国家自然科学基金(30370073)
- 作品数：11 被引量：311H指数：9
- 相关作者：俞云松周华陈亚岗李兰娟潘韵峰更多>>
- 相关机构：浙江大学医学院附属第一医院杭州市第一人民医院北京医院更多>>
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- 导致高水平氨基糖苷类抗生素耐药的新型16SrRNA甲基化酶研究进展被引量：32
- 2007年
- 氨基糖苷类抗生素通过与细菌30S核糖体的16S rRNA亚单位结合，导致读码错误，干扰蛋白合成从而阻止细菌生长。氨基糖苷类抗生素作为一类高效、广谱的抗生素，因其具有浓度依赖性的快速杀菌、可与细胞壁活性抗菌药物产生协同作用的特点，一直是临床上治疗革兰阴性菌所致严重感染的重要药物。但是随着该类药物在临床上的广泛应用，
- 潘韵峰周华俞云松
- 关键词：抗生素耐药甲基化酶RRNA氨基糖苷类抗生素细菌生长
- 亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶研究被引量：52
- 2006年
- 目的明确我院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因型。方法收集我院2003年8月-2004年12月分离的95株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法和E试验法测定15种抗菌药物的MIC值；脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性；PCR扩增及克隆测序分析碳青霉烯酶基因型；接合试验、质粒抽提及Southern杂交完成亚胺培南耐药基因定位。结果95株鲍曼不动杆菌对氨苄西林-舒巴坦、头孢哌酮-舒巴坦两个含舒巴坦制剂耐药率分别为67．9%、30．2%,对多黏菌素E耐药率最低,为17%,对其他抗菌药物的耐药率均在90%以上。95株鲍曼不动杆菌分离自10个临床科室,均产OXA-23碳青霉烯酶,PFGE分型共分为6型,以A、B型为主。碱裂解法反复抽提均未得到质粒,多次接合试验未成功。Southern杂交证实A、B克隆的oxa-23耐药基因位于细菌染色体约220 kb、200 kb大小的Apal酶切片段上。结论产OXA-23型碳青霉烯酶鲍曼不动杆菌已成为我院医院感染的重要病原菌,在我院多个科室播散,且以A、B克隆为主。oxa-23耐药基因位于染色体上。
- 杜小幸张幸国周华俞云松陈亚岗李兰娟
- 关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶脉冲场凝胶电泳
- 多重耐药铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶耐药机制研究被引量：86
- 2005年
- 目的对多重耐药铜绿假单胞菌所产β内酰胺酶(ESBLs)进行分析。方法采用KB法进行药物敏感试验,筛选多重耐药铜绿假单胞菌;再进行改良三维试验,对多重耐药菌所产β内酰胺酶进行分析。结果在66株多重耐药铜绿假单胞菌中产ESBLs有15株(22.7%),26株高产AmpCβ内酰胺酶(39.4%),14株为SSBLs(21.2%),有43株菌(65.2%)显示碳青酶烯酶活性。结论产ESBLs、高产AmpCβ内酰胺酶和(或)
- 许宏涛陈东科俞云松张秀珍
- 关键词：多重耐药铜绿假单胞菌Β-内酰胺酶
- 重症监护病房产VIM-2型金属酶绿脓假单胞菌的研究被引量：42
- 2004年
- 目的 分析重症监护病房产金属 β内酰胺酶绿脓假单胞菌的同源性、金属酶基因型及转移机制。方法 用 2 巯基丙酸协同试验筛选重症监护病房分离的对亚胺培南耐药的绿脓假单胞菌中的产金属酶株 ,聚合酶链反应 (PCR)、克隆测序确定耐药基因 ,整合子PCR扩增 ,脉冲场凝胶电脉分析同源性。结果 2 6株绿脓假单胞菌 2 巯基丙酸协同试验阳性 ,酶粗提液能水解亚胺培南 ,活性能被EDTA抑制。VIM型金属酶引物PCR扩增阳性 ,经克隆测序证实为VIM 2型金属酶。整合子可变区序列分析表明 ,blaVIM 2位于Ⅰ类整合子上 ,该基因上游含有 1个aacA4基因 ,下游为aadB基因。脉冲场凝胶电脉结果证实产酶株均来自同一克隆。结论 医院重症监护病房有产VIM 2型金属酶绿脓假单胞菌的流行 。
- 杨青魏泽庆俞云松钟步云陈亚岗李兰娟
- 关键词：重症监护病房绿脓假单胞菌整合子亚胺培南金属酶克隆测序
- 人苍白杆菌耐药性及AmpC酶研究被引量：22
- 2005年
