国家自然科学基金(31101509) 作品数:8 被引量:36 H指数:4 相关作者: 刘悦萍 余佳 师光禄 王有年 史梦雅 更多>> 相关机构: 北京农学院 中华人民共和国农业部 北京化工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 北京市教委重点项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
桃生长素反应因子和生长素/吲哚乙酸蛋白家族基因的克隆及表达分析 被引量:15 2014年 生长素对果实发育起着重要的调控作用。生长素反应因子(auxin response factor,ARF)和生长素/吲哚乙酸蛋白(auxin/indoleacetic acids protein,Aux/IAA)是生长素信号转导系统中的两个关键因子,在转录水平上对生长素参与的生理活动进行调控。为探索生长素调控桃果实发育的机制,选取ARF家族的1个基因PpARF1,Aux/IAA家族的5个基因PpIAA3、PpIAA9、PpIAA17、PpIAA26和PpIAA29,克隆其全长cDNA序列并进行生物信息学分析,对它们在桃果实不同发育时期中果皮和种子的表达进行qRT-PCR检测。序列分析表明:这6个基因的编码区全长分别为2 037、594、1 194、618、384和723 bp,分别编码678、197、397、205、127和240个氨基酸;氨基酸序列比对分析显示桃PpARF1蛋白序列和草莓的FvARF1(XP_004300014.1)同源性最高,达到90.56%,PpIAA家族的5个蛋白同源性很低,只有23.77%;荧光定量PCR结果显示,在花后52 d(果实发育硬核期),PpIAA3和PpIAA17在中果皮中的表达量显著升高;PpIAA26、PpIAA29和PpARF1在种子中的表达量显著升高。预示生长素可能在桃果实发育硬核期发挥着重要的调控作用。 史梦雅 张巍 余佳 王文平 刘悦萍关键词:生长素 基因克隆 桃园间作对土壤碳汇及营养元素(氮磷钾)的影响 通过桃园间作薄荷(Herba menthae)、迷迭香(Rosmarinus officinalis)、薰衣草(Lavandulapedunculata)、三叶草(Trifolium)、黑麦草(Lolium perenn... 高美娟 任建军 师光禄 黄支权 谢刚刚 官芳芳 王有年关键词:果园 间作 土壤有机碳 桃果实内果皮木质素沉积的动态变化 被引量:7 2013年 为研究桃果实内果皮的发育机理及裂核果形成的可能原因,本试验以‘露王仙’桃果实为试材,利用木质素特定显色反应,研究木质素在桃果实内果皮中的沉积过程以及裂核果木质素沉积的变化。结果表明:花后39d起,桃果实内果皮由种尖开始有木质素沉积,然后从里向外逐渐木质化,花后60d木质化过程完成。裂核果的内果皮没有完全木质化,核开裂部位形成愈伤组织。 史梦雅 李阳 张巍 余佳 刘悦萍关键词:内果皮 木质化 裂核 巴豆醛对水稻悬浮培养细胞蛋白质表达的影响 2014年 对巴豆醛处理水稻悬浮培养细胞后蛋白质组水平的变化进行了研究,以期发现在调控水稻细胞周期活动中起重要作用的蛋白。采用双向电泳分离蛋白,PDQuest软件分析凝胶图谱确定差异蛋白点,LCQ-Fleet ion trap系统鉴定蛋白,相关数据库检索分析差异蛋白点,获得了45个差异蛋白点,经质谱鉴定和数据库分析得到26个可信蛋白,集中在胁迫反应、蛋白质命运,信号转导,物质与能量代谢和膜功能等。在这些蛋白中,小分子量热激蛋白、Skp1蛋白和26S蛋白酶,CDC48,6-磷酸葡萄糖胺乙酰基转移酶以及蔗糖合酶等蛋白已有文献报告其在植物细胞周期调控中的作用,其它一些鉴定的蛋白参与了细胞的生理活动,其与细胞周期间的相互关系需进一步的研究。巴豆醛处理影响了水稻悬浮培养细胞正常的细胞周期活动,鉴定出部分蛋白与细胞周期的调控具有密切关系,而一些与水稻细胞分化、发育相关蛋白也得到了鉴定,其在细胞周期上的作用尚未有文献报告,这些蛋白的进一步研究将有助于揭示水稻细胞周期的调控机制。 刘悦萍 郭蓓 胡昊 张国庆关键词:巴豆醛 差异蛋白质组 细胞周期 桃果实生长素结合蛋白ABP1的组织定位及蛋白表达分析 被引量:3 2015年 【目的】生长素几乎参与调控植物发育的各个方面。生长素信号转导存在由ABP1(auxin binding protein1)介导的途径,ABP1作为一种生长素快速响应蛋白参与调控果实发育等生理过程,其主要存在于正在发育的胚及胚的周围组织中。本文旨在研究ABP1是否参与桃果实发育过程,探讨其分布与表达特点,为进一步研究桃果实发育机制奠定理论基础。【方法】以‘24号’桃果实为研究对象,测定其生长曲线以确定果实发育的3个典型时期。分离不同发育时期的中果皮、内果皮和种子,切块后,一部分样品放入EDAC溶液抽真空后进行戊二醛和多聚甲醛固定,固定后的样品经脱水和浸蜡处理后用于石蜡切片;另一部分样品液氮速冻后-80℃保存提取蛋白。