山东省科技攻关计划(J05K06)
- 作品数：5 被引量：20H指数：3
- 相关作者：潘庆杰沈伟李兰邓继先李晓林更多>>
- 相关机构：莱阳农学院军事医学科学院黑龙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划国家高技术研究发展计划博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 精子介导GFP基因在小鼠早期胚胎中的表达被引量：4
- 2007年
- 利用DIG末端标记技术和免疫组化技术分析了小鼠精子体外结合内化外源DNA的效率。试验结果表明,不同小鼠个体的精子结合外源DNA的阳性率有明显差异(P<0.01),平均为13%。利用考马斯亮蓝染色评价了小鼠精子顶体反应发生的情况,筛选出TYH培养液为较合适的体外受精液。利用小鼠体外受精技术,将体外转染GFP基因并获能的小鼠精子与成熟卵母细胞进行体外受精,受精卵进行体外培养,表达GFP胚胎的阳性率为4.7%。验证了精子介导制备转基因小鼠胚胎的可行性,并建立了利用精子载体法制备转基因小鼠胚胎的平台。
- 董焕声房勇卫李兰李晓林孙理兰翟向玮潘庆杰沈伟
- 关键词：转基因动物体外受精
- 外源基因转染导致山羊体细胞过快衰老与端粒缩短的研究被引量：3
- 2006年
- 在对山羊体细胞进行外源基因转染过程中,无论电击法或脂质体法所得到的细胞克隆都有细胞过快衰老的现象。山羊体细胞经基因转移后出现细胞体积增大、细胞核膨大并逐步分裂成多核、细胞质空泡化和吐核等衰老的表型特征。转基因后衰老细胞的染色体核型正常,但经Southern检测发现,转基因衰老细胞比原代胎儿成纤维细胞染色体端粒长度减少了2.56kb,超出了正常传代40代的细胞的衰老速度,然而转基因衰老细胞仍能支持核移植克隆胚胎的早期发育。
- 李兰潘庆玉沈伟潘庆杰周艳荣邓继先
- 关键词：细胞衰老端粒核移植山羊
- 整合人lactoferrin基因的山羊体细胞支持核移植克隆胚的体外发育被引量：3
- 2006年
- 克隆了人lactoferrin基因和山羊β-casein基因5′端调控区,构建了人lactoferrin的乳腺表达载体,并将该载体利用脂质体介导转染了奶山羊胎儿成纤维细胞,获得了稳定整合人lactoferrin基因的转基因体细胞克隆17个,其中PCR和SouthernBlot检测阳性的细胞克隆14个,阳性率82.4%。以转基因体细胞为供体细胞进行了核移植,获得了能够体外发育的山羊转基因克隆胚胎,体内成熟卵母细胞来源的核移植囊胚率为64.8%,体外成熟卵母细胞来源的核移植囊胚率为51.7%,证明了山羊转基因体细胞能够支持克隆胚的进一步发育。
- 李兰沈伟潘庆玉闵令江孙玉江房勇为邓继先潘庆杰
- 关键词：核移植山羊乳腺生物反应器
- 群体遗传不平衡条件下的遗传共适应现象及其遗传分析被引量：9
- 2007年
- 群体基因库的遗传共适应特性是在系统演化过程中逐渐形成的,和各基因位点的基因频率一样,是基因库属性的一个方面。利用群体遗传不平衡状态下的中性基因位点组合的遗传共适应特性,能揭示群体的起源进化和系统地位;通过对遗传共适应的认识,可提高经济性状标记的准确性。文章对遗传共适应的概念、产生的基础和过程,以及研究现状进行了探讨和分析。
- 潘庆杰李晓林闵令江沈伟刘娣
- 关键词：遗传共适应基因
- 外源基因转染导致小鼠体细胞过快衰老及p16^(INK4a)表达水平变化被引量：1
- 2006年
- 对小鼠胎儿成纤维细胞进行外源基因转染时发现,外源基因转染后的小鼠体细胞染色体端粒的长度以每代47 bp碱基缩短;在转染后的衰老细胞中,或细胞随着增龄,p16INK4 5’-调控区DNA甲基化程度逐渐降低;利用RT-PCR与Northern blot证明,衰老细胞与年轻细胞中的p16INK4a基因的表达水平存在显著差异,传代45代的细胞和外源基因转染后的衰老细胞p16INK4a基因的表达水平大约是原代细胞的12～16倍,而原代细胞与20代细胞间的差异很小。外源基因转染后的衰老细胞核移植后能支持克隆胚胎的体外早期发育。
- 沈伟李兰吴晓洁周艳荣潘庆杰陈宏邓继先
- 关键词：小鼠转基因细胞衰老
