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天津市高等学校科技发展基金计划项目(20070214)

作品数:4 被引量:7H指数:1
相关作者:朱理玮付蔚华朱杰昌赵娜邱宇杰更多>>
相关机构:天津医科大学总医院更多>>
发文基金:天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 2篇心脏
  • 2篇树突
  • 2篇树突状
  • 2篇树突状细胞
  • 2篇转染
  • 2篇细胞
  • 2篇小鼠
  • 2篇淋巴
  • 2篇淋巴细胞
  • 2篇T淋巴细胞
  • 2篇CD40
  • 1篇凋亡
  • 1篇心脏移植
  • 1篇移植排斥
  • 1篇移植排斥反应
  • 1篇移植物
  • 1篇移植物排斥
  • 1篇增殖
  • 1篇树突细胞
  • 1篇树突状细胞诱...

机构

  • 4篇天津医科大学...

作者

  • 4篇付蔚华
  • 4篇朱理玮
  • 2篇邱宇杰
  • 2篇朱杰昌
  • 2篇赵娜
  • 1篇杨志强

传媒

  • 2篇中华器官移植...
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇天津医药

年份

  • 2篇2010
  • 2篇2008
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
输注转染FasL基因的供者树突状细胞减轻小鼠心脏移植排斥反应
2008年
目的探讨转染FasL基因的供者树突状细胞(DC)对小鼠心脏移植排斥反应的影响。方法分离并培养C57BL/6小鼠骨髓Dc,然后采用脂质体法以自行构建的pTracer-FasL真核表达质粒转染DC。以C57BL/6小鼠为供者,Balb/c小鼠为受者,将其分为转染组(n=12)、未转染组(n=12)及移植对照组(n=12)。转染组小鼠心脏移植前7d经阴茎背静脉注射1×10^6个转染FasL基因的供者DC;未转染组小鼠心脏移植前7d经阴茎背静脉注射1×10^6个未转染的供者DC;移植对照组仅行心脏移植,不接受供者DC输注。供心均移植于受者腹腔内。各组中,6只小鼠用于观察移植心脏存活时间,另6只于术后7d处死,取移植心脏,进行组织学观察及移植心脏排斥反应病理分级。结果转染组、未转染组和移植对照组小鼠移植心脏存活时间的中位数分别为20d、8.5d和9d,转染组移植心脏的存活时间明显长于未转染组和移植对照组(P〈0.01)。转染组中,2只排斥反应的病理分级为0级,4只为1级;未转染组中,2只为2级,4只为3级;移植对照组中,1只为2级,5只为3级。转染组排斥反应的病理分级明显低于移植对照组(P〈0.01)。结论受者于心脏移植前输注转染FasL基因的供者DC,可有效延长移植心脏的存活时间,并减轻排斥反应的程度。
付蔚华赵娜邱宇杰朱理玮
关键词:CD95移植物排斥转染
CD40RNA干扰小鼠树突状细胞抑制异系T淋巴细胞增殖的研究被引量:5
2010年
目的构建针对小鼠CIM0基因的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒载体,制备低表达CD40的树突状细胞(dendriticcells,DC),探讨其阻断CIM0/CIMOL共刺激通路诱导异系T淋巴细胞无反应的作用机制。方法采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,构建针对小鼠CIM0RNAi慢病毒载体,体外感染小鼠骨髓源DC。荧光实时定量PCR及流式细胞术检测感染前后CD40mRNA及DC表面抗原CD40表达。混合淋巴细胞培养观察CD40RNAi慢病毒感染DC对异系T淋巴细胞增殖能力的影响。结果体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC。成功构建小鼠CD40RNAi慢病毒载体,检测滴度为8×10^9TU/ml。