国家自然科学基金(30070775)
- 作品数：12 被引量：114H指数：8
- 相关作者：佟晓杰孙晓红张彩顺刘承吉曹德寿更多>>
- 相关机构：中国医科大学首都医科大学中国医科大学附属第四医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 许旺细胞及其与三维支架的联合培养
- 2005年
- 目的:许旺细胞能够促进损伤的周围神经的再生过程。应用许旺细胞与组织工程材料联合培养,构建人工神经修复周围神经损伤,具有广阔的应用前景。因此,探讨许旺细胞的培养方法以及许旺细胞与三维支架的联合培养对组织工程化人工神经的构建具有重要意义。资料来源:应用计算机检索Medline1984-01/2004-01中有关许旺细胞培养以及组织工程材料的文章,检索词为“Schwanncellsculture,tissuengineeringmaterials,associationculture”,并限定文章语言种类为“English”;同时应用计算机检索中文期刊全文数据库和万方数据库199601/2004-12中有关许旺细胞培养以及组织工程材料的文章,检索词为“许旺细胞培养,组织工程材料,联合培养”,限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,重点选择介绍许旺细胞培养方法以及许旺细胞与三维支架联合培养的文献,对非随机试验予以排除。资料提炼:在所有检索到的文献中,排除非随机试验的文献以后,最终选择24篇最为相关的作为参考文献。其中有1篇重点介绍许旺细胞的作用,5篇重点介绍许旺细胞的培养方法,其余的主要研究许旺细胞与三维支架的联合培养。资料综合:许旺细胞的培养方法包括组织块法和酶消化培养法。可与许旺细胞进行联合培养的支架材料包括聚酯纤维、聚羟基乙酸、聚乳酸、聚羟基乙酸和聚乳酸共聚物、ZQ膜、壳聚糖等等。这些支架材料为人工神经的构建提供了丰富的原料,为应用组织工程化人工神经修复受损的周围神经奠定了基础。结论:应用组织块法和酶消化培养许旺细胞的技术已经基本成熟。对于那些可与许旺细胞进行联合培养的支架材料的研究,应当尽快由现今单纯的体外培养逐渐向动物实验过渡,为早日研制出合格的人工神经做进一步的努力。
- 贺政佟晓杰孙晓红
- 关键词：许旺细胞细胞培养组织工程化人工神经组织工程材料周围神经损伤细胞培养方法
- 种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物对大鼠坐骨神经缺损的修复作用被引量：14
- 2006年
- 目的观察种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物,桥接大鼠坐骨神经缺损后的神经再生。方法应用酶反复消化法与差速贴壁法体外分离培养乳鼠施万细胞;显微注射法将施万细胞种植到脱细胞同种异体神经移植物内;再应用种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经10 mm缺损。光镜、透射电镜和扫描电镜观察再生神经的形态结构、有髓神经纤维数量、平均髓鞘厚度并进行统计学分析。结果光、电镜观察到实验组(SCs+ARSN)的施万细胞在再生神经纤维中互相连结纵行排列成类似Büngner带样细胞链,对照组(ARSN)未见到施万细胞的链状排列。实验组再生有髓神经纤维的髓鞘厚度较对照组均匀且较厚,有髓神经纤维数量和平均髓鞘厚度明显多于对照组(P<0.05)。结论种植施万细胞的脱细胞同种异体神经移植物对缺损的坐骨神经再生有更加有效的促进作用。
- 孙晓红张岩佟晓杰贺政张旭
- 关键词：坐骨神经神经再生
- 脱细胞异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损促进神经肌结构重建和功能恢复的实验研究被引量：12
- 2005年
- 目的 探讨脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损对神经 肌结构重建和功能恢复的作用。 方法 用脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经 10mm缺损 ;称量术后 12周、2 4周实验组手术侧胫骨前肌湿重 ,并与对照组术侧该肌湿重进行比较 ;用电生理学方法检测再生神经传导速度及其对胫骨前肌的再支配作用 ;用AChE和AChE结合镀银染色观察胫骨前肌内神经和运动终板的再生。 结果 术后 12周、2 4周实验组胫骨前肌湿重与对照组相比无显著差异 ;再生神经传导速度与对照组相比 ,也无显著差异 ;术后 12周肌内见有AChE阳性反应的运动终板 ;2 4周运动终板AChE阳性反应加深 ,并整齐地排列于胫骨前肌的中上部形成终板带 ,经结合镀银染色后可见再生的神经束及其发出的分支与运动终板相连 ;肌电显示再生神经已支配胫骨前肌的运动。结论 脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损具有促进神经 肌结构重建和运动功能恢复的作用。
- 佟晓杰张彩顺曹德寿刘承吉于频
- 关键词：周围神经再生运动功能恢复
- 脱细胞同种异体神经移植物促进大鼠运动功能恢复的实验研究被引量：17
- 2003年
