国家科技支撑计划(2006BAI06A12-04)
- 作品数：26 被引量：160H指数：8
- 相关作者：王喆之白成科马骥肖娅萍张晓静更多>>
- 相关机构：陕西师范大学教育部西北濒危药材资源开发国家工程实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划陕西省科学技术研究发展计划项目西安市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学医药卫生更多>>
- 不同采收时期荚果蕨营养叶中总黄酮含量测定被引量：5
- 2011年
- 目的:优化回流萃取、RP-HPLC检测荚果蕨中槲皮素、山奈酚含量的方法,比较不同采收时期荚果蕨营养叶中总黄酮含量,得出荚果蕨营养叶的最佳采收时期。方法:色谱条件:色谱柱Shimadzu C18(250×4.6mm,5μm);流动相为甲醇(A)-0.2%磷酸水(B);采用线性梯度洗脱;流速为1.0mL/min;柱温为30℃;检测波长为360nm;进样量20μL。结果:槲皮素在0.18～4.5μg(r2=0.9992),山奈酚在0.17～4.25μg(r2=0.9994)范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。加样回收率分别为99.6%、99.45%,RSD值为1.90%,0.91%(n=6)。结论:该方法操作简便,结果准确,重现性好,可用于荚果蕨的质量评价。9月份采收的荚果蕨营养叶中总黄酮含量最高,实验结果可用于指导合理采收开发荚果蕨资源。
- 刘百萍马骥张晓静张昊朱贞贞
- 关键词：荚果蕨总黄酮高效液相色谱法
- 氢化物发生-原子荧光法测定不同产地绞股蓝及其根际土壤中As,Hg,Se被引量：10
- 2012年
- 通过优化了的氢化物发生—原子荧光法测定了7个省产绞股蓝及其根际土壤中As,Hg,Se三种元素的含量,研究结果表明:7个省产绞股蓝中As,Hg,Se的含量存在较大差异,但As和Hg两种重金属元素含量均低于《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》中As和Hg的限量标准。Se元素含量同根际土壤中Se元素含量显示极显著相关性,故湖北恩施富硒区产绞股蓝中Se含量明显高于其他6省产绞股蓝。研究结果可以初步判定,绞股蓝中Se元素主要来源于土壤,而As和Hg元素的积累则不同于Se元素,还可能受到大气气溶胶的干、湿沉降等因素的影响。
- 王晶肖娅萍梁晓庆邵显会张珂
- 关键词：绞股蓝根际土壤湿法消解氢化物发生-原子荧光法
- 丹参COR413基因克隆及表达分析被引量：8
- 2010年
- 从丹参EST数据库筛选出一条与冷调节基因（cold-regulated gene,COR）家族同源性较高的基因序列,并利用PCR方法得到该基因的DNA序列,命名为SmCOR413.该基因DNA序列长1708 bp,包含4个外显子和3个内含子,编码171个氨基酸,与其他9种植物中的COR413高度相似,相似性介于66%~78%之间,推测为COR413基因家族的一个新基因.生物信息学分析表明,SmCOR413所编码蛋白的分子量为19.77 kD,理论等电点为8.95,不具备信号肽.实时定量PCR检测的结果显示,SmCOR413在丹参根、茎和叶中都有表达,在叶、茎中表达量较高,根部的表达量最低.