- 目的分析人苍白杆菌的耐药性及AmpC酶。方法回顾性分析2001年至2003年我院分离到的83株人苍白杆菌耐药性,并对2004年2月保存的8株菌株,采用浓度梯度法测定12种抗菌药物的最低抑菌浓度,三维试验分析β内酰胺酶及PCR扩增耐药基因,脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)分析同源性。结果83株人苍白杆菌均来自肝移植患者的血液标本,对大多数β内酰胺类抗生素有很强的耐药性,但对喹喏酮类、碳青霉烯类和氨基糖苷类抗菌药物有较好的敏感性,敏感率均在80%以上。8株人苍白杆菌PFGE条带完全一致,来自同一克隆株,且均产AmpC酶,与OCH-4酶(CAC17624)同源性最高为99%。结论人苍白杆菌对大多数头孢菌素和青霉素类抗生素有很强的耐药性与其产AmpC酶有关。
- 周华凌丽燕杨青俞云松陈亚岗李兰娟郑树森
- 关键词：人苍白杆菌耐药性Β内酰胺类抗生素产AMPC酶青霉素类抗生素浓度梯度法
- 亚胺培南耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶基因型分布被引量：4
- 2006年
- 目的调查成都地区亚胺培南耐药铜绿假单胞菌氨基糖苷类抗生素耐药特点及氨基糖苷类修饰酶基因型。方法琼脂稀释法测定庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、奈替米星、异帕米星、卡那霉素6种抗生素对23株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度。PCR法检测氨基糖苷类修饰酶编码基因。结果卡那霉素、庆大霉素对23株铜绿假单胞菌MIC50、MIC90均为256 mg/L,耐药率分别为100%和91.3%。阿米卡星、异帕米星、妥布霉素及奈替米星的耐药率分别为56.6%、65.2%、69.6%和78.3%。23株铜绿假单胞菌检出4种修饰酶基因,其中aac(3)-Ⅱ基因型12株,aac(6′)-Ⅰ基因型11株,ant(2″)-Ⅰ基因型6株,ant(3″)-Ⅰ基因型9株;12株菌株同时存在2种或2种以上基因型,1株菌株同时具有4种基因型。结论成都地区亚胺培南耐药铜绿假单胞菌对氨基糖苷类抗生素耐药率高,主要有aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ和ant(3″)-Ⅰ四种氨基糖苷类修饰酶基因型。
- 杜鑫淼冯玉麟俞云松陈文昭周华
- 关键词：铜绿假单胞菌氨基糖苷类修饰酶耐药性
- 铜绿假单胞菌耐药性与产β内酰胺酶的关系被引量：24
- 2005年
- 目的分析临床分离的93株铜绿假单胞菌的耐药性与β内酰胺酶类型的关系。方法采用K B法测定亚胺培南等16种抗菌药物对93株铜绿假单胞菌的体外抗菌活性;采用等电聚焦电泳(isoelectricfocusing,IEF)、三维试验、2巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)分析β内酰胺酶类型。结果阿米卡星敏感性最高为82.8%,其次依次为头孢吡肟(81.7%)、头孢哌酮/舒巴坦(81.7%)、头孢他啶(80.6%)、美罗培南(77.4%)、亚胺培南(71.0%)。三维试验结果表明,14株(15.1%)产碳青霉烯酶,其中2株产金属酶;15株(16.1%)产AmpC酶,其中2株同时产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)。等电聚焦电泳显示产AmpC的细菌均具有9.0的条带;19号和54号菌株有一个6.3的条带。2巯基丙酸抑制试验筛选金属酶2株阳性,与三维试验结果相符。设计金属酶VIM2特异性引物,PCR反应结果阳性,经克隆测序证实为VIM2型金属酶。结论铜绿假单胞菌感染中产β内酰胺酶较常见,其中产碳青霉烯酶和AmpC酶占一定比率,是造成临床上铜绿假单胞菌对碳青霉烯类和头孢菌素第3、4代耐药的主要原因。
- 王杰周建英俞云松
- 关键词：耐药性超广谱Β内酰胺酶Β内酰胺酶类等电聚焦电泳产AMPC酶
- 亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性、碳青霉烯酶基因及其与ISAba1关系研究
- 目的明确我国6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的同源性、碳青霉烯酶基因型及其基因周围环境。方法收集我国25家医院2004年12月-2005年 12月临床分离的700株鲍曼不...
