广东省自然科学基金(5006680) 作品数:5 被引量:71 H指数:5 相关作者: 林俊芳 郭丽琼 韩君莉 郑晓冰 周伟坚 更多>> 相关机构: 华南农业大学 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 广东省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 更多>>
简便高质量的食用菌总RNA提取方法 被引量:12 2008年 STE法是针对食用菌多糖含量高而设计的一种提取食用菌总RNA的有效方法。本研究以灵芝、香菇和白腐真菌TR16菌株的菌丝体为材料,采用STE法提取其总RNA,同时以Trizol法作对照。结果表明:采用STE法提取的三种菌丝的总RNAA260/A280比值在1.80~2.10范围内,A260/A230略大于2.00;而Trizol法提取的总RNAA260/A280比值小于1.80,A260/A230小于1.90,明显比STE法效果差;总RNA电泳检测表明:STE法的3条带(28SrRNA、18SrRNA和5SrRNA)清晰,无拖尾,无杂带,效果比Trizol法好;将STE法提取的总RNA进行反转录后合成双链cDNA,进行预扩增,电泳显示呈弥散状;再进行选择性扩增,有相同或相异的条带。进一步表明STE法提取的总RNA质量较高,可以满足后续分子生物学研究的要求。 税丕容 郑晓冰 林俊芳 郭丽琼关键词:食用菌 总RNA 漆酶结构的研究进展 被引量:29 2006年 漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,具有特异的氧化还原电位,能够催化氧化酚类和芳胺类化合物,同时伴随4个电子的传递,最终将O2还原成水。本文就近年来漆酶的结构及其特性的研究进展做扼要综述。 韩君莉 郭丽琼 林俊芳关键词:漆酶 晶体结构 安全选择标记的转基因食用菌研究进展 被引量:15 2007年 在食用菌外源基因转化过程中,目的基因的导入常需要串联易于识别的选择标记基因,用于转化子的筛选。当筛选完成后,选择标记基因特别是抗性标记基因的存在即是多余的,甚至是有害的,存在生物安全隐患。有鉴于此,本文对获得安全选择标记基因的转基因食用菌作一综述。 赵姝娴 林俊芳 王杰 郭丽琼关键词:选择标记基因 生物安全性 草菇基因工程育种研究 本研究采用基因工程技术,从多种食用菌中克隆了gpd启动子,从异源生物中克隆了目的基因抗冷冻蛋白基因(afp)和多功能纤维素酶基因(mfc),采用多种转化方法把afp基因和mfc基因导入草菇细胞中,有目的地改良现有草菇菌株... 林俊芳 郭丽琼 王杰 赵风云 张凯关键词:草菇 基因工程 启动子 文献传递 灵芝TR6号漆酶的分离纯化及性质研究 被引量:10 2008年 采用硫酸铵盐析、DEAE Sepharose Fast Flow柱层析和Sephadex G100凝胶柱层析对灵芝TR6号漆酶发酵液进行分离纯化,得到电泳纯漆酶.SDS-PAGE电泳结果显示,该漆酶表观分子量为62×10^3.Native-PAGE鉴定该漆酶由一种同工酶组成,为单体酶.试验结果表明,该漆酶的最适反应温度为60℃,与ABTS的最适反应pH为4.5,Km为0.188mmol/L,在pH6.0~8.0之间较稳定.Fe^2+、SDS和Tris对该漆酶活性具有抑制作用,EDTA和Tween80则对该漆酶活性具有促进作用. 韩君莉 郭丽琼 郑晓冰 周伟坚 林俊芳关键词:灵芝 漆酶 纯化 酶活 大杯伞华农2号菌株液体培养产生漆酶条件的研究 被引量:5 2006年 大杯伞(Clitocybe maxima)华农2号菌株具有分泌漆酶的能力,与静止培养相比,以110 r/min摇床培养能明显促进大杯伞华农2号菌株漆酶的分泌。以25 g/L可溶性淀粉为碳源,2.0 g/L酪蛋白胨为氮源,铜离子添加量为0.1 mmol/L进行液体培养,有利于大杯伞华农2号菌株漆酶的分泌,最高酶活可达到713 U/L。 韩君莉 郭丽琼 周伟坚 林俊芳 柳晔关键词:大杯伞 漆酶 液体发酵