国家自然科学基金(81071734)
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 相关作者：汤志刚王蒙任维华黄强更多>>
- 相关机构：安徽医科大学附属省立医院安徽省立医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- TFPI-2基因CpG岛甲基化与胰腺癌的关系被引量：2
- 2011年
- 目的:检测胰腺癌组织组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因CpG岛甲基化的状态,并分析甲基化改变与胰腺癌的关系。方法:应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测45例胰腺癌组织、相应癌旁组织中TFPI-2基因的甲基化状态。结果:胰腺癌组织中TFPI-2基因的甲基化阳性率为71.1%(32/45),明显高于癌旁组织的31.1%(14/45)(P<0.01)。8例正常胰腺组织中均未发生甲基化。TFPI-2基因甲基化阳性率还与胰腺癌的临床分期、组织分化程度、肿瘤直径有相关性(P<0.05)。结论:TFPI-2基因在胰腺癌组织中出现异常甲基化,可能与胰腺癌的发生发展关系密切。
- 郑浩汤志刚黄强陈炯
- 关键词：胰腺肿瘤TFPI-2CPG岛甲基化
- 5-氮杂-2-脱氧胞苷对人胰腺癌细胞株PANC-1侵袭和迁移能力的影响被引量：1
- 2013年
- 目的研究甲基化抑制物5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预对胰腺癌细胞株PANC-1侵袭和迁移能力的影响,初步探讨其发挥作用的机制。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理PANC-1细胞株,采用划痕迁移试验和Transwell小室法观察干预前后细胞迁移和侵袭能力的改变,免疫荧光染色法检测干预前后细胞MMP-2的表达。结果经5-Aza-CdR干预后,与对照组相比,PANC-1细胞的迁移和侵袭能力明显减弱(P<0.05),细胞内MMP-2的表达降低(P<0.05)。结论 5-Aza-CdR可以明显抑制胰腺癌细胞株PANC-1的侵袭转移能力,其机制可能是通过抑制MMP-2的表达而降低肿瘤细胞的侵袭和转移。
- 王蒙王蒙黄强汤志刚
- 关键词：胰腺癌5-氮杂-2-脱氧胞苷MMP-2
- 5-氮杂-2-脱氧胞苷对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖和凋亡的影响
- 2012年
- 目的:探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)干预对胰腺癌细胞株PANC-1增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:用不同浓度的5-Aza-CdR处理PANC-1细胞株,未予干预的细胞为对照,采用台盼蓝染色、细胞计数法检测5-Aza-CdR干预前后细胞增殖能力的变化,FCM法检测干预前后细胞凋亡率的变化,caspase-3活性测定检测5-Aza-CdR诱导凋亡的能力。结果:5-Aza-CdR干预后,PANC-1细胞增殖明显受到抑制,细胞凋亡率明显提高,细胞内caspase-3活性明显增强(P<0.05)。结论:5-Aza-CdR可以明显抑制胰腺癌细胞株PANC-1的生长增殖,并诱导细胞发生凋亡,线粒体凋亡途径可能是其诱导凋亡的机制之一。
- 王蒙汤志刚黄强任维华
- 关键词：胰腺癌5-氮杂-2-脱氧胞苷凋亡CASPASE-3
- 胰腺癌Panc-1细胞TFPI-2基因甲基化状态与其体内体外侵袭能力的关系
- 2012年
- 目的:探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2-deoxycytidine,5-Aza-dC)对胰腺癌Panc-1细胞体内体外侵袭能力及裸鼠皮下移植肿瘤组织TFPI-2基因甲基化状态及表达的影响。方法:用不同浓度的5-Aza-dC处理胰腺癌Panc-1细胞。Transwell法测定各组Panc-1细胞的体外侵袭能力。将用药物处理过的各组Panc-1细胞分别接种于裸鼠皮下,观察各组成瘤率及肿瘤大小。用MSP及RT-PCR检测裸鼠移植瘤组织TFPI-2基因甲基化状态及TFPI-2基因mRNA表达情况。结果:与对照组相比,药物处理组Panc-1细胞体外侵袭能力明显下降,裸鼠成瘤率明显降低,第八周时,肿瘤体积明显低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,TFPI-2基因异常甲基化状态在药物处理组裸鼠移植瘤组织中得到逆转,药物处理组移植瘤TFPI-2基因mRNA重新表达,并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷可能在一定程度上抑制人胰腺癌Panc-1细胞系的体内体外侵袭和生长能力,其机制可能与逆转TFPI-2基因高甲基化状态从而恢复其表达有关。
- 郑浩汤志刚
- 关键词：胰腺癌组织因子途径抑制物-2甲基化
- 人类组织因子途径抑制物-2及其与胰腺癌的关系
- 2011年
