湖南省高校创新平台开放基金(09K074)
- 作品数：16 被引量：61H指数：6
- 相关作者：苏琦凌晖姜浩向姝霖唐海林更多>>
- 相关机构：南华大学吉首大学海南省妇幼保健院更多>>
- 发文基金：湖南省高校创新平台开放基金湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 稳定高表达RORα基因的人胃癌MGC803细胞系的构建与鉴定被引量：3
- 2016年
- 目的构建维甲酸相关孤核受体α(RORα)基因的真核表达载体,并建立稳定高表达RORα的人胃癌MGC803细胞,为研究RORα的功能奠定基础。方法根据RORα基因的c DNA全序列,设计一对带有限制性酶切位点的引物。从人胃癌MGC803细胞中提取mRNA作为模板合成RORαc DNA第一链,并用上述引物扩增目的基因全序列,然后经双酶切插入到真核表达载体pc DNA3.1(+),转化大肠杆菌DH5α;用氨苄青霉素筛选pc DNA3.1(+)-RORα的阳性菌株,双酶切和测序进行鉴定。用经鉴定的重组质粒pc DNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞,G418筛选获得RORα/MGC803细胞株;Real-time PCR和Western blot检测该细胞株RORα的表达情况。结果经双酶切鉴定,构建的真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα包含有大约1 640 bp的插入片段,与预期大小一致;表达载体经测序鉴定,其插入片段碱基序列与RORα基因的c DNA序列完全一致。用构建的真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα转染MGC803细胞后,筛选到可稳定传代的RORα/MGC803细胞株。Real-time PCR与Western blot检测显示,RORα/MGC803细胞RORαmRNA和蛋白表达增高。结论成功构建真核表达载体pc DNA3.1(+)-RORα和建立高表达RORα基因的RORα/MGC803细胞。
- 赵晓红向姝霖刘芳夏红曾希苏波凌晖苏琦
- 关键词：真核表达转染人胃癌MGC803细胞
- uPAR与肿瘤的研究新进展被引量：4
- 2011年
- 尿激酶型纤溶酶原激活物受体(urokinase plasminogen activator receptor,uPAR)是一个糖基磷脂酰肌醇锚定的蛋白质,高亲和力结合并激活尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase plasminogen activator,uPA),由此调节细胞表面蛋白水解活性。uPAR在几乎所有人类肿瘤中高表达,其高表达与增强肿瘤增殖、迁移、侵袭有关。本文对uPAR增强肿瘤趋向性、诱导上皮-间质转变与促进胞葬作用等新功能以及靶向uPAR治疗进展进行综述。
- 冯梅燕廖前进苏琦
- 关键词：UPAR上皮-间质转变靶向治疗
- 胃癌中RORα蛋白的表达及临床病理意义被引量：10
- 2012年
- 目的观察维甲酸相关孤核受体α(Retinoid acid receptor related Orphan Receptorα,RORα)蛋白在胃癌中的表达,探讨其与胃癌发生、发展的关系,为寻找胃癌肿瘤标记物提供一定的实验依据。方法应用组织芯片技术及免疫组化SP法检测90例胃癌组织、48例癌旁胃黏膜组织与22例正常胃黏膜组织中RORα的表达,研究RORα与胃癌发生、发展的关系。结果 RORα蛋白在胃癌组织中表达下调,正常胃黏膜、癌旁胃黏膜和胃癌组织中RORα蛋白阳性率分别为83.36%(19/22),56.25%(27/48)和24.44%(22/90),3者相比差异有显著性(P<0.05)。高分化腺癌、中分化腺癌、低分化腺癌、黏液腺癌和印戒细胞癌中,RORα阳性率分别为45.00%(9/20)、27.59%(8/29)、14.29%(3/21)、11.11%(1/9)和9.05%(1/11)。高分化腺癌RORα阳性率高于低分化腺癌(P<0.05)。结论 RORα蛋白下调与胃癌的发生、发展相关,且可能与胃癌的分化程度有关。
- 石莺黄建军苏坚唐海林廖前进曾希凌晖苏琦
- 关键词：胃肿瘤组织芯片免疫组化
- Cofilin与肿瘤被引量：6
- 2012年
- Cofilin是肌动蛋白相关蛋白,对肌动蛋白动力学特性的调节很重要。近年发现Cofilin活化与肿瘤细胞的恶性侵袭性质有关。Cofilin的局部激活可以诱导片状伪足的形成,并影响肿瘤细胞运动的方向,从而增强肿瘤细胞的运动和迁移;抑制Cofilin的活性可以减少肿瘤细胞的运动和迁移。本文对Cofilin的结构、功能、调控机制和与肿瘤的关系进行综述。
- 杨邦敏姜浩苏琦
- 关键词：COFILIN肌动蛋白迁移肿瘤标志物
- uPA/uPAR/PAI与消化系统肿瘤
- 2010年
- 消化系统肿瘤在我国的肿瘤发病率中占第1位。从尿激酶型纤溶酶原激活物受体(urokinase plas-minogen activator receptor,uPAR)首次被描述为尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase plasminogen activator,uPA)链的细胞表面高亲和性激活剂以来,越来越受到研究者的关注。研究表明:uPA,uPAR及尿激酶型纤溶酶原激活物抑制剂(urokinase plasminogen activator inhibitor,PAI)与消化系统肿瘤侵袭和转移密切相关。本文对uPA,uPAR及PAI与胃癌、食管癌、结肠癌、肝癌、胰腺癌等侵袭与转移的关系进行综述。
- 杨晶苏琦
