山西省自然科学基金(20031110)
- 作品数：13 被引量：56H指数：5
- 相关作者：李新华张开明尹国华牛旭平张瑞丽更多>>
- 相关机构：太原市中心医院第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖活性研究被引量：11
- 2007年
- 目的进一步了解银屑病患者骨髓造血细胞是否有异常。方法采用密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照组骨髓单一核细胞,然后在含有甲基纤维素的半固体细胞因子培养体系中进行体外高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)、粒-巨噬细胞系集落形成单位(CFU-GM)及红系集落形成单位(CFU-E)集落形成实验,培养一定时期后计数集落。结果与正常对照比较,银屑病患者的HPP-CFC及CFU-GM的集落形成数显著减少,而CFU-E形成的集落数无统计学意义。结论银屑病患者骨髓造血细胞体外增殖能力明显降低,这种异常的造血细胞可能在银屑病的免疫发病机制中发挥一定作用。
- 牛旭平李新华张开明尹国华
- 关键词：银屑病骨髓
- 单一核细胞条件培养液与细胞因子组合培养体系对骨髓HPP-CFC集落形成影响的研究
- 2007年
- 目的:观察两种培养体系对骨髓高增殖潜能集落形成细胞(high proliferative potential colony forming cell,HPP-CFC)集落形成的影响。方法:密度梯度离心法分离骨髓单一核细胞,分别在植物血凝素(PHA)刺激的单一核细胞条件培养液(phytohemagglutinin monocyte medium,PHA-MCM)及细胞因子组合支持下进行甲基纤维素半固体培养,14d时倒置显微镜下观察并计数两种培养体系中形成的集落数目及直径。结果:PHA-MCM与细胞因子组合均可支持HPP-CFC的集落形成,但细胞因子组合培养体系的集落数目明显高于PHA-MCM体系(P<0.05),而且集落直径明显大于后者。结论:在HPP-CFC的体外培养中,细胞因子组合培养体系明显优于PHA-MCM体系,是骨髓HPP-CFC较理想的体外培养体系,为银屑病及其它皮肤病的骨髓造血细胞研究奠定了一定的实验基础。
- 牛旭平李新华张开明
- 关键词：细胞因子组合骨髓
- 胸腺共移植对异种骨髓造血细胞移植后T细胞发育的影响被引量：5
- 2004年
- 目的 探讨胎儿胸腺小叶共移植对异种骨髓移植后人源性T细胞发育的影响 ,为在体研究人造血细胞向T细胞发育提供实验模型 ,并为异种骨髓移植构建银屑病动物模型奠定基础。方法 将人骨髓单个核细胞及胎儿胸腺小叶共移植于SCID鼠 ,皮下注射骨髓基质细胞 ,并结合IL 2腹腔内注射 ,以未移植胸腺小叶者为对照 ,流式细胞术动态检测移植后不同时间SCID鼠外周血中人源性细胞及CD3+ 细胞、CD4 + 细胞、CD8+ 细胞的比例。结果 实验组移植 4周后 ,SCID鼠外周血中已可检测到人源性细胞 (CD4 5 + 细胞 ) ,8周出现少量CD3+ 细胞 ,12周可检测到CD4 + 细胞、CD8+ 细胞 ,移植 2 4周内 ,SCID鼠外周血人源性细胞及各亚群T细胞比例逐渐增多 ,2 4周达到最大比例。而未移植胸腺的对照组 ,仅可在外周血检测到人源性CD4 5 + 细胞 ,而无成熟T细胞存在。结论 胎儿胸腺小叶共移植模式可以促进人源性造血细胞在SCID鼠体内向T细胞发育分化 ,并可使其活性在体内维持较长时间。
- 李新华董峰张开明尹国华
- 关键词：胸腺造血细胞移植T细胞
- 银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞P16基因mRNA表达的研究被引量：1
- 2007年
