探 被引量:5 2012年 目的对广州地区部分无偿献血者HLAⅠ、Ⅱ类抗体的分布及特异性进行调查和分析,为安全输血提供相应的实验数据。方法随机收集无偿献血者标本368份,应用Antigen Tray-LATM和LAT1240检测HLA抗体,PCR-SSP方法检测阳性标本HLAⅠ、Ⅱ类抗原,并根据相应的抗原对抗体特异性进行分析,并对男、女献血者HLA抗体分布的差异进行统计学分析。结果在368名献血者中,13名HLA抗体阳性(3.53%)。HLA抗体出现以女性献血者为主,达到10.78%,均有孕产史,而男性献血者HLA抗体的出现频率仅为0.75%(P<0.05)。13份阳性标本中HLAⅠ类抗体阳性8份,且女性献血者也明显高于男性(P<0.05)。群体反应性抗体(PRA)分析,PRA<20%占61.5%、PRA(20%~30%)占15.4%、PRA(30%~40%)占7.7%、PRA>40%占15.4%。抗体特异性分析,抗-A19(53.85%),抗-B40(30.77%),抗-DR4(30.77%),并且以复合性抗体为主。结论初步探讨了本地区无偿献血者中HLA抗体分布情况,女性献血者的HLA抗体出现频率明显高于男性献血者。本研究为HLA系统引起的输血免疫相关并发症预防措施的建立提供了初步的实验基础。 邓晶 叶欣 夏文杰 徐秀章 丁浩强 陈扬凯 邵媛 王嘉励 付涌水关键词:HLA HLA抗体 输血相关性急性肺损伤 人类粒细胞特异性抗原HNA-3系统PCR-SBT分型技术的建立及应用 被引量:2 2013年 目的建立PCR-SBT技术对人类粒细胞特异性抗原HNA-3进行基因分型。方法采用PCR-SBT方法对360名广州地区汉族健康献血者进行HNA-3测序基因分型。结果试验发现HNA-3(IVS7+76T/C)新的单核苷酸多态性(IVS+76T/C)。结论应用的PCR-SBT方法检测HNA-3基因敏感性高,重复性好;而且可具有准确、高通量、直接发现新的等位基因等特点。而且我们发现的单核苷酸多态性可以作为HNA-3基因分型的辅助依据。 丁浩强 叶欣 付涌水 陈杨凯 夏文杰 邵媛 徐秀章 邓晶 王嘉励关键词:粒细胞 基因频率 单核苷酸多态性 无偿献血人群中已育女性HLA抗体筛查及特异性分析 被引量:11 2014年 目的了解广州地区已育女性献血者中HLA-Ⅰ和Ⅱ类抗体的分布和特异性,评估这类献血者血液及其成分所含HLA抗体引起免疫性输血不良反应的风险。方法随机收集广州地区已育女性献血者标本343(人)份、未育女性献血者标本140(人)份,利用Lifecodes LifeScreen Deluxe(LMX)筛查标本的HLA抗体,阳性者再分别利用LIFECODES LSATMClassⅠ和LIFECODES LSATMClassⅡ鉴定抗体特异性。结果广州地区已育女性献血者中,抗-HLA阳性率25.07%(86/343),而未育女性献血者中抗-HLA阳性率3.57%(5/140)(P<0.05)。已育女性献血者中HLA-Ⅰ类抗体出现频率较高的分别是抗-A*11 28.8%(17/59)、抗-B*07 42.4%(25/59)和抗-Cw*07 20.3%(12/59),HLA-Ⅱ类抗体出现频率最高者是抗-DRB1*04 40.4%(19/47)。结论已育女性献血者HLA抗体出现的频率较高,这类献血者的血浆和单采血小板用于临床后势必增加HLA同种免疫反应的风险,应引起高度重视。 陈大伟 夏文杰 叶欣 邓晶 丁浩强 李辉 陈扬凯 邵媛 刘静 王嘉励 徐秀章 高国全 付涌水关键词:抗体筛查 抗体特异性 同种免疫 广东汉族人群HLA-B~* 15等位基因分布 被引量:1 2012年 目的了解广东献血者汉族人群HLA-B*15等位基因的多态性。方法从1 691名广东汉族献血者中采用中/低分辨分型获得带有HLA-B*15基因型466例样本,进一步应用PCR-SBT技术进行测序分型,获得广东汉族人群B*15高分辨分型结果。应用PyPop软件计算HLA-B*15各等位基因频率,同时与其他人群资料进行比较。结果共检测到16种已知HLA-B*15等位基因,其中以B*15∶02(64.75%)最常见,其次为B*15∶01(13.26%),B*15∶25(4.554%),B*15∶27(4.158%),B*15∶12(3.960%),这5种等位基因占B*15等位基因家族的90.69%。