宁夏回族自治区自然科学基金(NZ13137)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：王志军卢冠军丁娟更多>>
- 相关机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 波形蛋白基因转染增强SW780人膀胱癌细胞的侵袭力被引量：1
- 2014年
- 目的构建人波形蛋白(vimentin)基因的真核表达载体,转染SW780人膀胱癌细胞,检测vimentin上调对SW780细胞侵袭能力的影响。方法 PCR扩增人vimentin基因的cDNA序列,将其插入pcDNA3.1真核表达载体中,酶切鉴定并测序验证重组质粒pcDNA3.1-vimentin后,转染人膀胱癌SW780细胞。Western blot法检测vimentin及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达,明胶酶谱分析MMP-9活性,TranswellTM实验检测vimentin对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。结果酶切鉴定有预期目的片段,测序证实重组质粒pcDNA3.1-vimentin构建成功。Western blot法检测提示pcDNA3.1-vimentin转染SW780细胞后,vimentin与MMP-9表达水平均上调。明胶酶谱表明vimentin能够显著促进SW780细胞MMP-9的分泌。TranswellTM实验提示vimentin能显著增强SW780细胞的侵袭转移能力。结论成功构建了pcDNA3.1-vimentin真核表达载体并将其成功转染膀胱癌SW780细胞。Vimentin上调能够增强SW780细胞的侵袭能力,可能与上调MMP-9的表达及促进MMP-9分泌有关。
- 卢冠军丁娟王志军
- 关键词：波形蛋白膀胱癌细胞
