国家自然科学基金(30470107) 作品数:5 被引量:25 H指数:4 相关作者: 郑易之 刘昀 刘国宝 李冉辉 邹永东 更多>> 相关机构: 深圳大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 深圳市科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
大豆PM2蛋白11氨基酸结构域的耐盐功能鉴定 被引量:1 2006年 大豆PM2蛋白属LEA3(late embryogenes is abundant group3)蛋白.以含大豆PM2基因的重组载体为模板,PCR法扩增出可编码6拷贝11-氨基酸重复序列的基因片段PM2D.构建pET28a/PM2D重组载体,并转化大肠杆菌得到重组菌BL21/PM2D.SDS-PAGE电泳结果表明,BL21/PM2D重组菌可被诱导表达相对分子质量约为15000的蛋白条带,与目的蛋白的理论相对分子质量(13600)接近.利用DNASIS软件分析,PM2D缺失短肽的亲水指数为1.12.将重组菌BL21/PM2和BL21/PM2D分别涂布在含500mmol/LNaCl和1200mmol/L山梨糖的固体培养基上,计算重组菌的存活率.结果显示,两种重组菌在含500mmol/LNaCl培养基上的存活率分别为30.8%和26.0%,均高于对照菌(BL21/pET28a)的存活率;在含1200mmol/L山梨糖培养基上的存活率分别为59.7%和59.3%,与对照BL21/pET28a菌株的存活率相比无明显差异.PM2D短肽长度为PM2蛋白全长的1/4,但BL21/PM2D重组菌的耐盐能力为BL21/PM2重组菌的80%左右.表明11-氨基酸重复序列区是PM2蛋白序列的一个耐盐结构域. 叶展辉 郑易之 刘昀关键词:结构域 盐胁迫 大肠杆菌 大豆 植物胚胎发育晚期丰富蛋白1组的结构与功能 被引量:8 2008年 植物胚胎发育晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundant proteins,LEA)是植物胚胎发生后期种子中大量积累的一类蛋白质。根据蛋白质的氨基酸基序和保守结构特点,LEA蛋白一般分为6组,其中第1组LEA蛋白(LEA1)含有高度保守的20氨基酸基序。LEA1蛋白在水溶液中主要呈无规则结构,具高亲水性和热稳定性,与植物抗逆功能密切相关。本文就LEA1蛋白的功能和结构等方面的研究做一综述。 邹永东 施丽沙 刘国宝 洪锐沙 郑易之关键词:启动子 一种大豆LEA1组Em蛋白耐盐功能结构域的初步确定 <正>LEA 蛋白(Late embryogenesis abundant protein)是指胚胎发生后期种子中大量积累的一系列蛋白质。其中第一组 LEA 蛋白(LEA1)主要特征是具有多拷贝串联的20个氨基酸残基组成... 邹永东 施丽沙 郑易之关键词:大豆 盐胁迫 功能结构域 文献传递 不同萌发期大豆胚根热稳定性蛋白质组的比较研究 干旱胁迫是造成农作物减产的重要环境因素之一。植物在长期的进化过程中,已发展出多种生理生化机制抵抗干旱胁迫。目前资料表明,多个蛋白共同参与提高植物的抗逆性,其中部分抗逆蛋白质均具有热稳定的特性。因此,通过比较热稳定蛋白质组... 石晓英 刘昀 郑易之关键词:大豆 蛋白质组学 文献传递 大豆PM2蛋白22氨基酸结构域可提高酵母细胞耐盐性 <正>Lea(late embroygenesis abundant)基因是一类重要的抗逆相关基因。由于 lea 基因的多样性和功能的复杂性,其确切的功能和作用机制并不十分明了。LEA 蛋白通常分为4-7组,其中对 LE... 李冉辉 刘昀 汪为茂 梁翔宇 郑易之关键词:大豆 耐盐性 酵母 文献传递 大豆种子Em基因(LEA1)启动子的克隆与序列分析 被引量:5 2007年 根据已公布的大豆种子Em基因(LEA1)的5′末端序列设计二个基因特异反向引物(EmS1,EmS2)。以大豆基因组DNA为模版,利用染色体步行(Chromosome Walking)法,获得了Em基因起始密码子上游836bp的特异DNA片段。进行序列测定和生物信息学分析。结果表明,这段DNA序列为一尚未在基因数据库登录的DNA片段。该序列含有启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box,因此可能具有启动子活性。含有1个DRE1和2个ABRE,该启动子可能受到ABA和干旱等条件的诱导。含有1个AG-motif和1个ELRE-motif,该启动子可能参与创伤和诱导子等胁迫因素的应答。含有2个RY-repeat和1个TGTCACA-Motif,该启动子片段可能具有种子特异性。结果表明,所克隆到的片段可能为基因Em的诱导型启动子,并且很可能是种子特异性启动子。 刘国宝 郑易之关键词:大豆 LEA基因 诱导型启动子 大豆PM2蛋白(LEA3)表达可提高酵母重组子的耐盐性 被引量:6 2007年 大豆PM2蛋白属LEA3(late embryogenesis abundant group3)蛋白。本实验以含大豆PM2基因的重组载体pET28a/PM2为模板,PCR法构建酵母表达载体pYES2/PM2,并转化酵母细胞得到重组菌INV/PM2。SDS-PAGE电泳结果表明,INV/PM2重组菌可被诱导表达分子量约为50 kDa的蛋白条带,与目的蛋白的理论分子量(50 kDa)接近。利用液相色谱-电喷雾质谱对酵母重组子表达的重组蛋白进行分析鉴定。分别测定未转基因重组菌INV/pYES2和转PM2基因的重组菌INV/PM2在无胁迫、和含1.8 mol/LNaCl2、mol/L山梨糖培养基中的生长曲线。结果表明大豆PM2蛋白的表达对酵母正常生长没有影响。在含高盐的培养基里,转PM2基因酵母INV/PM2的延滞期短于对照菌。这表明PM2蛋白的表达可以提高酵母细胞的耐盐能力。但是在含山梨糖的高渗培养基里,两种菌的生长情况无明显差异。 李冉辉 刘昀 郑易之关键词:大豆 耐盐性 酵母 几种大豆LEA基因启动子活性的初步鉴定 <正>LEA 蛋白(Late-embryogenesis-abundant protein)为晚期胚胎富集蛋白,可在种子成熟过程中表达,也可受干旱、低温胁迫和脱落酸的诱导,在植物营养组织中高度表达,提高植物的抗旱耐盐性。... 刘国宝 郑易之关键词:大豆 诱导型启动子 文献传递 不同萌发期大豆胚根热稳定性蛋白质组的比较研究 <正>干旱胁迫是造成农作物减产的重要环境因素之一。植物在长期的进化过程中,已发展出多种生理生化机制抵抗干旱胁迫。目前资料表明,多个蛋白共同参与提高植物的抗逆性[1],其中部分抗逆蛋白质均具有热稳 石晓英 刘昀 郑易之关键词:大豆 蛋白质组学 文献传递 农杆菌介导水稻Em基因转化体系的建立 <正>水稻(Oryza sativa L.)是世界上最重要的粮食作物之一。世界上种植的相当一部分水稻, 由于干旱和土壤盐渍化的影响而使其产量难以提高。通过基因工程技术培育抗旱耐盐新品种是提高水稻生产水平的最经济有效的措施... 刘国宝 郑易之