- 徐鹍王喆之
- 关键词：丹参实时定量PCR
- 糙苏提取物抑菌活性的初步评价被引量：1
- 2010年
- 目的:比较糙苏甲醇提取物和丙酮提取物的抗菌活性。方法:对糙苏的丙酮提取物和甲醇提取物进行体外抗菌活性实验,测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),比较相应的MIC和MBC值。结果:两种提取物对所选取的8种菌株均具有抑菌效果,丙酮提取物的抑菌活性高于甲醇提取物。巨大芽孢杆菌是对提取物最敏感的细菌。结论:糙苏提取物作为天然抗菌物质,具有广谱抗菌效果,具有较高的应用潜力和综合开发前景。
- 库里满·恰里甫武玉翠张璇王喆之
- 关键词：糙苏抑菌活性最低抑菌浓度最低杀菌浓度
- 丹参中硫堇基因SmTHI的克隆和表达分析
- 2009年
- 丹参EST序列的Blast分析表明,一条序列与硫堇(thionin,THI)基因有较高的同源性,该序列长575bp,包含1个长366bp的开放阅读框(ORF),编码121个氨基酸,命名为SmTHI,GenBank登陆号为DQ212984。在此基础上设计引物,分别从cDNA和gDNA水平上克隆到该基因的全编码区序列的结果表明,该基因无内含子。序列分析表明,该编码蛋白与大多数植物的THI蛋白前体高度同源,并符合植物硫堇类蛋白的序列模式和特征:C-C-X(5)-R-X(2)-[FY]-X(2)-C,N端具17个氨基酸的信号肽,中间46个氨基酸为成熟THI部分,C端的58个氨基酸为酸性多肽部分。成熟的THI蛋白带正电荷,偏碱性,推测可能有抗病原微生物活性。实时定量PCR检测SmTHI在丹参不同组织部位的表达以及在黄瓜细菌性角斑病菌(PSL)、NaCl和水杨酸(SA)溶液诱导下的表达结果表明:SmTHI在植物的根、茎和叶中均有不同程度的表达,其表达丰度为叶>茎>根;在PSL、NaCl和SA溶液诱导下该基因的表达呈上调趋势。
- 曹晓燕王喆之
- 关键词：丹参硫堇克隆实时定量PCR
- 秦岭产荚果蕨中总甾酮含量的测定被引量：3
- 2012年
- 研究了超声提取法提取3种荚果蕨属植物中总甾酮的最佳提取工艺。确定最优的提取工艺条件为:60%的乙醇,料液比1:40(g/mL),270W超声50min。比较了秦岭产荚果蕨属3种植物中总甾酮的含量,确定总甾酮含量最高的为荚果蕨,其次为中华荚果蕨和东方荚果蕨。对荚果蕨醇提物对DPPH自由基清除活性进行研究,结果显示其清除活性依次为根状茎>营养叶>BHT>孢子叶。
- 朱贞贞张晓静张昊马骥
- 关键词：超声提取法紫外分光光度法抗氧化活性
- 丹参木质素及其单体含量的测定被引量：6
- 2011年
- 本文建立了一种准确、快速的检测丹参中木质素及其单体含量的方法。采用Klason法和紫外分光光度法分别对丹参根和茎中酸不溶性木质素(Klason木质素)和酸溶性木质素含量进行了测定;运用硫代酸解法并结合气相色谱-质谱法(GC-MS)分别对丹参根和茎中各木质素单体组成进行了分析。结果显示,总木质素在丹参根和茎中的含量分别为280.7mg/g和160.4mg/g,其中Klason木质素含量分别为173.8mg/g和134.5mg/g;酸溶性木质素含量分别为106.9mg/g和25.9mg/g。H型、G型和S型木质素单体在丹参根中的含量分别为14.4μmol/g、2 070.2μmol/g、1 886.4μmol/g,在丹参茎中的含量分别为15.3μmol/g、212.8μmol/g、50.6μmol/g。利用本研究建立的方法可以准确、快速的检测丹参中各类木质素及其单体的含量,此方法可为其它药用植物木质素类化合物的定性、定量分析提供借鉴。
- 宋银武玉翠张媛王喆之
- 关键词：丹参木质素
