哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(RC2010XK002028)
- 作品数：17 被引量：117H指数：6
- 相关作者：葛菁萍平文祥宋刚陈丽凌宏志更多>>
- 相关机构：黑龙江大学更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程农业科学更多>>
- 传统发酵豆酱制品中霉菌菌群的动态分析被引量：10
- 2010年
- 以黑龙江省齐齐哈尔市拜泉县农家自然发酵黄豆酱为研究对象,通过传统微生物学方法对发酵不同时期的发酵豆酱制品中的霉菌进行分离、培养、计数和初步鉴定,共检测到犁头霉属(Absidia),曲霉属(Aspergillus),米曲霉(Aspergilleas oryzae),毛霉属总状枝毛霉组(Mucor racemosus),雅致放射毛霉属(Actinomucorelegans),毛霉属大毛霉组(Mucedo)六种霉菌,其中米曲霉(Aspergillusoryzae)在整个发酵过程占绝对优势,分析了豆酱发酵过程中微生物种群的数量关系、种群动态变化规律,为筛选优良的豆酱发酵菌株和功能菌株,实现工业化生产豆酱提供理论依据。
- 陈方博陈丽王海曼平文祥葛菁萍
- 树干毕赤酵母(Pichia Stipitis)木糖醇脱氢酶(xyl2)基因克隆与序列分析
- 2011年
- 根据木糖醇脱氢酶基因序列相似的特点,设计1对引物获得Pichia stipitisCICC1960的木糖醇脱氢酶基因序列,此片段长度为1 092 bp,共编码363个氨基酸。利用生物信息学软件对该序列进行了同源性分析、氨基酸组成分析、疏水性分析、磷酸化位点预测、CDS分析及二、三级结构预测。结果表明,该片段为Pichia stipitis CICC1960的木糖醇脱氢酶基因序列。
- 孙博葛菁萍
- 关键词：PICHIA木糖醇脱氢酶
- 灭活原生质体融合选育木糖、葡萄糖共发酵酿酒酵母工程菌被引量：5
- 2014年
- 为了选育高效利用木糖、葡萄糖共发酵,并使乙醇产量有所提高的酿酒酵母工程菌株。以酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W5和休哈塔假丝酵母Candida shehatae 20335为亲本株,确定了双亲株原生质体灭活剂量,并进行原生质体融合获得融合子,用高效液相色谱(HPLC)测定融合子以木糖、葡萄糖单碳源及混合碳源发酵时的乙醇得率。结果表明,获得一株发酵性能优良的融合子HDY2‐14,其利用木糖和葡萄糖单碳源发酵的乙醇得率分别为0.213g/g和0.257g/g,混合碳源发酵的乙醇得率为0.310g/g,其中混合碳源乙醇得率比亲本株W5和20335的乙醇得率分别提高了20.2%和15.2%。
- 葛菁萍安琦张玉环张麓岩张梦云平文祥
- 关键词：原生质体融合灭活酿酒酵母休哈塔假丝酵母
- 休哈塔假丝酵母HDYXHT-01利用木糖生产乙醇的发酵工艺优化被引量：5
- 2011年
- 采用Plackett-Burman(PB)方法和中心组合设计(Central composit design,CCD)对休哈塔假丝酵母Candida shehatae HDYXHT-01利用木糖发酵生产乙醇的工艺进行优化。PB试验设计与分析结果表明:硫酸铵、磷酸二氢钾、酵母粉和接种量是影响木糖乙醇发酵的4个关键因素,以乙醇产量为响应目标,采用CCD和响应面分析法(Response surface methodology,RSM),确定了木糖乙醇发酵的最佳工艺为:硫酸铵1.73 g/L、磷酸二氢钾3.56 g/L、酵母粉2.62 g/L和接种量5.66%,其他发酵条件为:木糖80 g/L,MgSO4.7H2O 0.1 g/L,pH 5.0,培养温度30℃,装液量100 mL/250 mL,摇床转速140 r/min,发酵时间48 h,在该条件下发酵液中乙醇产量可以达到26.18 g/L,是优化前的1.15倍。
- 葛菁萍刘国明杨晓峰孙红兵凌宏志平文祥
- 关键词：休哈塔假丝酵母木糖乙醇响应面分析法
- 1株纤溶酶菌株的筛选鉴定及提高产酶量的方法研究被引量：6
- 2011年
- 从齐齐哈尔市拜泉县的自酿农家豆酱制品中分离筛选出1株产纤溶酶菌株HDBF-DJ3,对其进行菌体、菌落、生理生化特征分析,并结合16S rDNA序列分析结果,鉴定其为枯草芽孢杆菌。经亚硝基胍诱变筛选得到突变株HDBF-DJ3N7,其纤溶酶活力为368.78IU/mL,是出发菌株的2.1倍。对菌株HDBF-DJ3N7进行连续10代的培养,结果表明该突变株的高产纤溶酶特性能够稳定遗传。该菌株有望应用到生产领域。
- 王海曼宋刚柴洋洋平文祥葛菁萍
- 关键词：豆酱纤溶酶枯草芽孢杆菌诱变
- 产GABA的乳酸菌菌株的选育及最佳发酵条件研究被引量：6
- 2013年
