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广东省科技计划工业攻关项目(2008B030301016)
作品数:
3
被引量:13
H指数:2
相关作者:
王兰天
祝葆华
张国平
敬敏
蒲荣
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相关机构:
广东医学院
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发文基金:
广东省科技计划工业攻关项目
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祝葆华
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2012
1篇
2011
1篇
2009
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3
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HBsAg阳性肝癌细胞基因组中HBx相关整合位点的探讨
被引量:1
2012年
目的探讨HBsAg阳性肝细胞肝癌(HCC)细胞基因组中HBVX基因(HBx)所参与整合的位点。方法取6例HBsAg阳性HCC患者癌组织,提取基因组DNA;行酶切、连接操作,针对HBx设计引物,行反向PCR扩增;将产物电泳后切胶回收特异性电泳条带,从中回收DNA并克隆至pMD18-T载体,转化、培养后取菌液行基因测序;用Blast工具进行序列比对。结果反向PCR扩增后,电泳检测可见7条特异性条带;克隆后得到测序结果22个;经序列比对发现3个整合位点,分别定位于19q12、2q32.2、22q12,其中,定位于19q12的基因为CCNE1。结论在HBsAg阳性HCC细胞基因组中存在HBx的整合;19q12、2q32.2、22q12是HBx参与整合的位点,提示HBV整合的CCNE1基因参与了HBsAg阳性HCC的发生和发展。
祝葆华
王兰天
李涛
周伯平
关键词:
整合位点
柴胡皂甙-d对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞周期的影响
被引量:7
2009年
目的探讨柴胡皂甙-d(SSd)对人肝癌HepG2细胞增殖和细胞周期的影响。方法(1)常规培养人肝癌HepG2细胞;(2)噻唑蓝(MTT)实验观察不同质量浓度SSd处理HepG2细胞72 h后以及10mg/L的SSd作用HepG2细胞不同时间对HepG2细胞生长指数的影响;(3)流式细胞术(FCM)检测SSd处理HepG2细胞48h后细胞周期的分布。结果SSd能明显抑制HepG2细胞的增殖,以10mg/L的SSd作用48h的抑制作用最明显。FCM检测显示SSd作用48h后实验组处于S期的细胞数较对照组明显减少(P<0.01)。结论SSd对人肝癌HepG2细胞的体外增殖具有抑制作用,并能使细胞周期中处于S期的细胞数减少。
张国平
祝葆华
王兰天
童传明
敬敏
关键词:
柴胡皂甙-D
HEPG2
增殖
细胞周期
柴胡皂甙-d对HepG2细胞恶性表型的逆转作用
被引量:6
2011年
目的探讨柴胡皂甙-d(SSd)对人肝癌细胞株HepG2细胞恶性表型的逆转作用及其机制。方法常规培养HepG2细胞至对数生长期,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察SSd不同浓度、作用不同时间对HepG2细胞增殖情况的影响。实验组选择10mg/L的SSd作用HepG2细胞48h,Giemsa染色法观察细胞形态学改变;化学发光法测定细胞上清液中甲胎蛋白(AFP)浓度;放射免疫法检测细胞上清液中白蛋白浓度;transwell小室实验观察细胞迁移率;RT—PCR检测p27基因mRNA表达。并与空白对照组做比较。数据在多组间比较采用随机分组单因素方差分析,在两组间比较采用t检验。结果10mg/L的SSd作用48h,对HqoG2细胞的生长抑制最明显(F=266.06,P〈0.01)。实验组HepG2细胞形态倾向于正常分化,形态变小、变圆,核变小、变圆或卵圆形,核/质比例缩小。与对照组比较,实验组穿膜细胞数明显减少[(50.60±4.04)个与(41.00±4.64)个,t=-7.32,P〈0.01);细胞上清液中自蛋白含量明显增多[(24.7±2.8)×10-3g/L与(31.1±4.9)×10-3g/L,t=7.83,P〈0.051;AFP含量明显减少[(118.2±15.6)×10^3μg/L与(70.3士5.7)×10^3μg/L,t=-10.72,P〈0.01]。实验组p27基因mRNA的相对表达量明显多于对照组(t=22.00,P〈0.05)。结论SSd对人肝癌细胞株HepG2细胞恶性表型具有明显的逆转作用,其机制可能与SSd上调HepG2细胞p27基因mRNA表达使其进入分化过程有关。
祝葆华
蒲荣
张国平
李明意
王兰天
苑进凯
关键词:
恶性表型
柴胡皂甙-D
P27
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