制备效价较高的ABP1兔源多克隆抗体,应用免疫组织化学定位技术对自然发育状态下不同发育时期桃果实种子和中果皮中ABP1进行定位分析;应用Western blot技术分析桃果实中果皮、内果皮和种子中ABP1的表达情况。【结果】根据桃果实生长曲线,将发育时期分为3个时期,即第一次快速生长期、硬核期和第二次快速生长期。免疫组织化学定位结果表明,同一发育时期ABP1在种子的不同部位都有分布,且分布信号差异不明显。在种子发育的各时期,ABP1在种子的不同部位都有分布,主要分布在种子的内外种皮细胞以及种皮内维管组织周围的细胞中,且在观测的发育时期内,ABP1的信号强弱没有明显变化。在种子内、外种皮之间的细胞层中会出现零散的、呈带状分布的ABP1信号。而在中果皮发育的整个时期,ABP1只在硬核期维管组织周围的细胞中有明显分布。Western blot结果表明,中果皮中ABP1的表达在果实第一次快速生长期开始(盛花后41 d)及第二次快速生长期开始(盛花后76 d)时的表达量最高,在盛花后39 d的表达量最低。种子中ABP1的表达量要高于中果皮 余佳 李阳 龚硕 关伟 刘悦萍关键词:桃果实 ABP1 免疫组化 核桃青皮复配营养液对设施草莓的杀螨及营养效果 被引量:4 2013年 为研究不同方法提取的核桃(Juglans regia)青皮提取物及其石油醚提取物添加尿素、硫酸锌、磷酸二氢钾复配营养液对温室草莓朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)的防治效果和草莓植株生长的影响,采用随机区组方法,调查统计草莓植株受螨害株数和螨害级数,比较不同处理草莓植株叶面积大小.结果表明:喷施核桃青皮原浆滤液和石油醚提取物的处理对朱砂叶螨的防效最好,但对植株生长不利;喷施乙醇提取物的处理对朱砂叶螨防效不稳定;核桃青皮石油醚粗提物复配营养液为最适复合配方,处理56 d后,螨害的防效在71.67%~93.33%,螨害指数低于6%;喷施核桃青皮石油醚提取物复配营养液的植株叶面积大于喷施匀浆过滤液和石油醚提取物的叶面积,说明核桃青皮石油醚提取物复配营养液对草莓植株有很好的营养效果. 高美娟 任建军 师光禄 王有年关键词:核桃青皮 朱砂叶螨 植物营养液 叶面积 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis RN-61)发酵培养基及发酵条件的优化 为了获得应用于植物病害防治的高效广谱拮抗细菌菌株,选取从土样中分离到的对棉花红腐病(Fusarium moniliforme)、辣椒炭疽病(Colletotrichum gloesporioides)、茄子黄萎病(Ver... 任建军 高美娟 胡旭松 刘柳 师光禄 王有年关键词:枯草芽孢杆菌 碳源 发酵条件 文献传递 木鳖子提取物对朱砂叶螨的触杀活性 被引量:1 2012年 测定了木鳖子提取物对朱砂叶螨的触杀活性。用甲醇、氯仿、石油醚3种不同极性的溶剂提取,石油醚提取率最高为30.79%,且对朱砂叶螨成螨和卵的触杀活性均高于其他两种溶剂的提取物,24 h校正死亡率分别为77.52%和72.04%。用甲醇对石油醚提取物萃取,发现甲醇萃取物活性明显高于石油醚部分,对成螨和卵处理24 h后的校正死亡率分别为89.60%和74.65%,产卵抑制率为62.74%,驱避率为58.23%。柱层析对甲醇萃取物进行分离得到10种组分,组分5活性最高,浓度为2 mg/mL时,24 h校正死亡率为86.15%。用薄层层析和气相色谱质谱联用仪分别检测组分5纯度和主成分,初步确定活性成分为α-菠菜甾醇。 郭辉力 师光禄 贾良曦 王东峰 王有年关键词:木鳖子 朱砂叶螨 生物活性 餐厨垃圾转化为生物肥料的探索研究 被引量:5 2013年 为了解决餐厨垃圾回收处理难等问题,探索餐厨垃圾资源化利用,以学校食堂餐厨垃圾作为研究对象,经过固液粗分后,重点研究了废液发酵培养粘红酵母获得菌体的可行性,最后以大豆为试验材料,分别研究了固体垃圾和发酵菌体作为生物肥料的肥效。试验结果表明,粘红酵母可以利用餐饮废水,最佳发酵时间24h时获得菌体干重12g/L;粘红酵母最适宜生长pH为5.5;固体垃圾和发酵菌体对幼苗期大豆豆苗的生长有一定的促进作用,按照每公顷的最佳施用量为450kg。 王娅亚 薛飞燕 王有年 师光禄 陈必强关键词:餐厨垃圾 粘红酵母 生物肥料 桃种皮细胞的超微结构观察及生长素结合蛋白ABP1亚细胞定位 被引量:2 2016年 为探究桃种皮细胞的超微结构特征以及ABP1在种皮中的亚细胞水平分布特点,本试验以"大久保"桃种皮为实验材料,利用透射电子显微镜观察了种皮细胞超微结构的变化,采用免疫胶体金标记技术对内源ABP1进行定位分析。结果显示:种皮细胞结构具有明显的发育时期特异性。ABP1信号主要出现在细胞核、内质网、质膜、细胞壁、线粒体和液泡上,而较强的信号分布于内质网和质膜上。本试验结果为ABP1在桃种皮细胞中的具体分布及其变化提供直观的形态学证据,为进一步研究其在果实发育过程中的作用机制奠定了理论基础。 兰秒 杨瑞 胡晓 侯旭 刘悦萍关键词:ABP1 超微结构 免疫胶体金技术