国家自然科学基金(30000227) 作品数:26 被引量:81 H指数:5 相关作者: 王廷华 冯忠堂 柯青 刘芬 袁源 更多>> 相关机构: 昆明医学院 昆明医学院第一附属医院 华西医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省自然科学基金 浙江省教育厅科研计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 哲学宗教 更多>>
部分背根切断后备用DRG卫星细胞NGF、BDNF和NT-3的表达变化 被引量:2 2003年 为探讨部分去背根猫备用背根节 ( L6 )卫星细胞 NGF、BDNF和 NT-3的表达变化 ,将成年雄猫 2 0只分为正常对照组和术后 3 d、术后 7d及术后 10 d三个实验组。实验组行单侧部分背根切断术 (切除一侧 L1 ~ L5,L7~S2 DRG,保留 L6 背根为备用根 )。取正常组一侧和术后 3 d、7d及 10 d实验组手术侧的 L6 DRG制作 2 0μm厚冰冻切片 ,行免疫组化反应 ;观察 NGF、BDNF和 NT-3在 DRG卫星细胞的分布 ,计数各组 L6 DRG的 NGF、BDNF和 NT-3的阳性卫星细胞数量。结果发现 ,部分去背根术后7d和 10 d组 L6 DRG的 NGF、BDNF和 NT-3的阳性卫星细胞数量较术后 3 d组和正常组者明显增高 ( P<0 .0 1)。表明 ,单侧部分背根切断导致备用 DRG卫星细胞的 NGF、BDNF和 NT-3的表达上调 ,这一变化可能与脊髓可塑性有关。 刘芬 王廷华 冯忠堂 张晓 吴林艳关键词:神经营养因子-3 卫星细胞 备用背根节 部分背根切断对备用背根节和脊髓IGF-Ⅰ表达的影响 被引量:2 2005年 目的 探讨 IGF- 在正常猫和部分去背根猫的 L6 双侧背根节和脊髓 板层 (L3、L5、L6 )与背核 (L3)表达及变化 ,以了解 IGF- 与脊髓可塑性的关系。方法 成年健康雄猫 15只分为正常组、备用根术后 7d组与 14d组 ,每组 5只。用兔抗 IGF- (1∶ 2 0 0 )抗体行免疫组化 ABC法染色。观察、计数并比较各组背根节、脊髓实验侧 板层 (L3、L5、L6 )和背核 (L3)中 IGF- 的分布、含量。结果 1IGF- 在去部分背根后 7d,术侧背根节阳性细胞数比正常组显著减少 (P<0 .0 5 ) ,与非术侧比无差异 (P>0 .0 5 ) ;术后 14 d,术侧背根节 IGF- 阳性神经元数比正常组亦显著减少 (P<0 .0 5 ) ,与术后 7d组比无差异 (P>0 .0 5 ) ,较非术侧者明显减少 (P<0 .0 1)。 2各组 L3、L5、L6术侧脊髓 板层内 IGF- 阳性神经元数均无明显差异 (P>0 .0 5 )。 L3背核 IGF- 阳性神经元数在术后两时相则先减少后增加 (P<0 .0 5 ) ,且在术后 14 d时恢复至正常水平 (P>0 .0 5 )。结论 部分背根切断导致双侧背根节IGF- 表达改变和脊髓背核 IGF- 表达改变 ,提示 IGF- 王伟民 关宇光 刘芬 王廷华 徐新运 柯青 卢永超 袁源关键词:神经生物学 部分背根切断 免疫组化 部分背根切断对备用背根节和脊髓NT-4表达的影响 被引量:2 2005年 目的 探讨 NT- 4在正常猫和部分去背根猫的 L6 背根节 (手术侧和非手术侧 )和脊髓 板层与背核表达的变化。方法 成年健康雄猫 15只分为正常组、备用根术后 7d组和 14 d组 (动物行单侧部分去背根手术 ,即切除一侧 L1 - L5、L7- S2 背根节 ,保留 L6 为备用根 ) ,采用免疫组化 ABC法 ,观察、计数各组背根节、脊髓实验侧 板层 (L3、L5、L6 )和背核 (L3)中 NT- 4的分布及含量。结果 1去部分背根后 7d,备用背根节 (术侧 )中 NT- 4阳性神经元数比正常组显著减少 (P<0 .0 5 ) ,但较非术侧明显增多 (P<0 .0 5 ) ;至术后 14 d,术侧备用背根节 NT- 4阳性神经元比正常组、7d组和非术侧均减少 (P<0 .0 5 )。 2正常组、术后两时相 L3、L5、L6 术侧脊髓 板层和 L3背核内NT- 4阳性神经元数均无明显变化。结论 去部分背根主要导致备用背根节 NT- 龙双涟 刘芬 王廷华 徐新运 关宇光 王特为 柯青 袁源关键词:神经生物学 部分背根切断 神经营养因子-4 针刺对背根节神经元GDNF表达的影响 被引量:3 2003年 目的 研究部分去背根及针刺对背根神经节神经元胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)表达的影响。方法 制作猫备用背根模型并针刺备用根支配区的两组穴位 ,足三里和悬钟 ,伏兔和三阴交。针刺 7d后取备用背根节用 GDNF抗血清 (1∶ 10 0 0 )行免疫组织化学染色。分别计数各组大、中、小阳性神经元的数量。结果 非手术组 GDNF阳性神经元数量为 5 5 % ,其中大神经元为 2 5 % ,中神经元为 14 % ,小神经元为 16 % ;术后非针刺组 ,阳性神经元总数为 35 % ,较非手术组明显下降 (P<0 .0 5 ) ,主要为大神经元 (5 % )数量减少 ,而阳性中 (13% )、小神经元 (17% )数量变化不明显 ,但染色明显加深。