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转染﹀G基因HHCC细胞在裸鼠体内的转移特性被引量：1: 2000年; 目的　利用转染 βG基因的 HHCC细胞构建裸鼠转移模型 .方法　将 HHCC细胞和转染 βG基因 HHCC细胞体外培养 ,观察细胞形态结构 ,流式细胞仪测定细胞周期 ,并采用裸鼠脾脏种植法对转βG基因 HHCC细胞的转移特性进行研究 .接种后 6 0 d,收集转移灶 ,常规制备光镜片 ,HE染色 .结果　转染βG基因 HHCC细胞内多见颗粒性物质 ,微绒毛及突起增多 ,溶酶体增多 ,内质网及核糖体丰富 ,糖元颗粒堆积 ,某些细胞出现变性、坏死 .转 βG基因 HHCC和 HHCC相比较 ,其细胞周期发生明显改变 ,S期细胞增多 (P<0 .0 5 ) ,G2期细胞减少 (P<0 .0 5 ) ;裸鼠脾脏种植后 6 0 d,发现实验组出现广泛转移在肝、肾、肠系膜淋巴结的肉眼可见的转移灶 ,而对照组仅出现肝内播散 .结论　转染βG基因可增强; 金昌德施新猷仇凯李六金; 关键词：肝癌细胞株 HHCC 肿瘤转移

肝癌细胞内逆转录病毒介导β-葡萄糖醛酸苷酶基因的表达被引量：2: 2000年; 目的　建立高表达 β-葡萄糖醛酸苷酶 (β- Glu)的肝癌细胞株 .方法　采用脂质体介导法 ,将重组逆转录病毒表达载体 p DOR- βG转染肝癌细胞 ,G418筛选出阳性克隆 ,用免疫组化法、酶组织化学法、原位杂交法及酶活性测定等方法观察 β-Glu表达情况 .结果　共获得 4株转染阳性克隆 ,其中 F1,H4为 β- Glu高表达克隆 .免疫组化法发现转染细胞 β- Glu免疫阳性物质主要分布于胞质及胞核内 ,酶组织化学法观察转染细胞酶活性产物主要集中于胞质中 ,且转染细胞较非转染细胞呈色深 .原位杂交法观察阳性杂交信号于胞质及胞核 ,甚至核仁中 ,且在转染细胞中杂交信号增强 .结论　通过转入人β-Glu基因可以建立 β- Glu肝癌高表达模型 .该模型的建立 ,既可用于观察β- Glu前体药物的基因治疗效果 ,也能观察β-; 仇凯陈志南刘彦仿曲萍金晶胡沛臻朱晓慧徐力青; 关键词：肝细胞癌前体药物

RP-HPLC制备葡萄糖醛酸苷酶前体药葡萄糖醛酸化表阿霉素及其代谢物被引量：5: 2000年; 目的　制备可被β-葡萄糖醛酸苷酶 (βG)水解活化的表阿霉素 (Epirubicin,Epi)及其代谢物 .方法　 Epi代谢物(Epi治疗患者的尿液 )经 C1 8树脂初提富集并减压蒸溜浓缩后 ,用反相高效液相色谱法 (RP- HPL C)分离纯化代谢物组分 ,用 MTT法分析 βG对代谢物组分的激活杀伤作用 .结果　经 RP- HPL C洗脱分离 ,共得到 6个组分 (峰～峰 ) ,外标法证实第 6组分 (峰 )为 Epi.细胞毒实验证实第 1组分(峰 )至第 4组分 (峰 )均有βG激活杀伤作用 .结论　 Epi代谢物第 1至第 4组分均可作为 βG的前体药物 .; 仇凯张立红金晶陈志南刘智广刘彦仿; 关键词：表阿霉素前体药 RP-HPLC

转染βG基因HHCC细胞裸鼠转移模型的转移特性改变机理研究: 2001年; 采用脾种植法复制裸鼠肝癌模型 ,待 6 0d转移灶形成后分别取肝、肾、肠系膜淋巴结等 ,以常规方法制成组织切片 ,ABC免疫组化染色 ,同时用人肝癌细胞株 (HHCC)作对照。结果 ,试验组 30例标本中 β 葡萄糖苷酸酶 (βG)表达阳性率达 10 0 % ,PCNA指数阳性率为 96 .7% ,nm 2 3表达阳性率高达 13 .3 % ;而对照组 30例标本中 βG表达阳性率为3 .3 % ;PC NA指数阳性率为 33 .6 % ;nm 2 3表达阳性率高达 10 0 %。试验数据经统计学处理 ,具有显著性差异 (P <0 .0 1)。表明 βG改变PCNA、nm 2 3等肿瘤相关因素在体内的表达是肝癌细胞转移能力增强的原因之一。; 金昌德施新猷李六金仇凯; 关键词：人肝癌细胞株裸鼠免疫组化

转染βG基因HHCC细胞的裸鼠转移模型的复制被引量：3: 2000年; 将人肝癌细胞株 (HHCC)细胞和转染 β 葡萄糖苷酸酶 ( βG)基因HHCC细胞体外培养 ,观察细胞形态结构 ,用流式细胞仪测定细胞周期 ,并采用裸鼠脾种植法研究转 βG基因HHCC细胞的转移特性 ;接种后 60d收集转移灶 ,常规制片 ,HE染色镜检。结果 ,转染 βG基因HHCC细胞内多见颗粒性物质 ,微绒毛及突起增多 ,溶酶体增多 ,内质网及核糖体丰富 ,糖元颗粒堆积 ,某些细胞出现变性、坏死。转染 βG基因HHCC和HHCC相比较 ,其细胞周期发生明显改变 ,S期细胞增多 (P <0 .0 5 ) ,G2 期细胞减少 (P <0 .0 5 ) ;裸鼠脾种植后 60d ,发现试验组出现广泛转移 ,在肝、肾、肠系膜淋巴结肉眼可见转移灶 ,而对照组仅在肝细胞中有个别散在的瘤细胞。试验结果表明 ,转染 βG基因可增强HHCC细胞在裸鼠体内的转移能力。; 金昌德施新猷仇凯; 关键词：人肝癌细胞株裸鼠肿瘤转移动物模型

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国家自然科学基金(39580024)