- 关键词：尿激酶型纤溶酶原激活物尿激酶型纤溶酶原激活物受体消化系统肿瘤肿瘤标志物
- 大蒜烯丙基硫化物抗神经系统肿瘤作用研究进展被引量：4
- 2010年
- 胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤是神经系统最常见的恶性肿瘤。研究表明,大蒜烯丙基硫化物对神经系统肿瘤具有明显的增殖抑制作用,其机制与阻滞细胞周期、诱导凋亡及相关基因表达有关,并涉及多种信号途径。大蒜烯丙基硫化物可能成为化学预防和(或)化学治疗胶质母细胞瘤、神经母细胞瘤等神经系统肿瘤的有效、低毒的肿瘤抑制剂。
- 汪雪菁唐海林苏琦
- 关键词：大蒜烯丙基硫化物神经系统肿瘤神经母细胞瘤
- RORα miRNA真核表达载体构建及对人胃癌细胞增殖的影响被引量：6
- 2011年
- 目的构建RORα(Retinoid acid receptor related orphan receptorα,维甲酸相关孤核受体α)miRNA真核表达载体,分析其对人胃癌MGC803细胞RORα蛋白表达及细胞增殖的影响。方法构建针对设计RORαmiRNA表达的3对miRNA干扰序列,克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA真核表达载体,在测序鉴定无误后将含RORαmiRNA转染人胃癌MGC803细胞,用Western blo检测MGC803细胞转染前后RORα蛋白的表达水平变化。MTT法检测对转染MGC803细胞增殖的影响。结果 Western blot结果证实,MGC803细胞转染RORαmiRNA后24h RORα蛋白表达水平明显低于转染阴性组(P<0.05)。MTT结果显示,转染RORαmiRNA后细胞增殖率(光吸收值)高于转染阴性组(P<0.05)。结论 miRNA靶向抑制RORα表达后,可促进人胃癌MGC803细胞增殖,提示RORα是一个潜在的胃癌基因及药物治疗的靶点。
- 凌晖陈真伟曾铁兵文玲苏琦彭娟张杨
- 关键词：胃癌微小RNA增殖
- 转录因子AP-2与肿瘤的研究进展被引量：3
- 2012年
- 激活蛋白AP-2是一种序列特异性的转录因子,由AP-2α,AP-2β,AP-2γ,AP-2δ和AP-2ε等几个关系密切、结构保守的成员组成,参与细胞增殖分化、凋亡和癌变的调控。在多种不同类型肿瘤的发生、发展过程中,AP-2都存在异常表达,且与肿瘤预后有着密切的关系。同时,AP-2对肿瘤的调节具有抑癌或促癌的双向效应,这一作用因肿瘤的原发组织不同而不同。
- 张翔苏波苏琦
- 关键词：肿瘤转录因子AP-2
- 二烯丙基二硫对人胃癌细胞RORα蛋白表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究二烯丙基二硫(DADS)处理前后人胃癌细胞中维甲酸相关孤核受体α(R ORα)蛋白表达变化情况。方法实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养及细胞形态学观察,采用免疫细胞化学、Western blot分析RORα蛋白水平的表达;半定量RT-PCR检测RORα核酸水平的表达。结果DADS处理24 h后,细胞形态学发生明显改变;R ORα蛋白在人胃癌MKN28、MGC803细胞核中呈强阳性表达,与对照组相比表达明显上调;半定量RT-PCR灰度扫描定量分析结果显示,DADS处理24 h后,RORα蛋白表达在MGC803、MKN28细胞中的(0.97±0.01)、(0.91±0.01)较对照组的(0.44±0.02)、(0.72±0.01)显著上调(P<0.01或P<0.05);Western blot分析及灰度扫描显示,DADS处理人胃癌MGC803、MKN28细胞8、12和24 h后,RORα蛋白表达分别为(0.71±0.03)和(0.79±0.01)、(0.87±0.01)和(0.88±0.02)以及(1.31±0.01)和(0.96±0.02)较未处理组的(0.32±0.01)和(0.68±0.02)明显上调,差异有显著性(P<0.01或P<0.05)。结论DADS可诱导人胃癌细胞分化,其诱导分化作用可能与上调R ORα蛋白表达有关。
- 石莺黄建军唐章文谭亚丽黄炎凌晖苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫人胃癌细胞诱导分化
- 二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞G2／M期检查点Chk1与Chk2的影响被引量：5
- 2013年
- 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胃癌MGC803细胞G2/M期检查点Chk1与Chk2的影响。方法流式细胞术检测细胞周期改变;Northern blot、Westernblot与免疫细胞化学检测DADS处理MGC803细胞的Chk1与Chk2表达。结果流式细胞术分析显示,30 mg.L-1DADS呈时间依赖性阻滞MGC803细胞在G2/M期(P<0.05);Northern blot检测表明,DADS不同时间作用MGC803细胞后,Chk1与Chk2 mRNA表达与未处理组差异无显著性(P>0.05);免疫细胞化学发现Chk1与Chk2表达与未处理组无明显改变(P>0.05);Western blot DADS在不同时间对MGC803细胞Chk1与Chk2总蛋白表达无改变(P>0.05),而磷酸化的Chk1表达呈时间依赖性增加(P<0.05),但磷酸化的Chk2无明显改变(P>0.05)。结论 DADS阻滞MGC803细胞G2/M期与磷酸化Chk1有关。
- 陆丽峰苏波姜浩戴文香向姝霖唐海林凌晖苏琦
- 关键词：二烯丙基二硫G2/M期检查点CHK1CHK2
