山东省高等学校科技计划项目(J09LF20)
- 作品数:8 被引量:44H指数:4
- 相关作者:伊正君付玉荣杨彪炳刘兴龙裴景亮更多>>
- 相关机构:潍坊医学院潍坊医学院附属医院解放军第107医院更多>>
- 发文基金:山东省高等学校科技计划项目国家自然科学基金山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 活动性肺结核患者痰液中miR-29a的表达被引量:6
- 2012年
- miRNA是一类长度为18~25个核苷酸的单链非编码RNA分子,参与到调控细胞生长、发育、分化等各个环节,与疾病的发生、发展相关。最近的研究结果表明,miRNA分子也在微生物引起的感染和免疫应答中起重要调控作用;肺部疾病患者痰液中miRNA的表达可发生变化。我国是结核病高发国,其中,以肺结核最为常见。痰是肺泡、气管和支气管的分泌物,含有机体肺组织诸多生物过程的重要产物。本研究的目的是探讨miR-29a分子在活动性肺结核患者痰液中的表达情况。
- 伊正君付玉荣李瑞芳裴景亮张玉芝
- 关键词:肺结核患者活动性痰液RNA分子肺部疾病
- 人上睑眶隔脂肪来源的脂肪干细胞的分离培养及鉴定被引量:2
- 2012年
- 目的探讨人上睑眶隔来源的脂肪提取脂肪干细胞(ADSCs)的可行性,并进行分离、培养及鉴定。方法取健康成年人上睑眶隔脂肪组织,用胰酶进行消化后收集细胞接种于培养瓶内,采用差速贴壁法纯化细胞。用HE染色、免疫荧光进行细胞鉴定,并进行成脂、成软骨诱导。结果 HE染色显示细胞形态为长梭形,呈漩涡状生长。免疫荧光鉴定结果显示细胞表面抗原CD44、CD29阳性表达,CD106、CD34阴性表达,说明分离培养的细胞是脂肪干细胞。成脂、成骨诱导实验证明所得细胞有多向分化的能力。结论可以从人上睑眶隔脂肪组织提取出ADSCs,并有多向分化能力,为今后ADSCs的取材提供了新的路径。
- 范开防王国栋刘兴龙杨彪炳
- 关键词:干细胞脂细胞脂肪组织眼睑细胞
- IGF-Ⅰ与TGF-β_2单独及联合应用对软骨细胞培养的影响被引量:1
- 2014年
- 目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-Ⅰ)与转化生长因子-β2(TGF-β2)单独及联合应用对软骨细胞形态、增殖速度、黏多糖含量、Ⅱ型胶原含量及表型的影响。方法采用酶消化法取兔软骨细胞并培养,于第2代时分别加IGF-Ⅰ及TGF-β2。分为A(空白对照)、B(含IGF-Ⅰ)、C(含TGF-β2)、D(含IGF-Ⅰ及TGF-β2)组。用苏木精-伊红染色法、甲苯胺蓝染色观察软骨细胞形态,MTT法检测增殖速度,阿尔新蓝比色法检测黏多糖含量,免疫组化法检测Ⅱ型胶原含量及表型。结果在维持细胞形态、细胞增殖速度、Ⅱ型胶原含量及表型方面,D组优于B组,C组次之,A组最差,差异均有统计学意义(P<0.05)。在促进细胞外基质及黏多糖分泌方面,D组优于C组,B组次之,A组最差(P<0.05)。结论 IGF-Ⅰ、TGF-β2能维持软骨细胞形态,促进其增殖及Ⅱ型胶原的分泌,并维持其表型,增加细胞外基质及黏多糖的分泌,联合应用有协同作用,可抑制软骨细胞在体外培养过程中的老化。
- 张帆刘兴龙周广东杨彪炳
- 关键词:转化生长因子Β软骨细胞
- 潜伏结核感染者CD4+T细胞miR-29家族、靶基因IFN-γ的表达及生物信息学分析被引量:8
- 2013年
- 目的探讨潜伏结核感染和活动性缔结核感染对患者外周血CD4^+T细胞内miR-29家族及其靶基因IFN-γ表达的影响。方法于2012年3-12月,在山东省潍坊市某两家医院选取调查对象并分为3组:活动性肺结核组(30例)、潜伏结核感染(LTBI)组(25例)和健康对照组(30名)。分离纯化3组受试者外周血中的CD4^+T细胞;州核酸杂交与荧光定量PCR检测CD4^+T细胞内miR-29a、miR-29b和miR-29c的表达;用定量PCR检测miR-29靶基因IFN-γ的表达;用TargetScan与PicTar联合预测miR-29家族的靶基因;用David数据库和Cytoscape软件对miR-29家族的预测靶基因进行皋因本体论(GO)和京都基因和基因组百科仝书(KEGG)生物通路富集分析。结果miR-29a、miR-29b和miR-29c在活动性肺结核组、LTBI组和健康对照组CD4^+T细胞中的表达水平均不同(P〈0.05):miR-29b和miR-29c在活动性肺结核组的表达(561.63±65.36,281.85±42.78)高于健康对照组(260.74±38.69,128.21±19.98),低于LTBI组(2030.29±321.68,620.93±79.14);miR-29a在对照组的表达水平(913.95±104.73)高于活动性结核组(323.37±54.38),低于LTBI组(4782.13±567.81)。靶基凶IFN-γ在3组之间的表达水平亦不同(P〈0.05):LTBI组(0.45±0.09)低于健康埘照组(1.00),而高于活动性结核组(0.11±0.03)。miRNA-29家族的预测靶基冈的GO功能富集于细胞外基质结构成分、转录调节活性等分子功能方面;在KEGG的通路数据库中,miR-29家族预测靶基因集合屁著富集于局部黏附信号通路、调节细胞骨架与mTOR信号通路等方面。结论LTBI和活动性结核感染明显增加了患者外周血CD4^+T细胞内miR-29家族的表达,降低了其靶基因IFN-γ的表达,从而影响了信号通路等生物学过程。
