江苏省农业科学院科研基金(6110521)
- 作品数:2 被引量:8H指数:1
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- 苏丹草农杆菌介导法基因转化条件
- 2008年
- 以苏丹草幼穗诱导产生的胚性愈伤组织为材料,比较了抗生素羧苄青霉素、头孢霉素及筛选剂卡那霉素对愈伤组织生长、绿芽分化和绿苗生长的影响。结果表明:500 mg/L的羧苄青霉素对愈伤组织生长的影响与对照差异不明显,可提高愈伤组织绿苗分化率;500 mg/L的头孢霉素明显抑制愈伤组织的生长,对分化影响不大;愈伤组织生长期筛选剂卡那霉素浓度为75 mg/L时,愈伤组织的褐化率达到100%;愈伤组织分化期,卡那霉素浓度为10 mg/L时,绿芽能分化成幼苗,所有幼苗的心叶白化、生长速度与对照无差异。培养基中添加500 mg/L的羧苄青霉素、经农杆菌侵染和15 mg/L卡那霉素筛选获得再生植株,经PCR检测,初步证明NPTⅡ选择标记基因已整合到部分转化植株的基因组中。
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- 关键词:苏丹草胚性愈伤组织农杆菌转基因植株
- 苏丹草幼穗离体培养植株的再生技术被引量:8
- 2005年
- 以苏丹草幼穗为外植体材料,研究幼穗发育期以及配比的激素组合对愈伤组织诱导发生、生长状态及其绿苗分化能力的影响.结果表明:长度为1.5~5.0 cm的幼穗,在愈伤组织诱导培养基中添加 3.0 mg/L 2,4-D和 0.2 mg/L KT,诱导频率达80%~90%,继代培养基中仍添加 3.0 mg/L 2,4-D+ 0.2 mg/L KT,愈伤组织增殖速度快,且保持植株再生的能力;在愈伤组织分化培养基中添加 2.00 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA或添加 2.00 mg/L CPPU+0.01 mg/L NAA,经继代培养3~5代的愈伤组织绿苗分化率保持在50%以上;在继代培养中选择外表呈白色、干燥、紧密、颗粒状的愈伤组织,是提高其再生植株能力的有效方法.
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- 关键词:苏丹草幼穗离体培养愈伤组织植株再生