您的位置: 专家智库
>
资助详情>
江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXIOB-04322)
江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXIOB-04322)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
- 相关作者:郑磊丁庆伟王建浩徐岚吴士良更多>>
- 相关机构:苏州大学更多>>
- 发文基金:江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- BSP siRNA 的构建及其对成骨样细胞株MC3T3-E1相关基因表达的影响
- 2011年
- 目的 构建BSP干扰表达载体,有效沉默小鼠成骨样细胞MC3T3-E1 Subclone 14细胞的BSP基因表达,研究其对MC3T3-E1 Subclone 14增殖分化过程中OCN等成骨相关基因表达的影响.方法 ①利用互联网资源针对BSP基因mRNA序列设计四条可能的小干扰RNA(siRNA),将这四条小干扰RNA插入到RNA干扰载体pGPU6/GFP/Neo中构建成四条干扰载体.②将构建好的BSP siRNA 表达载体pGPU6/GFP/Neo-siBSP-1、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-2、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-3、pGPU6/GFP/Neo-siBSP-4通过阳离子脂质体将表达质粒分别转染MC3T3-E1 Subclone 14细胞,48h后荧光显微镜下观察不同浓度质粒的转染效率,以RT-PCR 检测BSP和OCN等成骨相关基因mRNA的表达.结果 ①成功构建四条正确的BSP siRNA 表达载体;②成功筛选出一条对BSP有明显抑制作用的siRNA干扰载体,阻断BSP表达后,成骨相关基因cbfa1和OCN的表达均受到明显抑制.结论 构建的BSP siRNA 表达载体可以有效抑制MC3T3-E1 Subclone 14细胞的BSP基因表达,同时抑制相关基因cbfa1和OCN的表达,从而影响该成骨细胞形态与功能,为骨转移等相关疾病的治疗提供了一定的实验基础.
- 王建浩徐岚丁庆伟郑磊姜智吴士良
- 关键词:BSPSIRNA转染