国家肉鸡产业技术体系建设专项(nycytx-42-G3-03)
- 作品数：24 被引量：68H指数：5
- 相关作者：廖明焦培荣罗开健亓文宝曹伟胜更多>>
- 相关机构：华南农业大学山东省农业科学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- J亚群禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2013年
- 本研究利用J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus,ALV-J)gp85单因子血清纯化后的抗体成功建立了检测ALV-J抗原的双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)。结果表明,该方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,对ALV-J抗原的最小检出量为0.165μg/mL。用该法对48份临床血浆样品进行检测,结果与PCR方法的符合率达到85.2%。
- 廖亚琳梁艺瑜王秀珑冯敏谭利强曹伟胜
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 一株H5N2亚型鹦鹉源禽流感病毒分子进化分析被引量：1
- 2010年
- 2005年在广东进行流行病学调查时分离到一株鹦鹉源禽流感病毒,经鉴定为H5N2亚型禽流感病毒(A/Parrot/Guangdong/268/2005)。该毒株的HA裂解位点附近的氨基酸序列为RETRGLF,只含有一个碱性氨基酸,符合低致病性禽流感病毒的HA裂解位点附近氨基酸序列的分子特征;与H5N2亚型禽流感代表毒株相比,该毒株HA和NA基因的糖基化位点、HA基因的受体结合位点编码区、NA基因的耐药性位点均未发生变异。将该毒株全基因组序列与GenBank已公布的19株H5N2亚型禽流感病毒株的相应序列进行比较分析并绘制系统进化树后发现:其与低致病性禽流感毒株A/Pheasant/NJ/1355/1998(H5N2)-like的亲缘关系最近,位于以A/Chicken/Pennsylvania/1/1983(H5N2)为代表的美洲进化分支。
- 单芬韦良孟韦艳梅徐成刚罗开健任涛辛朝安焦培荣廖明
- 关键词：禽流感H5N2亚型鹦鹉分子进化分析
- 鸡干扰素调节因子7的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：3
- 2013年
- 为表达鸡干扰素调节因子7蛋白并制备其多克隆抗体,通过RT-PCR技术扩增chIRF7基因的编码序列,构建重组质粒PET30a-chIRF7。将重组质粒转化至大肠埃希菌(E.coil)BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白rchIRF7分子量约为60ku。将纯化的重组蛋白免疫接种小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA测定血清抗体滴度在1∶51 200以上,IFA检测结果显示制备的鼠抗chIRF7蛋白多抗能够与AIV刺激的CEF细胞内的chIRF7蛋白发生特异性反应,表明通过原核表达系统表达的重组蛋白rchIRF7具有很好的免疫原性,以其制备的鼠抗chIRF7蛋白多克隆抗体滴度高、特异性好。
- 崔鹏飞邓国华韦良孟焦培荣廖明
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 三株H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列分析被引量：5
- 2012年
- 采用RT-PCR对3株H9N2亚型禽流感病毒基因组进行扩增,测序后再利用DNAStar和MEGA 4对所得到的序列和部分具有代表性的参考序列进行遗传演化及分子特点分析,旨在从分子水平探讨华南地区H9N2亚型禽流感病毒的流行特点,为该病的综合防控提供依据。结果表明,3个分离株CK/GD/162/03、Francolin/GD/298/05与CK/GD/A8/10分别属于B34、B47和B54基因型;3个分离株HA基因未发生明显的变异,符合我国大陆H9N2亚型AIV HA基因的遗传进化特点,但内部基因出现不同程度重组且部分基因与人源高致病性H5N1亚型AIV同源性很高;CK/GD/162/03、Francolin/GD/298/05两株分离株具有宿主多样性。因此,对华南地区H9N2亚型AIV进行监控及分子流行病学调查具有重要意义。
- 刘国乾曹蓝和君冯军祥张长辉田进焦培荣亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型基因重组
- 当前我国几种危害严重禽病的流行情况总结及趋势分析被引量：2
- 2010年
- 对于中国家禽养殖业来说，虽然受到金融危机的影响，市场价格波动较大，部分地区的家禽养殖规模有所萎缩，但整体发展态势保持了健康、平稳的特点。家禽产品供应量充足，质量安全水平较高。现对我国2009年常见禽病流行情况进行简要回顾，并对2010年的禽病流行趋势进行预测分析。
- 徐成刚曹伟胜罗开健樊惠英廖明任涛
- 关键词：禽病家禽养殖业金融危机价格波动养殖规模家禽产品
- 一株H5N2亚型鹦鹉源禽流感病毒分子进化分析
- 前言:禽流感(Avian influenza,AI)是由正黏病毒科流感病毒属A型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)引起的禽类感染或疾病综合征。历史上在禽类中曾经出现过3次H5N2亚型禽流感大...
