江苏省海洋生物技术重点建设实验室基金(HS07014)
- 作品数：8 被引量：30H指数：3
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- 相关机构：淮海工学院连云港中医药高等职业技术学校中国药科大学更多>>
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- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 农杆菌素MI15的分离、纯化及分子量测定
- 2009年
- 放射土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter)MI15菌株,属于生物I型。在平皿培养时,能够产生农杆菌素MI15,能抑制葡萄根癌土壤杆菌的生长。采用透析和DEAE纤维素柱离子交换层析纯化制备了MI15菌株分泌的农杆菌素MI15。经HPLC分析,此制备物纯度较高,可达到结构分析要求。紫外吸收光谱分析显示,该物质在260nm和280nm处均无洗脱峰,故认为该物质不是核酸、蛋白类似物。经红外吸收和元素分析,初步认定它是一种小分子有机物,质谱测定结果显示,农杆菌素MI15的分子量为368。
- 赵艳景张鹤龄
- 关键词：层析HPLC质谱
- 条斑紫菜藻蓝蛋白抗氧化作用研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究条斑紫菜藻蓝蛋白的抗氧化作用。方法蓝蛋白对超氧阴离子自由基清除的能力;使用Fenton体系测定其对羟自由基(.OH)清除的能力;使用DPPH法测定其对二苯代苦味酰自由基清除的能力。结果紫菜藻蓝蛋白对超氧阴离子O2-.的清除率为33.79%;对.OH的清除率为92.71%;对二苯代苦昧酰自由基清除能力,其IC50为0.86mg/ml。结论紫菜藻蓝蛋白有较强的体外抗氧化活性,为其下一步活性研究与开发利用提供一定的试验基础。
- 赵艳景胡虹王颖
- 关键词：条斑紫菜藻蓝蛋白FENTON体系抗氧化活性
- 暴露于异丙隆中文蛤差异表达基因的研究被引量：1
- 2009年
- 为了研究文蛤经异丙隆处理后引起的细胞基因表达变化,探索文蛤暴露于农药后分子水平上基因的开放、关闭或表达量的改变,以寻找和发现有价值的指示农药污染的生物标记物基因。在恒定温度(25℃)条件下驯化文蛤7d,将驯化后的文蛤分为2组(每组20个),给药组文蛤暴露于添加除草剂异丙隆的海水中处理30d,对照组文蛤暴露于天然海水中处理30d,用酸性酚-硫酸氰胍-氯仿提取法纯化文蛤鳃总RNA,用4种锚定引物,以总RNA为模板在反转录酶的作用下合成cDNA第一链,以cDNA第一链为模板,在锚定引物和随机引物的作用下连续进行2轮PCR反应,用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离PCR产物,银染法显色。对聚丙烯酰胺凝胶电泳显示的差异条带进行回收,并对差异基因片段进行第2次扩增,经琼脂糖电泳后回收基因片段。结果共得到cDNA扩增片段约400条,其中有60余种基因片段的表达发生了明显的差异。在文蛤适应除草剂污染过程中有12个基因表达上调,有11个基因表达下调,有22个基因片段只在试验组表达,有23个基因片段只在对照组表达。基因差异片段可能与指示农药污染的生物标记基因的表达有关。
- 赵艳景胡虹王颖
- 关键词：文蛤异丙隆DDRT-PCR聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
- 缢蛏YC-2蛋白的提取及抗氧化作用研究被引量：3
- 2010年
- 以新鲜缢蛏(Sinonovacula constricta)为材料,经水萃取、(NH4)2SO4盐析、DEAE离子交换层析、Sepharose CL-6B凝胶层析、冻干浓缩。结合SDS-PAGE电泳技术,硫代巴比妥酸(TBA)法初步鉴定各个组分的抗氧化活性,并用Bradford法进行蛋白的定量。结果表明,80%饱和度(NH4)2SO4盐析得到的组分经离子交换层析以及凝胶层析得到一个蛋白纯品YC-2,具有2个亚基,大亚基的分子质量为61.23 ku,小亚基的分子质量为45.39 ku,YC-2蛋白的分子质量为106.62 ku,而且其具有较高的抗氧化活性,在0.627 g/L时对.OH清除率达99.7%。