慢病毒感染DC后与感染前相比,明显抑制CD40mRNA的表达(P〈0.05),CIM0蛋白表达也明显减少(P〈0.05)。混合淋巴细胞培养结果显示,CD40RNAi慢病毒感染DC组(1.381±0.442)与未感染组(2.444±0.485)及空慢病毒感染DC组(2.294±0.367)相比,淋巴细胞刺激指数(sI)明显下降(P〈0.01)。结论培养基选择法可收获大量骨髓源DC,所获骨髓源DC能激活初始型T细胞免疫应答。CD40RNAi慢病毒感染小鼠骨髓源DC,可以使DC低表达CD40蛋白。CD40RNAi慢病毒感染的DC体外刺激异系T淋巴细胞增殖的能力下降。为研究CIM0RNAi在同种器官移植诱导免疫耐受奠定基础。
付蔚华朱杰昌朱理玮
关键词:树突状细胞T淋巴细胞RNAI慢病毒载体
FasL转染小鼠树突状细胞诱导异系T淋巴细胞凋亡的研究被引量:1
2008年
目的:制备稳定表达FasL蛋白的小鼠骨髓源树突状细胞(DC)并探讨其体外诱导异系T淋巴细胞凋亡的机制。方法:采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,脂质体法转染FasL基因至小鼠成熟DC,流式细胞仪检测转染前后FasL蛋白的表达。混合淋巴细胞培养,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测DC对异系T淋巴细胞增殖的影响,流式细胞仪检测诱导异系T淋巴细胞凋亡的能力。结果:体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC,转染FasL基因的DC较未转染DCFasL蛋白表达明显升高,混合淋巴细胞培养结果显示,FasL转染后DC对异系T淋巴细胞刺激指数明显下降(P<0.01),且诱导T淋巴细胞凋亡的能力明显增加(P<0.01)。结论:培养基选择法可收获大量骨髓源DC,具有典型形态,高表达MHCⅡ和共刺激分子,所获骨髓源DC能激活初始型T细胞免疫应答。脂质体转染FasL基因至小鼠骨髓源DC,可以使DC高表达FasL蛋白。转染FasL的DC体外刺激异系T淋巴细胞增殖的能力下降,且能明显诱导T淋巴细胞凋亡。
付蔚华杨志强赵娜邱宇杰朱理玮
关键词:转染树突细胞T淋巴细胞细胞凋亡小鼠
RNA干扰技术阻断CD40/CD40L共刺激通路对小鼠移植心存活时间的影响被引量:1
2010年
目的 探讨慢病毒介导RNA干扰(RNAi)技术阻断CD40/CD40L共刺激通路对小鼠移植心存活时间的影响.方法 以针对小鼠CD40基因的RNAi慢病毒载体在体外感染供者骨髓来源的树突状细胞(DC),制备低表达CD40的耐受性DC(Tol-DC).荧光实时定量聚合酶链反应及流式细胞术检测DC感染前后CD40 mRNA及DC表面抗原CD40、CD11c和MHCⅡ的表达.建立小鼠异位腹腔心脏移植模型.在小鼠异位心脏移植前7 d,经静脉给受者输注体外制备的低表达CD40的Tol-EC(慢病毒感染DC注射组),并设置单纯移植对照组和未感染DC注射组作为对照.观察各组移植心的存活时间,评定各组术后第7天移植心排斥反应的病理分级.结果 CD40-RNAi慢病毒载体在体外感染DC 48 h后,CD40 mRNA表达明显受到抑制,抑制率为80.9%;CD40表达明显下降,由(74.37±4.08)%降至(40.07±4.03)%(P<0.05).单纯移植对照组、未感染DC注射组和慢病毒感染DC注射组移植心存活时间分别为:(8±2)d、(9±1)d和(14±4)d,慢病毒感染DC注射组移植心存活时间明显延长,并且移植心排斥反应病理分级显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 阻断CD40/C40L共刺激通路可抑制异系T淋巴细胞的活化,从而抑制急性排斥反应,延长小鼠移植心的存活时间.
朱杰昌付蔚华朱理玮
关键词:RNA干扰共刺激通路CD40心脏移植
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