广东省自然科学基金(9151008901000190)
- 作品数：12 被引量：59H指数：4
- 相关作者：周小棉刘大渔王秋平王维梁广铁更多>>
- 相关机构：广州市第一人民医院广州医学院中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者行异体骨髓间充质干细胞移植的护理被引量：6
- 2014年
- 目的观察经外周静脉异体骨髓间充质干细胞移植治疗慢加急性乙型肝炎肝衰竭的疗效及护理特点。方法经外周静脉行异体骨髓间充质干细胞移植术治疗45例慢加急性乙型肝炎肝衰竭的患者，以46例单纯内科综合治疗的患者为对照，分析12周患者存活情况和肝功能的变化，并针对手术不同时期进行整体护理。结果患者的12周存活率为75．6％（34／45），高于对照组的52．2％（24／46），干细胞治疗胆红素和凝血功能有明显改善。结论异体骨髓间充质干细胞移植可提高慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者的生存率，术前的心理护理，熟练的技术操作，术后的精心护理和病情观察有利于移植后患者的康复。
- 陈菲菲杨丽华陈苑莉陈俊峰蔡银科
- 关键词：慢加急性肝衰竭乙型肝炎护理
- 微流控芯片精子分选法对精子常规参数及DNA完整性的影响被引量：8
- 2011年
- 目的:研究微流控芯片精子优选技术对精子常规参数及DNA完整性的影响。方法:自行设计制作微流控芯片,利用芯片处理技术和上游法对40例精液标本进行精子优选,通过计算机辅助精液分析系统及染色质扩散试验从精子常规参数及DNA完整性两个方面评价精液体外处理对精子的影响。结果:精液经微流控芯片法和上游法处理后,精子活力、精子正常形态率以及精子尾部肿胀率均有显著提高(P<0.01),精子的DNA损伤率明显降低(P<0.01)。微流控芯片法与上游法相比,优选后前者精子DNA损伤率明显低于后者[(8.4±5.8)%vs(16.4±9.2)%,P<0.01],而其他参数差异无显著性。结论:微流控芯片技术在精子优选中能获得精子DNA损伤程度小的高质量精子。
- 王维梁广铁彭娅娅刘大渔周小棉
- 关键词：微流控芯片上游法精子优选DNA完整性
- 微流控芯片优选人类精子研究被引量：2
- 2009年
- 目的:探讨微流控芯片技术对精子的优选能力。方法:自行设计和制造微流控芯片,利用芯片对40例人精液标本进行精子分选实验,优化其分选条件,观察芯片处理前后精液各参数变化。同时对其中30例精液标本(A组:a+b级精子<20%组,n=15;B组:a+b级精子≥20%组,n=15)同时用芯片法和密度梯度离心法分选,比较2种方法分离前后精子活力、形态等参数的变化。结果:①优选后精子活力和精子正常形态率都可见显著提高(P<0.001;P<0.01)。②在精子活动力优选上A、B组芯片法均明显优于密度梯度离心法(P<0.01),尤其在A组这种优势更为明显(P<0.001)。而在精子形态优选上,2种方法无显著差异(P>0.05)。结论:微流控芯片技术在优选精子中具有较高的分选效率,且具有操作简单、分选时间短,对精子损伤小的特点,在辅助生殖技术中特别是体外受精中将有良好的应用前景。
- 王维梁广铁刘大渔周小棉
- 关键词：微流控芯片精子优选辅助生殖技术
- 3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的比较被引量：3
- 2011年
- 目的比较3种免核酸提取PCR试剂盒检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的灵敏度和特异度,初步探讨其用于HBV DNA检测的临床价值。方法用3种免核酸提取PCR试剂盒分别检测30例慢性乙型肝炎患者及30例阴性参比血清标本中的HBV DNA,以荧光定量PCR结果为标准,比较3种试剂检测灵敏度和特异度。结果 3种试剂盒的HBV DNA阳性检出率分别为93.3%(28/30)、96.7%(29/30)、100%(30/30);3种试剂检测HBV阴性的特异度均为100%;3种试剂检测灵敏度A公司为103 IU/mL,B、C公司均为102 IU/mL。结论使用免核酸提取PCR试剂检测HBV快速、简便、高效,可用于临床HBV DNA快速检测。
- 王秋平陈斌张琼雷秀霞周小棉匡艳华
- 关键词：乙型肝炎HBV
- 毛细管直接PCR方法快速鉴定NDM-1阳性细菌被引量：1
- 2011年
- 目的建立一种无需核酸提取预处理的毛细管PCR方法,用于新德里金属酰胺酶(NDM-1)阳性细菌的快速鉴定。方法考察在直接加入细菌培养液条件下,两种改良型DNA聚合酶Terra和MightyAmp DNA聚合酶对NDM-1编码基因的扩增效果。选用其中一种DNA聚合酶进行毛细管PCR,确定其对于NDM-1阳性细菌的检测限。结果当分别向25 μLPCR反应体系加入1、3、5、7μL细菌培养液条件下,两种DNA聚合酶均能有效扩增NDM-1编码基因序列,Terra DNA聚合酶效果较好。采用两步法毛细管PCR扩增NDM-1编码基因,3 μL反应体积条件下,40个循环反应在20 min内完成。结论应用改良型DNA聚合酶可以免去细菌核酸纯化步骤直接进行PCR。免核酸提取扩增结合毛细管PCR方法可以显著缩短核酸分析时间,适合于NDM-1阳性细菌的快速鉴定。
- 周小棉刘大渔黄华霖
- 关键词：聚合酶链反应基因
- 臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中检出NDM-1型金属β内酰胺酶基因被引量：32