- 沈萍廖康周华周志慧卓超许宏涛陈佰义倪语星俞云松李兰娟
- 关键词：鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶
- 文献传递
- 亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌16S rRNA甲基化酶基因检测及流行菌株分析被引量：16
- 2008年
- 目的研究我国多中心亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌的耐药性、16SrRNA甲基化酶的阳性率及分子流行病学特征。方法收集2004年11月-2005年11月国内6省市19家医院临床分离的342株亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌。采用琼脂稀释法和Etest法对18种抗菌药物测定分离株的最低抑菌浓度（MIC）值；脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析菌株的同源性；PCR法筛选4种16SrRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB、rmtC，克隆测序明确基因型；接合试验、质粒抽提、电转化以及Southern blot确定甲基化酶耐药基因定位。结果所有菌株均为多重耐药株，其中对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、异帕米星、奈替米星耐药率分别为92．6％、98．6％、87．4％、90．9％和92．4％。PCR扩增、测序证实221株鲍曼不动杆菌检出甲基化酶armA基因；另3种甲基化酶基因rmtA、rmtB、rmtC均阴性。在上述342株鲍曼不动杆菌临床分离株中，298株可归类为6个流行克隆，44株为散发株。3个主要克隆（A、B、C）在全国广泛播散，分别在国内6家、3家、11家医院内流行。接合试验、质粒抽提、电转化及Southern blot表明armA编码基因存在于染色体上。结论亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的表型均为多重耐药。介导氨基糖苷类抗生素高度耐药的16SrRNA甲基化酶基因armA在鲍曼不动杆菌中广泛存在，其主要传播方式为克隆播散，这必将引起临床的高度关注。
- 潘韵峰俞云松周华董晓勤陈亚岗李兰娟
- 关键词：鲍曼不动杆菌氨基糖苷类抗生素耐药
- 16S rRNA甲基化酶基因在鲍曼不动杆菌中的分布被引量：22
- 2007年
- 目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的700株鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法测定其对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星5种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;PCR筛选三种甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB,克隆测序明确基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性;质粒抽提、接合试验及Southern杂交确定armA基因定位。结果对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星的耐药率分别为67.7%、70.9%、75.7%、63.5%和71.5%。对5种氨基糖苷类抗生素全部耐药的菌株有377株,其中334株检出armA基因;未发现rmtA、rmtB阳性菌株。armA基因阳性菌株PFGE分型以A、B、C为主。碱裂解法反复抽提未得到质粒,多次接合试验未成功;Southern杂交显示,armA基因分别位于克隆A、B、C菌株染色体ApaⅠ酶切PFGE约220、300、220kb大小的PFGE片段上。结论16S rRNA甲基化酶基因armA在鲍曼不动杆菌中广泛存在,armA基因位于鲍曼不动杆菌的染色体上。
- 潘韵峰周华周志慧俞云松陈亚岗李兰娟
- 关键词：抗菌药核糖体鲍氏不动杆菌脉冲场
