陕西省社会发展科技攻关项目(2011K14-07-14)
- 作品数：3 被引量：20H指数：3
- 相关作者：赵四平胡学昱王继猛焦海斌王晶更多>>
- 相关机构：空军军医大学山西医科大学第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省社会发展科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 过表达MicroRNA-21通过PTEN/PI3K/AKT信号通路调控人退变髓核细胞自噬的研究被引量：5
- 2019年
- 目的:探讨过表达mi R-21通过PTEN/PI3K/AKT通路对人退变髓核细胞自噬的影响。方法:构建稳定过表达mi R-21 mimic人退变髓核细胞,转染无意义序列作为mi R-21 mimic control组,采用RT-qPCR检测转染效率;利用MDC荧光染色法观察细胞自噬泡;Western-Blot检测细胞自噬相关蛋白LC3和P62的表达以及PTEN/PI3K/AKT信号通路中关键蛋白PTEN、PI3K及AKT的表达水平。结果:RT-qPCR结果表明mi R-21 mimic转染成功且效率较高,与mi R-21 mimic control组及空白细胞对照组相比,差异显著(P<0.05)。荧光显微镜观察MDC染色情况,mi R-21 mimic组的细胞中几乎没有发现自噬体,而mi R-21 mimic control组以及空白对照组细胞中自噬体均较多,与前者相比差异均明显,具有统计学意义(P<0.05)。mi R-21 mimic组细胞中LC3-II/LC3-I表达量的比值均显著低于mi R-21 mimic control组及空白对照组细胞(P<0.05);而P62在mi R-21 mimic组细胞中表达量显著高于mi R-21 mimic control组及空白细胞对照组,具有统计学意义(P<0.05)。mi R-21 mimic组中PTEN蛋白的表达水平较低,与另外两组相比具有统计学意义(P<0.05);磷酸化的PI3K(p-PI3K)和AKT(p-Akt)在mi R-21 mimic组中均明显高于mi R-21 mimic control组和空白细胞对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:mi R-21可以通过靶向沉默PTEN,促进PI3K和AKT发生磷酸化,进而使PTEN/PI3K/AKT信号通路被激活,最终抑制人椎间盘退变髓核细胞的自噬。
- 潘东晟张永峰吕艳红赵四平李俊琴王哲
- 关键词：MIR-21细胞自噬
- miR-155对人椎间盘退变髓核细胞凋亡的作用及机制研究被引量：3
- 2019年
- 目的:探讨mi R-155对人椎间盘退变髓核细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:首先构建慢病毒表达载体,在293T细胞中获得重组慢病毒,然后感染椎间盘退变髓核细胞得到稳定过表达细胞系,同时设置空载体和空白细胞组对照。用荧光显微镜观察慢病毒载体的标签蛋白GFP的表达,分别提取三组细胞总RNA,采用RT-q PCR方法检测mi R-155的表达;通过流式细胞术检测细胞凋亡,Western-Blot检测细胞中凋亡相关蛋白FADD、Caspase-3、Bcl-2及Bax的表达,JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位的变化情况。结果:在荧光显微镜下,经慢病毒感染的过表达细胞系和空载体细胞系均出现绿色荧光,而空白细胞组未见绿色荧光;RT-qPCR结果显示构建的稳定过表达细胞系(GV369-miR-155-NP)中mi R-155的表达水平较高,且与空载体细胞系及空白细胞对照组均呈显著性差异(P<0.05);与空载体组(GV369-NP)及空白细胞对照组相比,过表达组(GV369-miR-155-NP)细胞凋亡率显著降低(P<0.05),FADD、Caspase-3、Bax的表达水平均明显下降,而Bcl-2表达水平显著增加(P<0.05)。结论:mi R-155可能通过靶向结合Caspase-3和FADD阻止FasL-Fas途径或通过线粒体途径抑制人椎间盘退变髓核细胞凋亡。
- 潘东晟张永峰吕艳红赵四平李俊琴王哲
- 关键词：MIR-155细胞凋亡
- 激光照射对脊髓损伤大鼠TNF-α、IL-6和IL-10表达的影响被引量：12
- 2014年
- 应用Allen造模法制备大鼠急性脊髓损伤(SCI)模型,研究弱激光照射对损伤脊髓组织内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-10(IL-10)表达的影响。68只SD大鼠随机分为正常组、SCI组和照射组,照射组应用810nm弱激光经皮照射相应的脊髓损伤节段。分别于术后1d、3d和7d进行BBB评分;1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d和7d取材,酶联免疫吸附检测(ELISA)法检测受损脊髓组织内TNF-α、IL-6和IL-10的表达情况。实验发现,照射后7d照射组大鼠BBB评分高于SCI组,且有统计学意义(P<0.05);与SCI组相比,照射组受损脊髓组织内TNF-α和IL-6的表达量均降低,且在术后6h、12h、1d(TNF-α)和6h、12h、5d(IL-6)差异有统计学意义(P<0.05);IL-10的表达量在各个时间点均增高,且在术后1d、3d、5d和7d差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明弱激光照射能明显抑制脊髓损伤早期前炎症因子TNF-α和IL-6的表达,促进抑炎因子IL-10的表达,促进损伤后期大鼠运动功能的恢复。
- 王继猛梁卓文胡学昱焦海斌王晶王哲张镇西
- 关键词：医用光学弱激光照射脊髓损伤白介素-6白介素-10
