江苏省医学重点人才培养基金(2008)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：董莉陈琴徐标高玲康丽娜更多>>
- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：江苏省医学重点人才培养基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胰岛素对糖尿病小鼠缺血诱导的血管新生障碍的影响被引量：4
- 2010年
- 目的观察糖尿病小鼠是否存在缺血诱导的血管新生障碍,以及胰岛素治疗对这种障碍的影响,并探讨其可能的分子机制。方法链脲霉素诱导C57BL/6雄鼠糖尿病,非糖尿病组给予等量缓冲液,糖尿病胰岛素治疗组术前及术后注射胰岛素控制血糖。左侧股动脉高位结扎离断造成单侧后肢缺血模型。ELISA法测定术前及术后(1、3、7及14天)血浆血管内皮生长因子(VEGF)及间充质衍生因子1α(SDF-1α)水平。CD31免疫组织化学染色法评估术前及术后(7、14天)双侧后肢血管新生情况。免疫印迹法测定腓肠肌组织血管内皮生长因子、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、蛋白激酶B(Akt)及其磷酸化产物的蛋白表达。结果与非糖尿病组比较,糖尿病组小鼠缺血组织新生毛细血管密度显著减少(术后7天7.65±1.74比18.22±3.77,P<0.05),并伴随缺血诱导的血浆血管内皮生长因子及间充质衍生因子1α释放受抑(P<0.01),靶组织血管内皮生长因子蛋白表达上调受抑,蛋白激酶B及内皮型一氧化氮合酶磷酸化减弱(P<0.05)。胰岛素治疗明显改善糖尿病动物组织缺血后血管新生程度(15.36±2.14比7.65±1.74,P<0.05),提高血浆血管内皮生长因子及间充质衍生因子1α释放水平(P<0.01),并增强缺血组织血管内皮生长因子及其下游信号分子的表达与活化(P<0.05)。结论胰岛素治疗有效改善糖尿病动物缺血诱导的血管新生障碍,其可能是通过恢复受损的SDF-1/VEGF/Akt/eNOS信号通路活化而介导。
- 董莉刘莹沈宇陈琴白剑徐标
- 关键词：糖尿病血管新生血管内皮生长因子胰岛素
- 胰岛素改善糖尿病小鼠骨髓内皮祖细胞动员障碍研究被引量：1
- 2011年
- 目的：探讨胰岛素对糖尿病小鼠骨髓内皮祖细胞（EPC）动员的影响及其机制。方法：链脲霉素诱导C57BL／6雄鼠糖尿病，随机分为非糖尿病组、糖尿病组和糖尿病胰岛素治疗组（胰岛素组）3组（各组n=32）。人组小鼠饲养2个月后行左侧股动脉高位结扎离断术造成急性单侧后肢缺血模型。胰岛素组皮下注射胰岛素控制血糖。流式细胞术检测术后（0，1，3，7天，n=6～10）外周血单个核细胞中干细胞因子受体／干细胞抗原-1／胎肝激酶-1阳性早期EPC比例。酶联免疫吸附法测定血浆及骨髓血管内皮生长因子（VEGF）及间充质衍生因子let（SDF-1α）水平。免疫印迹法测定骨髓VEGF、蛋白激酶B、内皮一氧化氮合酶及基质金属蛋白酶-9的蛋白表达及磷酸化水平，酶谱法测定基质金属蛋白酶-9酶活性。结果：糖尿病组呈现缺血诱导的骨髓EPC动员障碍，动员高峰期其外周血早期EPC数量较非糖尿病组显著减少（P〈0．01）；并伴随血浆及骨髓VEGF及SDF-1α释放减少（P〈0．01）；骨髓VEGF蛋白表达受抑制、蛋白激酶B与内皮一氧化氮合酶磷酸化减弱及基质金属蛋白酶-9酶活性受损（P〈0．05），差异均有统计学意义。胰岛素组缺血术后骨髓EPC动员能力、VEGF及SDF-1α释放水平及骨髓蛋白激酶B／内皮一氧化氮合酶／基质金属蛋白酶-9信号通路活化水平较糖尿病组均明显提高（P〈0．05），差异均有统计学意义。结论：胰岛素改善糖尿病动物缺血诱导的骨髓EPC动员障碍，这种作用可能通过恢复受损的SDF-1α／VEGF信号通路活化而介导。
- 董莉徐标康丽娜丁亮陈琴高玲
- 关键词：糖尿病动员内皮祖细胞骨髓胰岛素
- 糖尿病小鼠骨髓分子改变对内皮祖细胞动员的影响被引量：1
- 2010年
- 背景糖尿病小鼠呈现缺血诱导的骨髓内皮祖细胞(EPC)动员障碍,但其分子机制目前尚未明了。目的观察缺血诱导的EPC动员障碍是否与糖尿病状态下骨髓EPC动员相关的信号通路改变有关。方法链脲霉素40mg/kg诱导C57BL/6雄鼠糖尿病,左侧股动脉高位结扎离断术造成单侧后肢缺血模型。于术前及术后1、3、7d不同时间点采血(n=6～10),流式细胞术检测外周血单个核细胞中细胞因子受体(c-Kit)+/干细胞抗原1(Sca-1)+/胎肝激酶1(Flk-1)+早期EPC比例。酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定相应时间点血浆及骨髓血管内皮生长因子(VEGF)及间充质衍生因子1α(SDF-1α)水平。免疫印迹法测定术后3d骨髓单个核细胞VEGF及其受体2(VEGFR2)、蛋白激酶B(PKB,Akt)与内皮型一氧化氮合酶(eNOS)及其磷酸化产物、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其组织抑制因子1(TIMP-1)的蛋白表达水平,明胶酶谱法测定骨髓上清MMP-9酶活性。结果与非糖尿病组相比,糖尿病小鼠呈现缺血诱导的骨髓EPC动员障碍,动员高峰期其外周血早期EPC数量显著减少,并伴随血浆及骨髓中SDF-1α及VEGF释放减少[VEGF(85.3±22.8)比(164.1±30.4)ng/L,P<0.01;SDF-1α:(731±52)比(1267±174)ng/L,P<0.01],骨髓组织细胞VEGF、VEGFR2蛋白表达受抑、Akt与eNOS磷酸化减弱、MMP-9蛋白表达减少及其酶活性受损(P<0.05),而TIMP-1蛋白表达水平增加(P<0.05),且糖尿病组骨髓MMP-9酶活性受抑与其循环中EPC水平减低相关(P<0.01)。结论糖尿病动物缺血诱导的骨髓EPC动员障碍可能与组织缺血后SDF-1α/VEGF/Akt/eNOS/MMP-9信号通路的活化受损有关。
- 董莉康丽娜陈琴高玲顾蓉徐标
- 关键词：糖尿病内皮祖细胞动员骨髓