- 目的:研究银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)的集落形成能力及P16基因mRNA表达,探讨银屑病患者骨髓造血干细胞体外增殖活性及原因。方法:密度梯度离心法分离银屑病患者及正常对照骨髓单个核细胞,培养于含人干细胞因子(SCF)、人粒-巨噬细胞系集落剌激因子(GM-CSF)、白介素(IL)-3、IL-6细胞因子组合的甲基纤维素半固体培养基,培养14d时计数HPP-CFC集落,然后收集集落。提取纯化集落细胞的总RNA,应用反转录(RT)-PCR方法检测HPP-CFC集落细胞的P16基因mRNA的表达。结果:①在甲基纤维素半固体培养基中,银屑病患者骨髓HPP-CFC集落数显著低于正常对照组,且集落形态较小;②银屑病患者骨髓HPP-CFC集落细胞的P16基因mRNA表达高于正常对照组,差异有统计学意义。结论:银屑病患者骨髓HPP-CFC集落形成能力降低;银屑病患者骨髓HPP-CFC的P16基因mRNA表达阳性率增高,推测P16基因可能参与了银屑病患者骨髓造血干细胞体外增殖活性异常的发生。
- 张瑞丽牛旭平李新华张开明尹国华
- 关键词：银屑病P16基因
- 骨髓与T细胞作用及SLE研究进展被引量：2
- 2005年
- 张开明李新华
- 关键词：骨髓T细胞
- 银屑病患者骨髓CFU-HPP集落形成及集落细胞p16基因启动子甲基化的研究被引量：6
- 2007年
- 本研究检测银屑病患者骨髓高增殖潜能集落形成单位(CFU-HPP)的集落形成能力及集落细胞p16基因启动子甲基化状态,并探讨两者之间的关系。收集了24例银屑病患者及正常对照者骨髓,采用密度梯度离心法分离单个核细胞,并于含SCF/GM-CSF/IL-3/IL-6细胞因子组合的甲基纤维素半固体培养液中,培养14天计数CFU-HPP集落,然后收集集落。提取纯化集落细胞的DNA,经亚硫酸盐修饰后,采用甲基化特异PCR(MSP)检测CFU-HPP集落细胞的p16基因启动子甲基化状态。结果发现:在甲基纤维素半固体培养基中,银屑病患者骨髓CFU-HPP集落数显著低于正常对照(t=5.91,p<0.01),且集落形态较小;正常对照骨髓CFU-HPP集落细胞的p16基因启动子甲基化阳性率较高(66.7%),而银屑病患者骨髓CFU-HPP集落细胞p16基因启动子甲基化阳性率(37.5%)低于正常人。结论:银屑病患者骨髓CFU-HPP细胞集落形成能力降低;银屑病患者骨髓CFU-HPP集落细胞的p16基因甲基化降低可能与其相对较低的CFU-HPP集落形成能力密切相关。
- 张瑞丽牛旭平李新华张开明尹国华
- 关键词：P16基因基因甲基化
- 胸腺基质细胞支持下骨髓CD34^+细胞向T细胞体外定向分化被引量：1
- 2008年
- 目的:研究人骨髓CD34+细胞体外向T细胞定向分化的方法,为研究造血细胞淋系造血活性及T细胞发育和分化提供技术平台。方法:免疫磁珠法分离骨髓CD34+细胞,在骨髓基质细胞条件培养液构建的微环境下,在胸腺基质细胞的支持下,使其体外向T细胞定向分化,收集培养的非贴壁细胞,免疫荧光染色后经流式细胞术检测培养不同时间CD1-CD3+细胞、CD3+CD4+CD8-细胞及CD3+CD4-CD8+细胞比例。结果:培养1周时,培养细胞中以不成熟的CD1+CD3-细胞、CD1+CD3+细胞为主,可检测到少量CD1-CD3+细胞,随培养时间延长,不成熟细胞比例逐渐减少,而成熟的CD1-CD3+细胞比例逐渐增加;在CD3+细胞中,培养初期以不成熟的双阳性细胞CD4+CD8+为主,而成熟的单阳性CD4+CD8-细胞及CD4-CD8+细胞占极小比例,随培养时间延长,双阳性细胞比例逐渐减少,而成熟的单阳性细胞比例逐渐增高;而无胸腺基质细胞支持的CD34+细胞仅在培养初期检测到成熟细胞存在,而培养后4周基本检测不到成熟T细胞的存在。结论:在骨髓基质细胞及胸腺基质细胞的支持下,骨髓CD34+细胞可体外发育为成熟的CD1-CD3+细胞及单阳性T细胞,其中胸腺基质细胞的支持对于造血细胞向T细胞的体外定向分化极其重要。
- 李新华张开明尹国华
- 关键词：骨髓造血细胞T细胞分化
- 银屑病患者骨髓CD34^+细胞体外定向分化的T细胞活性研究被引量：37
- 2006年