- 黄芩种质资源ISSR遗传多样性的分析及评价被引量：19
- 2012年
- 采用ISSR分子标记技术对6个野生或栽培居群共147份黄芩种质进行遗传多样性分析和评价。分析结果表明,51个ISSR引物中筛选出18条扩增条带清晰、重复性好和多态性高的引物,共扩增出485条清晰的条带,其中466条具有多态性,平均多态性位点比率为96.08%,平均Nei’s基因多样性指数和Shannon’s信息指数分别为0.244 4和0.388 9,等位基因数(Na)和有效等位基因数(Ne)分别为1.993 8和1.383 9,遗传分化指数Gst=0.122 3,遗传一致度(I)和遗传距离(D)分别为0.951 5和0.050 1,说明收集的黄芩种质资源在总体上具有较高的遗传多样性,不同居群间存在一定的遗传分化和基因交流,遗传变异主要存在于居群内。分子聚类结果表明,同一地区的种质并没有按照收集来源完全聚类,可能与种质不同起源或民间栽培引种有关。在DNA分子水平揭示黄芩种质资源的遗传多样性水平,将为进一步黄芩种质资源评价、保存和新品种选育等利用提供依据。
- 文苗苗李桂双张龙进郑鹏白成科
- 关键词：黄芩种质资源ISSR聚类分析
- 基于ISSR分子标记技术构建黄芩核心种质的方法研究被引量：10
- 2010年
- 目的：构建黄芩核心种质。方法：采用ISSR标记技术对不同来源地的40份黄芩种质资源的遗传多样性进行了分析,并依据最小遗传距离逐步抽样法构建了核心种质资源。结果：筛选出的15个多态性引物共扩增出248个位点,多态性位点比率达97.17%,平均Shannon信息指数（I）为0.4353,平均Nei′s基因多样性指数（H）为0.2819,等位基因数（NA）为1.9640,平均有效等位基因数（NE）为1.4617,表现出高的遗传多样性。聚类分析中种质间的遗传相似系数介于0.64~0.80之间,除个别种质外,40个种质聚类结果与地区来源有较高的一致性。随着抽取种质数目的减少,多态性比率降低明显,但核心种质的遗传多样性参数变化较小,Nei′s遗传多样指数和Shan-non′s信息指数还有所增加;抽样3构建的核心种质最具代表性,抽样数是抽样前的30%左右,多态位点比率是抽样前的96.8%,Nei′s遗传多样指数和Shannon′s信息指数等参数还有所增加。结论：基于ISSR分子标记技术构建黄芩核心种质的方法是可行的,可以作为进一步构建黄芩核心种质库的方法。
- 白成科文苗苗于凤李桂双
- 关键词：黄芩ISSR核心种质
- 丹参中病程相关蛋白基因SmSTH-2的生物信息学分析被引量：3
- 2007年
- 对丹参cDNA文库的表达序列标签(EST)序列进行BLAST分析显示,其中一条序列与病程相关蛋白基因STH-2有较高的同源性。该序列全长691bp,包含1个长483bp的开放阅读框(ORF),编码160个氨基酸,命名为SmSTH-2。生物信息学分析显示:SmSTH-2所编码蛋白的分子质量为17990Da,等电点为5.15,富含谷氨酸、赖氨酸、甘氨酸、丝氨酸,无信号肽,属于稳定类蛋白。与NCBI注册的其他6种植物来源的病程相关蛋白基因编码的氨基酸序列的同源性在42%～46%之间。实时荧光定量PCR的方法检测丹参不同组织部位中SmSTH-2表达和病原菌对该基因诱导表达的影响的结果表明:SmSTH-2在植物的根、茎、叶中均有不同程度的表达,其表达丰度为根>叶>茎;丹参叶片接种黄瓜细菌性角斑病病原菌后,4d内可诱导该基因的表达量持续增加。用PCR方法从基因组水平克隆到SmSTH-2的DNA序列,测序表明SmSTH-2的编码序列在DNA水平上含有一个71bp的内含子,DNA序列注册号为EF621486.
- 曹晓燕刘丛玲王喆之
- 关键词：病程相关蛋白丹参实时荧光定量PCR生物信息学
