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河北省普通高等学校强势特色学科基金(2006-2011)

作品数:2 被引量:15H指数:1
相关作者:单保恩艾军李巧霞白引苗张超更多>>
相关机构:河北医科大学第四医院更多>>
发文基金:河北省普通高等学校强势特色学科基金河北省科技厅科技攻关项目河北省科学技术研究与发展计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇真核表达载体
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学特性
  • 1篇转染
  • 1篇细胞
  • 1篇宫颈
  • 1篇宫颈癌
  • 1篇荷瘤
  • 1篇荷瘤鼠
  • 1篇核表达
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇SHRNA真...
  • 1篇CIK细胞

机构

  • 2篇河北医科大学...

作者

  • 2篇李巧霞
  • 2篇艾军
  • 2篇单保恩
  • 1篇高玉环
  • 1篇杨红霞
  • 1篇张超
  • 1篇白引苗

传媒

  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇癌变.畸变....

年份

  • 2篇2010
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
CIK细胞的生物学特性及荷瘤鼠体内分布特点研究被引量:14
2010年
目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)在荷瘤鼠体内的分布规律。方法:用MTT比色法测定CIK细胞对Hela-luc细胞的杀伤作用。以人宫颈癌细胞Hela-luc接种BALB/c裸鼠建立动物模型。体外培养CIK细胞后以荧光染料CFSE标记,经不同途径注射入荷瘤鼠体内。用激光共聚焦显微镜和流式细胞技术检测方法分析CIK细胞在各器官的分布情况。结果:CIK细胞在体外培养14~18天时,细胞数量生长达高峰,此时CD3+CD56+T细胞的数量也达最高值。以10∶1、20∶1、40∶1的比例将效、靶细胞作用48小时后,CIK细胞对Hela-luc细胞的杀伤率分别为(24.08±3.18)%、(51.16±2.64)%、(72.14±4.21)%。CIK细胞经腹腔注射,肿瘤组织24小时达到最高(20.56%),瘤旁注射,肿瘤组织3小时达到最高(25.75%)。结论:CIK细胞在体外对宫颈癌Hela-luc细胞有较强的杀伤作用。CIK细胞在体内分布于肺、肝、肿瘤部位,其分布在各脏器中浓度规律与不同的输注途径有一定关系。针对不同解剖部位的肿瘤可以选择不同的CIK细胞输注途径以最大限度地提高疗效。
艾军白引苗张超高玉环李巧霞单保恩
关键词:CIK细胞生物学特性宫颈癌
CtBP1基因shRNA真核表达载体的构建及其干扰效果的初步鉴定被引量:1
2010年
目的:构建C-末端结合蛋白-1(CtBP1)基因RNA干扰(RNAi)的真核表达载体,转染人子宫内膜癌耐药细胞株B-MD-C1(ADR+/+),初步鉴定其干扰效果。方法:以人CtBP1基因为靶基因,以pGenesil-1质粒为载体,根据GenBank数据库提供的CtBP1基因核苷酸序列,选择设计两条siRNA干扰序列,将带9个碱基茎环结构的干扰序列插入带有绿色荧光蛋白(EGFP)基因、卡那霉素(Kanr)抗性基因及U6启动子的真核表达载体pGenesil-1中,构建针对CtBP1基因的shRNA真核表达载体,转化大肠杆菌DH5α菌株,提取质粒,进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。确认载体构建成功后,用脂质体LipofectamineTM2000将重组质粒瞬时转染人子宫内膜癌耐药细胞株B-MD-C1(ADR+/+),在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,计数转染细胞数,计算转染效率,RT-PCR法检测载体对CtBP1基因的表达抑制效果。结果:构建针对CtBP1基因的pGenesil-1-CtBP1小发夹RNA(pGenesil-1-CtBP1-shRNA),经限制性内切酶酶切、PCR和DNA测序证实与设计完全一致;在荧光显微镜下观察到B-MD-C1(ADR+/+)细胞表达绿色荧光蛋白(EGFP),证实重组质粒己转染入细胞,转染效率达到60%-70%;RT-PCR结果显示B-MD-C1(ADR+/+)细胞中CtBP1基因被特异抑制,基因表达抑制率达40%以上,与转染试剂对照组、空白对照组和阴性序列对照组间的差异均具有统计学意义(P均〈0.05)。结论:成功构建CtBP1基因的shRNA表达载体,可以有效抑制B-MD-C1(ADR+/+)细胞上CtBP1基因表达。为进一步研究CtBP1基因功能进而逆转肿瘤的多药耐药奠定基础。
杨红霞艾军李巧霞单保恩
关键词:RNA干扰真核表达载体转染
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