- 目的研究有家族发病倾向的银屑病患者骨髓CD34+细胞体外定向发育的T细胞活性。方法免疫磁珠法分离家族史阳性银屑病患者及正常对照骨髓CD34+细胞,在骨髓基质细胞条件培养液构建的微环境下,在胸腺基质细胞的支持下,使其在体外向T细胞定向分化,免疫磁珠法收集CD3+T细胞,流式细胞仪检测CD4+CD8-细胞及CD4-CD8+细胞比例。分别采用MTT法及ELISA法检测自然增殖组及链球菌超抗原刺激后T细胞增殖活性及分泌细胞因子水平。结果①经骨髓CD34+细胞定向分化并扩增的CD3+T细胞中可检测到CD4+CD8-、CD4-CD8+T细胞,且银屑病患者组与正常对照组CD4+CD8-及CD4-CD8+T细胞比例无显著差异。②银屑病患者骨髓CD34+细胞定向分化的T细胞自然增殖组及链球菌超抗原刺激组增殖活性均显著高于正常人对照组。③银屑病患者T细胞自然增殖组培养上清白介素4、白介素8及干扰素γ与正常对照组差异无统计学意义,链球菌超抗原刺激后白介素4表达水平无显著改变,而白介素8及干扰素γ水平却显著高于正常人。结论有家族发病倾向的银屑病患者外周血T细胞活性异常可能与骨髓造血细胞相关。
- 尹国华李新华张开明刘玉峰
- 关键词：骨髓细胞白细胞介素4白细胞介素8
- 银屑病患者骨髓CD34^＋细胞定向分化的T细胞对角质形成细胞增殖的影响被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨家族史阳性的银屑病患者骨髓CD34+细胞体外定向分化的T细胞对表皮角质形成细胞(KC)增殖调控蛋白表达的影响。方法:将银屑病患者骨髓CD34+细胞体外定向分化的T细胞经链球菌超抗原活化后与KC共培养,分别采用免疫组化法及ELISA法检测KCC-myc、bcl-xL、p53及Ki67蛋白表达及培养上清白介素(IL)-8、干扰素(IFN)-γ水平。结果:①受银屑病患者CD34+细胞定向分化T细胞作用的KCC-myc及Ki67蛋白表达与自然增殖组及正常人CD34+细胞定向分化的T细胞作用组相比显著增强(P<0.05),而bcl-xL及p53蛋白表达3组间的差异无统计学意义(P>0.05);②受正常人CD34+细胞定向分化T细胞作用的KCC-myc、bcl-xL、p53及Ki67蛋白表达与自然增殖组比较差异亦无统计学意义(P>0.05);③银屑病CD34+细胞定向分化的T细胞作用组培养上清IL-8及IFN-γ水平显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:银屑病患者骨髓造血细胞定向分化的T细胞可影响KC增殖状态,显示类似银屑病外周血T细胞的活性特点。
- 李新华张开明尹国华刘玉峰
- 关键词：骨髓CD34^+细胞T细胞角质形成细胞
- 银屑病患者造血细胞定向分化的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞活性研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨造血细胞与银屑病患者CD4+ CD25+调节性T细胞活性异常的关系。方法:在胸腺基质细胞支持下,将骨髓CD34+细胞向T细胞定向分化,免疫磁珠法分离CD4+ CD25+调节性T细胞,分别在自然增殖状态及链球菌超抗原刺激下,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和ELISA法测定定向分化的CD4+ CD25+ T细胞增殖活性及分泌细胞因子水平。结果:在自然增殖状态下,银屑病患者CD34+细胞定向分化的CD4+ CD25+ T细胞显示与正常对照相似的增殖活性及白介素(IL)-2、IL-4、IL-8、IL-10、干扰素(IFN)-γ等细胞因子分泌水平,然而,在受到A族链球菌超抗原刺激后,银屑病患者定向分化的CD4+ CD25+ T细胞较正常对照显示相对低的增殖活性及分泌IL-2、IL-10能力。结论:银屑病患者CD34+细胞定向分化的CD4+ CD25+ T细胞功能异常,提示银屑病患者调节性T细胞功能异常可能源自遗传背景决定的骨髓造血细胞活性。
- 董峰李新华张开明尹国华
- 关键词：银屑病CD34^+细胞造血细胞调节性T细胞