- 伊正君付玉荣李建花张波
- 关键词:计算生物学MIR-29IFN-Γ
- MicroRNA与肺部感染的研究进展被引量:10
- 2012年
- MicroRNA(miRNA)通过激活或抑制基因转录来调控基因表达,在机体的生理发育、疾病的发生和发展过程中发挥着重要作用。研究发现,miRNA不仅在细胞分化,细胞增殖,器官发育等过程中扮演重要角色,miRNA还可作为不同生理和病理状态的分子标记。许多研究标明miRNA与肺部感染的发生、发展及转归有着密切的关联。虽然目前研究不甚深入,很多问题有待探索,但可以肯定的是,对miR-NA的研究将会对肺部感染性疾病的分子机制、临床诊断与治疗等研究产生很大的影响。本文综述了miRNA与肺炎及肺结核的关系。
- 张玉芝伊正君付玉荣
- 关键词:MICRORNA肺炎肺结核细菌病毒
- 降钙素原在结核病诊断的价值被引量:13
- 2012年
- 目的探讨血清降钙素原在结核病的鉴别诊断及疗效观察的价值。方法收集结核患者和健康对照者的血清,采用ELISA法定量检测血清中的降钙素原浓度,绘制受试者工作特征曲线判断降钙素原在结核病的诊断和疗效价值。结果结果显示,活动性肺结核组降钙素原浓度高于其他结核组和健康对照组(P<0.05),肺外结核组高于非活动性肺结核组和健康对照组(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析确定降钙素原诊断活动性肺结核的临界值为0.15ng/mL,以此为诊断临界值其敏感度、特异性分别为76.9%和81.2%。活动性肺结核患者经有效治疗后,血清降钙素原含量明显降低。结论降钙素原可作为活动性肺结核辅助诊断和治疗效果的判断指标。
- 伊正君裴景亮李瑞芳付玉荣
- 关键词:结核分枝杆菌活动性肺结核降钙素原
- 胰岛素样生长因子1与转化生长因子β_2促进组织工程软骨构建的体外实验
- 2011年
- 背景:软骨组织的再生能力差,软骨组织工程能利用较少的细胞、支架材料和细胞因子对缺损进行修复。目的:观察胰岛素样生长因子1与转化生长因子β2联合应用对组织工程软骨形成的影响。方法:用酶消化法获取人软骨细胞,将培养的细胞以4×109L-1的细胞浓度接种在藻酸钙凝珠支架上,分别加入200μg/L胰岛素样生长因子1和(或)1μg/L转化生长因子β2进行立体培养。于培养的第3,5,7,9,11,13天,进行细胞计数,观察软骨细胞的增殖情况。培养2周后,进行大体形态观察和阿尔新蓝-过碘酸雪夫氏染色(AB-PAS)及抗Ⅱ型胶原免疫组织化学染色。结果与结论:细胞计数及免疫组织化学染色显示,胰岛素样生长因子1和转化生长因子β2均能促进软骨细胞增殖和软骨相关基质黏多糖及Ⅱ型胶原的分泌,其中胰岛素样生长因子1的作用主要体现在促细胞增殖方面,而转化生长因子β2的作用主要体现在促进软骨相关基质形成方面,二者联合应用具有促进组织工程软骨形成的协同作用。
- 陈宁杰张伟梁晓琴杨彪炳
- 关键词:胰岛素样生长因子1转化生长因子Β2软骨藻酸钙软骨组织工程
- 胰岛素样生长因子Ⅰ与转化生长因子β2对兔软骨细胞立体三维培养的作用被引量:4
- 2013年
- 目的检测胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)、转化生长因子β2(TGF-β2)单独及联合应用对立体培养软骨细胞增殖速度、细胞形态和表型、黏多糖含量及Ⅱ型胶原含量的影响。方法取兔第二代软骨细胞于藻酸钙凝珠中,分别加入IGF-Ⅰ、TGF-β2及IGF-Ⅰ+TGFF-β2进行立体培养。HE、甲苯胺蓝染色测软骨细胞形态、胞外基质变化;阿尔新蓝法测黏多糖;免疫组化法测Ⅱ型胶原及表型;Woessner法测Ⅱ型胶原含量。结果细胞形态及表型的维持、增殖速度、黏多糖及Ⅱ型胶原含量,IGF-Ⅰ+TGF-β2组明显优于其他组,各组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-Ⅰ与TGF-β2联合应用起协同作用,能够显著促进黏多糖及Ⅱ型胶原的分泌,促进软骨细胞外基质分泌及软骨细胞形态及表型的维持。
- 李明征刘兴龙王国栋鞠晓燕刘元富杨彪炳
- 关键词:转化生长因子Β2软骨组织工程