- γ-氨基丁酸(简称GABA),又称氨酪酸,是一种天然存在的非蛋白质氨基酸。本文主要对GABA高产乳酸菌进行选育,优化其发酵条件。经UV诱变、NTG诱变和UV、NTG复合诱变,得到1株高产GABA的突变株F11。经高效液相色谱测定,在最佳诱变条件下诱变的菌株GABA产量达到0.87 mmol/L,是出发菌株产量(0.21mmol/L)的4倍多。对F11的培养基和发酵条件进行优化,GABA最大产量1.19 mmol/L,是出发菌株HDBR-02产量的近6倍。通过诱变方法获得的GABA高产乳酸菌菌株,扩大了GABA产生菌来源,为GABA的生产奠定了良好的基础。
- 葛菁萍程明宋明明平文祥
- 关键词：Γ-氨基丁酸乳酸菌诱变发酵
- 传统发酵豆酱中乳酸菌的分离、筛选及鉴定被引量：19
- 2014年
- 在豆酱的自然发酵过程中,乳酸菌是促成豆酱风味物质形成的重要微生物。豆酱呈味主要是通过乳酸菌发酵糖类产生小分子醛、酸、酯等风味物质。以黑龙江发酵豆酱作为研究对象,对发酵过程中的乳酸菌进行传统的分离、培养、鉴定和筛选,并利用16S rDNA的序列测定技术,对乳酸菌群进行研究。从豆酱样品中共分离出有溶钙圈的菌株44株,其中过氧化氢试验阴性,同时革兰氏染色阳性的菌株共6株,初步鉴定为乳酸菌,将其分别命名为:HDBL-1,HDBL-2,HDBL-3,HDBL-4,HDBL-5,HDBL-6。同时,获得了1株产酸低且耐盐菌HDBL-7,对该菌株进行鉴定后,确定其为乳酸片球菌(Pediococcus acidilactici)。该研究为改善豆酱的品质和豆酱的工业化生产奠定了菌种来源基础。
- 辛星宋刚周晓杭赵靖雯陈丽葛菁萍平文祥
- 关键词：豆酱乳酸菌RDNA
- 树干毕赤酵母(Pichia Stipitis)木糖还原酶(xyl1)基因克隆与序列分析被引量：2
- 2011年
- 根据木糖还原酶基因序列相似的特点,设计一对引物获得PichiastipitisCICC1960的一段基因片段,此片段长度为957bp,共编码318个氨基酸。利用生物信息学软件对该序列进行了同源性分析、氨基酸组成分析、疏水性分析、磷酸化位点预测、CDS分析及二、三级结构预测。结果表明该片段为Pichia stipitis CICC1960木糖还原酶基因序列。
- 孙博葛菁萍
- 关键词：PICHIA木糖还原酶
- 氦氖激光和亚硝基胍复合诱变选育高产乙醇的休哈塔假丝酵母被引量：2
- 2011年
- 木糖的乙醇发酵一直被视为木质纤维原料生物转化产生乙醇的关键因素,休哈塔假丝酵母(Candidashehatae)是木糖发酵性能较好的天然酵母之一。对Candida shehatae HDYXHT-01进行了氦氖激光诱变和NTG诱变,力求选育出发酵木糖产乙醇能力强的菌株。氦氖激光诱变得到的突变株HN-3乙醇产量为17.03g/L,乙醇得率达到0.3393g/g,相比原始菌株提高20.36%。再对HN-3进行NTG诱变,得到的突变株NTG-2乙醇产量为24.20g/L,相比HN-3提高42.10%。进而对NTG-2菌株进行了摇瓶48h连续发酵试验,测得其乙醇产量、木糖利用率、乙醇得率和乙醇产率分别达到24.16g/L,69.26%,0.4360g/g和0.7075g/(L·h)。
- 葛菁萍孙红兵王轶男宋刚平文祥
- 关键词：休哈塔假丝酵母NTG诱变乙醇
- 构建基于杆状病毒的BV-T7杂合表达体系及利用其在哺乳动物和禽类细胞中表达eGFP基因
- 2012年
- 【目的】研究重组杆状病毒BV-T7杂合表达体系能否有效转导禽类细胞并在禽类细胞中表达外源基因(eGFP),从而构建能在禽类细胞中高效稳定表达外源基因的重组杆状病毒表达系统。【方法】本研究利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,结合T7表达系统,通过对eGFP表达水平的调控来把握噬菌体T7 RNA聚合酶(T7 RNAP)的功能。利用两支重组杆状病毒,pFastBac-CMV-T7 RNAP重组杆状病毒为哺乳动物细胞启动子CMV调控的噬菌体T7 RNA聚合酶的cDNA;pFB-T7pro-IRES-GFP-T7ter重组杆状病毒为T7启动子控制的eGFP报告基因。将两支重组杆状病毒共同侵染哺乳动物OL(oligodendrocyte)细胞、鸡胚成纤维细胞和鸡胚骨骼肌细胞。【结果】两支重组杆状病毒利用T7启动子和T7 RNAP,在OL细胞、鸡胚成纤维细胞和鸡胚骨骼肌细胞中成功表达eGFP报告基因,而且未引起细胞病变,但在鸡胚原代细胞中eGFP的表达相对弱于在OL细胞中的表达。在OL细胞中重组杆状病毒对细胞的转导效率为59.5%,在鸡胚成纤维细胞和鸡胚骨骼肌细胞中转导效率分别为23.2%和33.1%。【结论】本研究构建的基于杆状病毒、T7RNA聚合酶、T7启动子(BV-T7)杂合表达体系能够在哺乳类细胞及禽类细胞中表达T7 RNAP,并利用T7RNAP继续高效而稳定地表达外源基因。这为难于体外操作的RNA病毒提供了有效的研究方法,并对新型基因工程疫苗的研制提供了一个高效而稳定的表达载体系统。
- 葛菁萍唐晓艳高冬妮宋姗姗鲁珊楼庄伟平文祥
- 关键词：重组杆状病毒EGFP