- 赵艳景裴波胡虹王颖
- 关键词：分离纯化抗氧化活性
- 条斑紫菜藻蓝蛋白的分离纯化及其抗衰老作用研究被引量：10
- 2012年
- 目的:分离纯化条斑紫菜藻蓝蛋白并对其进行抗衰老作用的研究。方法:以盐析沉淀法和Sephadex G-200凝胶过滤层析纯化条斑紫菜藻蓝蛋白,并对其热稳定性和酸碱稳定性进行研究。采用D-半乳糖致亚急性小鼠衰老模型,研究藻蓝蛋白的抗衰老作用。结果:在常温下,40%饱和度的硫酸铵盐析条件下,紫菜藻蓝蛋白纯度达到最大值1.73;紫菜藻蓝蛋白在30℃时、中性溶液环境时稳定性良好;藻蓝蛋白处理后均能显著提高衰老模型小鼠的胸腺指数、脾脏指数和血清中的SOD活性(P<0.05,P<0.01),显著降低血清中的MDA含量(P<0.05,P<0.0 1)。结论:紫菜藻蓝蛋白具有较强的抗衰老作用。
- 赵艳景汤云成
- 关键词：条斑紫菜藻蓝蛋白抗衰老胸腺指数脾脏指数
- 缢蛏蛋白组分Y_3的提取及抑癌活性研究
- 2011年
- 以新鲜缢蛏Sinonovacula constrzcta为材料,经25mmol/LTris-HCl(pH7.5,含0.14mol/LNaCl)缓冲液提取缢蛏粗蛋白、透析、DEAE离子交换层析、SepharoseCL-6B凝胶层析,得到1种具有抑癌生物活性的缢蛏蛋白组分Y3。SDS-PAGE电泳测得该蛋白组分的分子量约为64kD。采用MTT比色法检测Y3对4种肿瘤细胞增殖的影响。结果显示,Y3对Hela和BGC803细胞有明显的抑制作用,而对SKOV3和HepG2抑制作用不明显。此外,探讨了Y3对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力。结果显示,该蛋白组分清除自由基的能力很强,在浓度为100μg/ml时,Y3对羟基自由基清除率达到92.71%。在3μg/ml下,对超氧阴离子自由基的清除率达到59.73%。
- 赵艳景王晨
- 关键词：缢蛏分离纯化抗氧化活性抑癌
- 葛根抗氧化肽的分离及清除自由基活性研究被引量：4
- 2012年
- 目的:分离纯化葛根抗氧化肽并对其进行体外清除自由基活性的研究。方法:以野生葛根为实验材料,经30%的乙醇浸提、透析、冷冻干燥,进一步采用DEAE阴离子交换层析,反相高效液相色谱的方法,对葛根抗氧化肽进行纯化,对不同组分进行还原能力的测定,还原能力最强的命名为PE1。对PE1进行茚三酮反应和分子质量测定。采用邻苯三酚自氧化法、DPPH法、Fenton反应法检测PE1体外对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基的清除作用。结果:反相高效液相色谱检测PE1纯度,显示为单一峰,PE1与茚三酮反应呈阳性,分子质量约为746D,PE1在体外可以有效清除以上3种自由基。在质量浓度为0.652mg/mL时,羟自由基清除率可达到80.01%;在5mg/mL质量浓度条件下,对超氧阴离子自由基的清除率高达97.35%;在3.5mg/mL质量浓度条件下,对DPPH自由基的清除率达到75.02%,其IC50为2.83mg/mL。结论:PE1具有较强的清除自由基活性。
- 赵艳景张岩
- 关键词：抗氧化肽自由基
- 缢蛏多糖的提取及抗氧化作用研究被引量：12
- 2010年
- 以新鲜缢蛏的碎肉为材料,加水配制成一定比例的匀浆,利用超声波提取法对缢蛏碎肉匀浆进行多糖的提取。利用蒽酮—硫酸法对多糖得率进行计算。将得到的多糖粗品通过DEAE离子交换层析及G-75凝胶层析进一步分离纯化。通过邻苯三酚自氧化体系和Fenton体系测定所得样品的抗氧化能力。结果表明:利用超声波提取多糖的提取率为19.93%。多糖粗品通过DEAE离子交换柱,得到2个峰,峰1对超氧阴离子的清除能率为43.89%,质量浓度为1 mg/ml时,对.OH清除率为57.80%。峰2对超氧阴离子的清除能率为57.80%,质量浓度为1 mg/ml时,对.OH清除率为77.83%。将DEAE峰2进行G-75凝胶层析得到2个峰,峰1对超氧阴离子的清除能率为83.08%,质量浓度为1 mg/ml时,对.OH清除率为94.76%。峰2对超氧阴离子的清除能率为74.41%,质量浓度为1 mg/ml时,对.OH清除率为52.41%。
- 赵艳景胡虹王颖
- 关键词：缢蛏多糖分离纯化抗氧化能力