针刺组 GDNF阳性神经元数量又明显增加至 90 % ,其中阳性大神经元 2 8% ,中神经元 17% ,小神经元 4 5 %。结论 背根节 GDNF阳性大神经元数量在去部分背根术后 7d显著下降 ,而针刺可逆转这种变化。 GDNF阳性中、小神经元数量在术后 7d并无明显变化 。 袁源 王廷华 杨志敏 刘芬关键词:GDNF 针刺 备用背根节 部分背根切断及针刺促进备用背根节c-jun的表达 被引量:4 2003年 目的 探讨部分背根切断术及针刺对背根节 (DRG) c- jun表达的影响。方法 将成年雄猫 15只 ,分假手术组 ,手术组和术后针刺组 ,每组 5只。手术组动物行单侧备用根术 ,术后针刺组动物经单侧备用根术后 ,针刺后肢手术侧 L6 脊神经分布区中的两组穴位 :足三里和悬中 ;伏兔和三阴交 ,每天一次 ,每次 30 min,连续针刺 7d。通过免疫组化 ABC法 ,用 c- jun特异抗体 (1∶ 10 0 0 ,Santa Cruz)对切片进行染色 ,DAB呈色。观察并测量 DRG中c- jun阳性神经元的分布、数量及反应强度。结果 在假手术组 DRG中 ,只有部分神经元染色。手术组 c- jun阳性神经元的数量较假手术组显著增多 (P<0 .0 5 ) ,其免疫反应水平较假手术组 ,显著上升 (P<0 .0 5 )。术后针刺组较手术组的 c- jun免疫反应强度增强 ,而阳性神经元的数量没有显著差异。结论 部分背根切断后备用 DRG神经元中c- jun的表达增加 ,针刺促使 c- 柯青 王廷华 李朗 于建云 郭泽关键词:C-JUN表达 背根节 针刺 THE REPAIR OF SPINAL CORD INJURY——A LONG WAY AHEAD 2005年 Damage to spinal cord (SC) often produces long-lasting functional deficits involving sensory and movement. After injuries, SC may perform a series of changes, which injured neurons may suffer death, persistent atrophy or recovery, while damaged axons initially show a growth response, but later their regeneration is aborted as a dense permanent scar is laid down within the core of the wound. Clinically, functional recovery from such injuries is poor and morbidity is severe. Consequently, the prevalence of patients permanently disabled from spinal cord injury (SCI) is high, estimated at more than 1∶1000 of the population of North America (Office of Technology Assessment USA, 1990) [1] . 王廷华 李咏梅 Dubus P Merlio JP 关键词:生长抑制因子 神经生长因子 悬滴法在免疫组织化学实验中的应用 被引量:1 2001年 王廷华 徐振波 冯忠堂 李明内源性GDNF、NT-4对针刺猫脊髓备用根背根节神经元的作用 被引量:1 2006年 为了解部分背根切除和针刺及内源性GDNF和NT-4对体外培养备用背根节(DRG)的作用,本研究对5只成年猫进行双侧备用根手术(切除双侧L1~L3和L7~S2 DRG,其中L6DRG作为备用背根)。术后当日开始针刺一侧L6脊神经后肢分布区的两组穴位,即足三里和悬钟、伏兔和三阴交,每天一次,每次30min,连续针刺7d后无菌条件下取出双侧L6 DRG进行体外培养,24h后全量换液,并将针刺侧的一部分培养孔的培养液分别用含有200ng/ml抗GDNF和NT4抗体培养液替换,分别作为抗GDNF和NT4抗体封闭组。7d后终止培养,于显微镜下用显微测微尺测量神经突起的长度;并用抗NSE抗体行免疫细胞化学ABC法染色进行神经元鉴定。结果显示:(1)免疫细胞化学染色可见体外培养的细胞95%以上为NSE阳性细胞,且为典型的体外培养的DRG神经元;(2)体外培养备用根组和抗GDNF抗体组神经突起的平均长度比针刺组的短(P〈0.05);(3)而针刺组神经突起的平均长度与抗NT-4抗体组间无差异(P〉0.05);两抗体组平均突起长度比备用根组的突起长(P(0.05)。本研究结果提示,针刺可促进体外培养DRG神经元突起的生长,进而可能与脊髓可塑性密切相关;内源性GDNF有促进DRG神经元突起生长的作用;而内源性NT4在DRG神经元突起生长中发挥的作用却不明显。 王特为 王廷华 周雪 张连双 徐新运关键词:针刺 GDNF NT-4 成年脑内神经干细胞的研究进展 被引量:4 2001年 李劲涛 冯忠堂 王廷华关键词:成年人 大脑 神经干细胞 即刻早期基因c-fos、c-jun与脊髓损伤 被引量:6 2002年 柯青 王廷华 李明关键词:即刻早期基因 C-FOS C-JUN 脊髓损伤