- 2011年
- 目的调查对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌中NDM-1型金属β内酰胺酶基因的存在情况。方法应用改良Hodge试验和EDTA协同试验对2007～2010年本院收集的对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌进行碳青霉烯酶筛选。PCR法扩增NDM-1基因,并对PCR扩增阳性产物进行DNA测序分析。对NDM-1基因阳性菌株用PCR方法检测armA和rmtB16S rRNA甲基化酶基因,VIM、SPM、IMP和KPC碳青霉烯酶基因以及Ⅰ类整合子。Etests法进行药敏试验。结果 70株肠杆菌中10株Hodge Test和EDTA协同试验阳性,55株鲍曼不动杆菌中6株EDTA协同试验阳性。其中1株臭鼻克雷伯和3株鲍曼不动杆菌PCR扩增出NDM-1型金属β内酰胺酶基因目的片段,经测序比对为NDM-1型基因。其中1株臭鼻克雷伯和1株鲍曼不动杆菌检测出armA型16S rRNA甲基化酶基因,1株鲍曼不动杆菌检测出2000 bp左右的Ⅰ类整合子,未检出除NDM-1型外的其他碳青霉烯酶基因。NDM-1基因阳性菌除对替加环素、多黏菌素B敏感外,对其他检测的抗菌剂均耐药。结论臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中存在NDM-1型金属β内酰胺酶基因,有的携带armA型16S rRNA甲基化酶基因和Ⅰ类整合子,为该地区首次报道。
- 杨银梅叶惠芬张伟红陈惠玲周小棉
- 关键词：碳青霉烯酶革兰氏阴性菌
- 毛细管液滴中的乙型肝炎病毒DNA提取与扩增
- 2011年
- 目的利用毛细管液滴技术,发展一种集成DNA提取与扩增的乙型肝炎病毒分析方法。方法利用聚四氟乙烯毛细管的疏水特性,向毛细管中先后引入油相和水相溶液,在表面张力作用下形成油包水液滴。顺序向毛细管中引入含有不同试样的液滴,完成进样、DNA结合、洗涤、洗脱,扩增等过程。微液滴不仅有效解决了样品蒸发和扩散问题,同时在操作中起到微阀和微混合器微功能。结果利用上述毛细管液滴方法分析了乙型肝炎病毒的血清样品,通过优化DNA提取和扩增条件,毛细管液滴方法能在较短时间内高效纯化并扩增DNA。结论上述方法具有简便快速和低成本的优势,有望发展成一种有潜力的微全核酸分析系统。
- 王维刘大渔梁广铁雷秀霞周小棉
- 关键词：聚合酶链反应DNA提取液滴毛细管
- 乙型肝炎病毒YMDD变异检测方法的新进展被引量：3
- 2011年
- 乙型肝炎病毒（HBV）感染是导致肝硬化和肝癌的重要因素,但长期接受拉米夫定治疗的患者会产生耐药变异,一般服用拉米夫定〉6～9个月,部分患者可发生耐药变异,并随治疗时间延长而突变率逐渐增高。
- 王秋平周小棉
- 关键词：乙型肝炎病毒YMDD变异
- 液体人血浆HCV-RNA质控品临床应用探讨被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨液体人血浆HCV-RNA质控品临床应用的可行性。方法 用实时荧光定量PCR检测液体人血浆HCV-RNA质控品在不同存放时间和温度下HCV-RNA含量的变化情况,同时对同一管质控品进行3个复孔检测,考察其管内RNA分布的均一性。结果 多批次质控品在4℃存放半个月后HCV-RNA含量均有将近1个数量级的下降;存放6个月以上有1～2个数量级的下降;质控品置-20℃存放较4℃稳定;同一质控品3个复孔管内RNA分布均一性检测结果表明最高值与最低值之间相差1～2个数量级。结论 液体人血浆HCV-RNA质控品稳定性和均一性欠佳,目前尚不适合作为HCV-RNA室间质控品广泛应用。
- 雷秀霞王敏玲胡秀梅明凯华王秋平周小棉
- 关键词：丙型肝炎病毒稳定性均一性
- 基于微流控芯片模拟生理状况下精子自然优选研究
- 2012年
- 目的:在微流控芯片上模拟生理状态下的精子与宫颈粘液相互作用过程,寻找一种自然的接近生理状态的精子优选方法。方法:按功能构建微流控芯片,基于精子与宫颈粘液相互作用在芯片通道中模拟生理状态下的精子自然优选过程,进而实现对精子的优选,同时在芯片上集成实时精子检测池,通过计算机辅助精子分析系统(CASA)实时对精子的各项参数进行测定。本研究用微流控芯片法和常规上游法同时分析30例标本,并与分选前比较。结果:分选前a+b级精子百分率为(29.78±11.24)%、正常形态精子百分率为(8.00±5.19)%、直线速度(VSL)为(18.89±4.90)μm/s、平均路径速度(VAP)为(26.84±5.13)μm/s、前向性(STR)为(70.15±7.61)%。常规上游法分选后各项参数相应为(71.65±11.18)%、(14.95±6.79)%、(24.14±5.95)μm/s、(32.61±6.36)μm/s、(73.87±9.34)%。微流控芯片分选后各项参数相应为(92.37±6.33)%、(23.33±7.67)%、(34.03±16.78)μm/s、(38.73±16.40)μm/s、(84.91±12.56)%。芯片法与分选前比较,各参数差异有统计学意义(P均<0.01);与上游法比较,各参数差异亦有统计学意义(P均<0.05)。结论:本研究在微流控芯片上模拟生理状态下精子与宫颈粘液的相互作用过程,实现了对精子的自然优选和实时检测。优选出的精子质量较分选前及上游法都有明显提高,为芯片上实现模拟生理状态下的受精过程奠定了基础。
- 张其超王维李伟萱张琼梁广铁严伟周小棉
- 关键词：精子优选微流控芯片宫颈粘液