在B*15等位基因家族中,表达B75抗原的等位基因B*15∶02、B*15∶11和B*15∶21共占67.92%,但表达B62抗原的B*15等位基因多态性最强,共检出6种等位基因。结论广东汉族人群中HLA-B*15等位基因表现出高度的多态性及其特有的分布特征。 梁华钦 丁浩强 叶欣 夏文杰 陈扬凯 罗广平关键词:等位基因 基因多态性 HLA新等位基因A*33:44序列分析 被引量:3 2014年 目的鉴定1例人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)新等位基因。方法应用双链及单链测序法进行基于序列的分型(sequence based typing,SBT),通过群体调查了解该等位基因的群体分布频率。结果该等位基因HLA—A*33:44,与A*33:03:01第4外显子相差1个核苷酸,使第866位碱基由G变为A,第265个密码子由GGT变为GAT,相应氨基酸由甘氨酸变为天门冬氨酸。与IMGT/HLA数据库中的HLA—A等位基因的序列进行对比,该突变为新的单核苷酸多态性位点。结论该新HLA等位基因在中国汉族人群中的分布频率小于0.0003,并被世界卫生组织HLA因子命名委员会命名为HLA—A*33:44(序列注册号为HQ873871)。研究新等位基因的序列可为HLA基因相关研究和应用提供信息。 丁浩强 叶欣 黄颖烽 邵媛 陈扬凯 夏文杰 熊白玉关键词:等位基因 基因组 外显子 突变 广州地区无偿献血者HLA抗体及HNA-3a抗体检测分析 被引量:5 2015年 目的分析广州地区无偿献血者中与免疫性TRALI相关的HLA抗体及HNA-3a抗体,进而评估白细胞抗体阳性献血者捐献的血液成分对TRALI诱发的风险。方法运用HLA抗体筛选试剂盒,对随机抽取的845份无偿献血者标本进行HLA抗体筛查,并通过LSA1&LSA2试剂盒进行HLA抗体特异性鉴定,比较不同献血人群的HLA抗体发生率;利用HNA-3a转染细胞对HNA-3bb基因型标本进行HNA-3a抗体检测。结果广州地区845名献血者中HLA抗体阳性标本102份(12.07%),其中男性献血者为28/454(6.17%),已婚已育女性献血者为66/248(26.61%),未婚未育女性献血者为8/143(5.59%);已婚已育女性献血者的HLA-Ⅰ类抗体、HLA-Ⅱ类抗体、HLA-Ⅰ+HLA-Ⅱ类抗体及HLA抗体总体发生率均明显高于男性和未婚未育女性献血者(P<0.01),且多次生育女性的HLA抗体发生率明显高于单次生育女性献血者(P<0.01);对获得的28份HNA-3bb基因型献血者进行HNA-3a抗体检测,未见阳性标本。结论已婚已育女性献血者(尤其是多次生育女性)HLA抗体发生率较高,其所捐献的血液成分有诱导免疫性TRALI发生的高风险。因此,对已婚已育女性献血者开展HLA抗体及HNA-3a抗体筛查可避免用血紧张,提高输血安全。 徐秀章 夏文杰 陈大伟 邓晶 丁浩强 陈扬凯 王嘉励 邵媛 刘静 叶欣初步探讨中国广东人群的中性粒细胞CD177基因型和HNA-2a的表达 2013年 目的:探讨中国广东人群的中性粒细胞CD177基因型和HNA-2a的表达及分布情况。方法:采用PCR-SBT方法和流式细胞技术分别对83例广东籍无偿献血者的CD177基因型和HNA-2a的表型进行检测,并结合SNPs、年龄及性别这几个影响因素进行统计学分析,经T-检验和单因素方差分析,若P值<0.05,认为有统计学意义。结果:83例样本的CD177基因型以42C/C和42C/G为主,分别为40例(占48.19%)和37例(占44.58%);42G/G基因型较少,仅6例(占7.23%)。83例样本HNA-2a的表达量均大于5%(mean±SD为61.37%±17.87%)。经T-检验,HNA-2a的表达量在女性与男性之间无明显差异(P>0.05),且女性随着年龄的增加HNA-2a的表达量无明显变化(P>0.05)。对于CD177基因的G42C多态性对HNA-2a表达的影响,经单因素方差分析:42C/C与42G/G基因型之间,中性粒细胞HNA-2a表达的MFI存在明显差异(5.16±1.56vs.3.93±0.84,P<0.05)。结论:中国广东人群的CD177基因型有其自身特点,并且中性粒细胞HNA-2a的表达受多种因素的影响,表现为明显的个体差异,其中SNPs(G42C)是影响HNA-2a表达量的因素之一。 徐秀章 夏文杰 叶欣 丁浩强 陈扬凯 邓晶 邵媛 王嘉励关键词:流式细胞术 单核苷酸多态性