国家自然科学基金(30800406)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
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- 肿瘤抑制因子RUNX3对人胃癌细胞中凋亡相关基因表达的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:研究肿瘤抑制因子人类Runt相关转录因子3(RUNX3)对人胃癌细胞BGC823中凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(bcl-2)、bax、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)表达的影响,以揭示RUNX3促进胃癌细胞凋亡的作用机制。方法:首先构建人Runx3的真核生物表达载体pcDNA3.1-Runx3,将pcDNA3.1-Runx3及空载体pcDNA3.1分别转染BGC823细胞48h后,提取细胞的总RNA和蛋白质,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)分别检测转染不同载体的细胞内RUNX3的表达情况,然后用RT-PCR和West-ern blotting检测凋亡相关基因bcl-2、bax、caspase-3、caspase-8和caspase-9的表达及蛋白的表达,β-actin作为内对照。结果:我们成功构建了人Runx3的真核生物表达载体pcDNA3.1-Runx3,将其转染BGC823细胞后,RT-PCR和Western blotting结果均显示:转染pcDNA3.1-Runx3的细胞中RUNX3的表达水平明显高于转染空载体pcDNA3.1的细胞(P<0.05);转染pcDNA3.1-Runx3的细胞中bcl-2基因的表达水平明显降低,caspase-3、caspase-9基因的表达水平明显增加(P<0.05)。结论:在BGC823细胞中,RUNX3通过下调bcl-2,上调caspase-3、caspase-9的表达促进细胞的凋亡。
- 张春艳刘志方徐霞曾季平于晗贾继辉
- 关键词：RUNT相关转录因子3BGC823细胞