- 组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)是库尼兹丝氨酸抑制物家族的成员之一,与组织因子途径抑制物(TFPI)有结构同源性。TFPI-2可以抑制一系列广泛的丝氨酸蛋白酶,维持细胞外基质的稳定性;还可以通过诱导细胞凋亡,抑制血管再生,起到维持肿瘤细胞环境的稳定性和抑制肿瘤浸润和生长的作用。另外,在人类恶性肿瘤的细胞系中,TFPI-2基因启动子区CpG岛异常的甲基化导致了细胞内编码TFPI-2的mRNA明显减少,同时TFPI-2蛋白的表达亦明显降低,这可能是导致肿瘤浸润、转移的主要原因之一。
- 郑浩汤志刚
- 关键词：TFPI-2肿瘤胰腺癌甲基化
- 5-Aza-dC对胰腺癌细胞系Panc-1中TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响被引量：3
- 2012年
- 目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-A2a-dc)对胰腺癌细胞系Panc-1中抑癌基因组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)甲基化水平及基因表达的影响。方法用不同浓度5-Aza-dC处理胰腺癌细胞系Panc-1。用甲基化特异性PCR(MS-PCR),反转录聚合酶链(RT-PCR)及蛋白印迹实验(Western blot)检测药物处理前后Panc-1细胞TFPI-2基因的甲基化状态,mRNA及蛋白表达的改变。结果 MSP检测Panc-1细胞TFPI-2基因药物作用后异常甲基化得到逆转,RT-PCR检测到不同浓度5-Aza-dC处理后TFPI-2基因mRNA重新表达,相对表达量分别为(0.211±0.087),(0.327±0.068),(0.609±0.017),Western blot检测TFPI-2基因蛋白重新表达,相对表达量分别为(0.429±0.121),(0.675±0.044),(1.132±0.124),以上作用呈时间、剂量依赖性(P<0.05),差异具有统计学意义。结论胰腺癌细胞系Panc-1中抑癌基因TFPI-2启动子高甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5-Aza-dC能够较成功的逆转胰腺癌细胞Panc-1中TFPI-2基因的高甲基化状态,并能恢复TF-PI-2基因的mRNA及蛋白重新表达。
- 郑浩汤志刚
- 关键词：胰腺癌PANC-1TFPI-2基因甲基化
- 5-氮杂-2’-脱氧胞苷和曲古菌素A对胰腺癌Panc-1细胞系TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响
- 2012年
- 目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2L脱氧胞苷（5-AzadC）及组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A（TSA）对胰腺癌Panc-1细胞系中TFPI-2基因甲基化水平及基因表达的影响。方法单独或联合应用5-Aza—dC及TSA处理Panc-1细胞，应用甲基化特异性聚合酶链反应、逆转录聚合酶链反应及蛋白印迹实验检测药物处理前后Panc-1细胞TFPI-2基因启动子区甲基化状态、mRNA及蛋白表达情况。结果经5-Aza-dC单独处理或5-Aza—dC及TSA联合处理Panc-1细胞后，TFPI-2基因启动子区高甲基化状态得到逆转，表现为非甲基化，原本不表达的TFPI-2基因mRNA及蛋白重新表达，两组作用效果相似。经TSA单独处理的Panc-1细胞TFPI-2基因启动子区仍为异常高甲基化状态，原本不表达的TFPI2基因未见重新表达。结论胰腺癌Panc1细胞系中TFPI-2基凶启动子区高甲基化可能是导致该基因失活的主要原因，5Aza—dC单独作用或与TSA联合作用均能逆转TFPI-2基因的高甲基化状态，使该基因重新表达。
- 汤志刚郑浩
- 关键词：胰腺肿瘤曲古菌素A
- 5－氮杂－2’－脱氧胞苷对胰腺癌细胞PANC1的组织因子途径抑制物－2表达及CpG岛甲基化的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨甲基化酶抑制剂5－氮杂-2’－脱氧胞苷（5-Aza—dC）对胰腺癌细胞系PANC1的抑癌基因组织因子途径抑制物2（tissuefactorpathwayinhibitor2，TFPI-2）甲基化水平及基因表达的影响。方法应用1×10^-7、5×10^-7、1×10μmol／L的5-Aza—dC处理胰腺癌细胞系PANC1。用甲基化特异性PCR（MSP）、RT—PCR及蛋白质印迹法检测细胞TFPI-2基因的甲基化状态、mRNA及蛋白的表达。结果未经5-Aza-dC处理的PANC1细胞的TFPI-2基因CpG岛为完全甲基化，无TFPI-2mRNA及蛋白的表达。1×10^-7、5×10^-7、1×10^-6mol／L的5-Aza-dC处理后，PANC1细胞的TFPI-2基因CpG岛甲基化逆转，从不完全甲基化到完全非甲基化；TFPI-2mRNA相对表达量分别为0．211±0．087、0．327±0．068、0．609±0．017；TFP1-2蛋白相对表达量为0．429±0．121、0．675±0．044、1．132±0．124，呈剂量依赖性增加（P〈0．05）。结论胰腺癌细胞系PANC1的TFPI-2启动子高甲基化可能是导致该基因表达下调甚至失活的主要原因。5-Aza—dC能够逆转其高甲基化状态，并诱导TFPI-2mRNA及蛋白重新表达。
- 汤志刚郑浩黄强陈炯
- 关键词：甲基化组织因子途径抑制物2