- 单芬郑煦灿韦良孟徐成刚罗开健任涛辛朝安焦培荣廖明
- 文献传递
- 一株H9N2亚型禽流感病毒全基因组分析被引量：1
- 2012年
- 为了研究H9N2亚型AIV A/Chicken/Guangdong/333/2008的全基因组序列变异情况,试验利用RT-PCR方法扩增出该病毒的8个基因序列,并应用DNAStar和MEGA4.0软件分析所得基因序列。结果表明:该病毒HA基因的第226位氨基酸由Q(Gln)变为了L(Leu),其NP基因与Viet Nam/1203/2004(H5N1)的NP基因同源率最高。说明该病毒已具备了感染哺乳动物的分子特征,并可能在遗传演化过程中突变为高致病性的禽流感病毒(AIV)。
- 胡玥谭淑娴和君李小康李芳焦培荣亓文宝廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型基因组系统发生分析
- 一株H5N2亚型鹦鹉源禽流感病毒分子进化分析
- 2005年在广东进行流行病学调查时分离到1株鹦鹉源禽流感病毒,经鉴定为H5N2亚型禽流感病毒(A/Parrot/Guagdong/268/2005)。该毒株的HA裂解位点附近的氨基酸序列为RETRGIF,只含有1个碱性氨...
- 单芬郑煦灿韦良孟徐成刚罗开健任涛辛朝安焦培荣廖明
- 关键词：禽流感H5N2亚型鹦鹉分子进化分析
- 文献传递
- H5N2亚型鹦鹉源禽流感病毒分子进化分析
- 2005年在广东进行流行病学调查时分离到一株鹦鹉源禽流感病毒,经鉴定为H5N2亚型禽流感病毒(A/Parrot/Guangdong/268/2005)。该毒株的HA裂解位点附近的氨基酸序列为RETRGLF,只含有一个碱性...
- 单芬郑煦灿韦良孟徐成刚罗开健任涛辛朝安焦培荣廖明
- 关键词：禽流感H5N2亚型鹦鹉分子进化分析
- 文献传递
- H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法的建立被引量：6
- 2015年
- 【目的】H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,该亚型病毒为H7N9亚型和H10N8亚型流感病毒提供了6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS),并且一直处于动态重组过程中。因此,建立针对H9亚型禽流感的型特异性电化学发光免疫的高通量快速检测方法,加强H9亚型流感的监测,具有重要意义。【方法】用钌联吡啶标记H9亚型AIV的单克隆抗体,用MPI-E型电致化学发光分析系统评价钌标单抗标记效率;用生物素标记H9亚型AIV的多克隆抗体,HABA法检测抗体生物素化的效率;待测抗原与钌标单抗作用1 h后,将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的多克隆抗体反应,最后加入反应底物三丙胺后即可在电化学分析系统进行发光检测。优化生物素化多抗和钌标单抗最佳工作浓度,确定临界值和反应谱,对所建立的方法进行敏感性、特异性和重复性试验。攻毒后3 d和5 d,采集攻毒组和空白对照组鸡只的88份咽拭子和肛拭子,分别用电化学发光免疫检测方法和鸡胚病毒分离法进行检测和比较。【结果】钌标抗H9亚型AIV单克隆抗体的标记效率为每个单抗Ig G分子上结合21个Ru2+,且间接免疫荧光方法证明其仍具有生物活性;生物素化兔抗H9N2亚型AIV多克隆抗体的标记效率为每个Ig G分子上结合了6个生物素分子,且Western blotting试验证明其仍保持生物活性;该方法的检测临界值为28.3,可疑区间为23.4—33.2;阴性和阳性变异系数均小于10%;检测限为5×104EID50,能够特异性地检测H9亚型AIV,不与其他亚型流感病毒(H1、H3、H4、H5和H6亚型)和其他类型的禽源病毒(NDV、IBV和IBDV)反应。3 h内即可完成检测,与鸡胚病毒分离法的符合率为86.4%。【结论】所建立的H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法可以用于临床样品检测,对H9亚型禽流感的监测和防控具有重要意义。
- 亓文宝李芳李华楠黄丽红和君穆光慧罗开健廖明
- 关键词：H9亚型禽流感
