国家自然科学基金(30670720)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：汤建光肖涵胡治平唐北沙谭洁琼更多>>
- 相关机构：中南大学中南大学湘雅二医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛋白质磷酸化修饰在多聚谷氨酰胺疾病中的研究进展被引量：1
- 2008年
- 多聚谷氨酰胺（polyglutamine，polyQ）疾病是一大组常见的神经退行性疾病，疾病的发生源于致病基因编码区CAG三核苷酸重复扩展突变导致基因的编码蛋白——polyQ蛋白产生多聚谷氨酰胺扩展突变。polyQ疾病的发病机制目前虽然尚未得到完全阐明，但越来越多的研究表明蛋白质的磷酸化修饰在亨廷顿舞蹈病、齿状核红核苍白球路易氏体萎缩症、延髓脊肌萎缩症、遗传性脊髓小脑型共济失调1型、遗传性脊髓小脑型共济失调3型／马查多一约瑟夫病等疾病的发生发展中发挥了重要的作用。
- 周亚芳江泓汤建光唐北沙
- 关键词：蛋白质磷酸化
- 自吞噬途径参与降解多聚谷氨酰胺扩展突变型ataxin-3被引量：2
- 2010年
- 目的探讨自吞噬途径（autophagy）在脊髓小脑型共济失调3型或称马查多-约瑟夫病（spinocerebellar ataxia3／Machado—Joseph disease，SCA3／MJD）发病机制中的作用。方法将CAG拷贝数68次的ataxin-3真核表达载体pcDNA3．1-Myc-His（B）-MJD68Q在HEK293细胞中表达，采用特异性自吞噬途径抑制剂及激活剂处理细胞后，检测细胞中ataxin-3-68Q的表达水平。结果抑制自吞噬途径水平，细胞内ataxin-3—68Q表达明显增加，细胞活性降低；反之亦然。结论自吞噬途径参与降解细胞内多聚谷氨酰胺扩展突变型ataxin-3，减少胞内聚合物的形成，从而减轻细胞毒性。因此，提高机体自吞噬途径水平有望作为治疗SCA3／MJD的新方法。
- 肖涵汤建光胡治平谭洁琼唐北沙蒋正
- 关键词：ATAXIN-3降解
- Ataxin-3的亚细胞定位及其对细胞器形态的影响被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨ataxin-3蛋白的亚细胞定位及其多聚谷氨酰胺（polyglutamine,polyQ）扩展突变对线粒体、高尔基体和内质网形态的影响.方法 采用瞬时转染法构建表达野生型和突变型ataxin-3蛋白的细胞模型,用间接免疫荧光法识别细胞器膜的标记蛋白,在激光共聚焦显微镜下观察.结果 ataxin-3与TOM20无共定位,但突变组线粒体碎裂细胞百分比增加（P＜0.05）;ataxin-3与GM130无共定位且突变组无高尔基体碎裂;ataxin-3与calnexin部分共定位,突变组重叠信号较多且大多位于聚集体所在处.结论 polyQ扩展型ataxin-3蛋白可能间接损害线粒体完整性但并不影响高尔基体的结构和功能,而内质网可能是扩展型ataxin-3蛋白在细胞核外发挥毒性作用的场所.
- 魏飞飞肖涵胡治平张海南王春喻戴和平汤建光
- 关键词：多聚谷氨酰胺高尔基体内质网
- Ataxin-3融合蛋白表达、纯化及抗血清的制备
- 2009年
- 目的:表达GST-ataxin-3-N融合蛋白并制备GST-ataxin-3特异性抗体,为深入研究其功能及其在SCA3发病机制中的作用提供重要的技术和材料保障。方法:将人ataxin-3氨基端基因克隆入原核表达载体pGEX-4T-2,在大肠杆菌(E.coli)BL21中表达,用Glutathione sepharose 4B凝胶亲和柱纯化目的蛋白。利用纯化的GST-ataxin-3-N蛋白制备多克隆抗体。结果:成功构建了原核表达载体,得到高表达量的融合蛋白,经亲和层析柱纯化获得较高纯度的GST-ataxin-3-N融合蛋白。以融合蛋白免疫新西兰兔得到Ataxin-3-N多克隆抗体,Western Blotting及免疫荧光均证实该抗体能够识别Ataxin-3-myc蛋白,具有较高特异性。结论:利用原核表达人GST-ataxin-3-N融合蛋白制备的Ataxin-3多克隆抗体具有较好的特异性,可用于该蛋白的相关研究。
- 肖涵胡治平汤建光谭洁琼
- 关键词：ATAXIN-3融合蛋白多克隆抗体