- 目的 检测脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经 10mm缺损后运动功能的恢复。方法 用脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经 10mm缺损 ,术后 12周、16周运用电生理及AchE结合镀银染色检测再生神经传导速度和腓肠肌的运动终板。自体神经移植作为对照组。结果 实验组术后 12周、16周再生神经传导速度与对照组相比 ,无显著性差异 ;术后 12周组织化学染色可见腓肠肌内有呈AchE阳性的运动终板 ;16周运动终板AchE阳性反应加深 ,并整齐地排列于腓肠肌的中上部形成终板带 ,经结合镀银染色后可见再生的神经束及发出的分支与运动终板相连。
- 张彩顺佟晓杰林峰刘承吉于频
- 关键词：周围神经再生运动终板
- 许旺细胞与脱细胞神经移植物共培养在周围神经损伤修复中的作用被引量：17
- 2006年
- 目的:观察体外分离、培养、纯化的许旺细胞对脱细胞神经移植物修复神经损伤的促进作用,为临床应用组织工程化神经修复周围神经缺损提供实验依据。方法:实验于2004-04/2005-04在中国医科大学组织工程实验室完成。纳入普通级雄性Wistar大鼠24只,体质量180～220g。随机分为实验组、空白对照组、自体移植对照组共3组,每组8只。分笼饲养。另纳入5～8d龄Sprague-Dawley乳鼠40只,取其双侧坐骨神经与臂丛神经。实验组大鼠右后腿用种植许旺细胞的ARSN桥接人为造成的神经缺损。空白对照组大鼠右后腿用单纯ARSN桥接人为造成的神经缺损。酶反复消化法与差速贴壁法分离和培养许旺细胞;许旺细胞与10mm长的脱细胞神经移植物共培养后,应用外科手术移植到大鼠坐骨神经缺损处,自体移植对照组大鼠右后腿用单纯切断的神经上下颠倒原位桥接人为造成的神经缺损。13周取材通过透射电镜和扫描电镜观察神经纤维的再生情况。结果:Wistar大鼠24只全部进入结果分析,没有脱失。①实验组较空白对照组的再生有髓神经纤维均匀,轴索略粗,髓鞘厚度有差别,部分神经纤维髓鞘还未形成板层结构,许旺细胞包绕神经纤维,轴索内微丝微管结构较清晰,无髓神经纤维直径较小,不均匀分布在有髓神经纤维之间,由一层纤维结缔包裹形成纤维束,实验组较自体移植对照组的髓鞘略薄,自体移植组再生神经纤维均较粗,许旺细胞包裹轴突形成排列规则、电子密度较高的髓鞘,髓鞘厚薄基本相同。②实验组可见大量许旺细胞呈双极梭形,并且首尾相连排列成链状或网状特征性分布。许旺细胞还可在神经纤维上的胶原丝上附着。③实验组有髓神经纤维数、髓鞘厚度、G率(有髓纤维总面积/神经干总面积)接近自体移植对照组,差异无显著性意义[(5344±592),(5514±373);(3.13±0.16),(3.19±0.25)μm;(48.43±3.62)%
- 孙晓红窦文波佟晓杰张旭贺政王虹张彩顺
- 关键词：许旺细胞神经组织共同培养技术神经再生
- 周围神经损伤与组织工程修复的研究进展被引量：7
- 2004年
- 近年来 ,周围神经损伤组织工程修复的研究取得了很大的进展。动物实验与临床研究主要聚焦于寻找理想的人工神经移植替代物、神经导管和种子细胞。神经导管有非降解或可降解两种 ,神经移植物有自体神经、同种异体神经及异种神经移植物 ,作为桥接神经缺损的支架有各自的优点与缺点。同时 ,培养、种植一定数量与高纯化度的具有分泌多种神经营养因子活性的施万细胞也是提高修复神经损伤效果的关键。
- 孙晓红佟晓杰黄威
- 关键词：周围神经损伤周围神经移植自体神经移植
- 脱细胞同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损的形态学观察被引量：14
- 2005年
- 目的: 研究脱细胞处理的同种异体神经移植物桥接大鼠坐骨神经缺损后, 再生神经的形态学变化。方法: 光镜、电镜观察移植物内再生神经的超微结构变化, 免疫组织化学技术观察再生神经中S-100蛋白表达,并对再生神经的纤维数量、髓鞘厚度等进行统计学分析。结果: 实验组和自体神经移植对照组的移植段内见有由束膜和外膜包被的大量再生神经纤维, 两组比较再生神经的纤维数量、髓鞘厚度、有髓纤维占有的面积均无显著性差异; 两组移植段神经中的S-100阳性施万细胞数、形态和排列等方面也无明显差异。结论: 脱细胞同种异体神经同自体神经一样,对缺损的坐骨神经再生具有促进作用。
- 孙晓红佟晓杰张彩顺王虹张旭
- 关键词：神经再生S-100蛋白
- 周围神经再生中人工再生管道的研究进展被引量：2
- 2002年
- 周围神经损伤造成的长段神经缺损的临床修复一直是临床工作中的一个难题。随着对神经再生理论认识的深入 ,应用人工再生管道做桥接物 ,引导再生轴突长向靶器官已取得了一定的进展。
- 刘承吉佟香芝佟晓杰
- 关键词：周围神经损伤周围神经再生
- 脱细胞异体神经基质移植物对脊髓前角运动神经元的保护作用被引量：7
- 2005年
- 目的探讨脱细胞神经基质移植物异体移植对脊髓前角运动神经元的保护作用。方法W ist-ar大鼠30只,10只用化学提取法制备坐骨神经脱细胞基质移植物;另20只分为实验组(坐骨神经缺损移植物桥接组)和对照组(坐骨神经缺损组),每组10只。动物饲养3到4个月后取移植物、脊髓腰6-骶1节段和术侧腓肠肌,做HE、尼氏和AchE结合镀银染色以及电镜标本,进行组织学和超微结构观察,并对脊髓前角细胞的数量做统计学分析。结果实验组动物移植术后3到4个月术侧下肢行走时,后蹬动作有力,足趾能分开,步态趋于正常;针刺足底有逃避动作。对照组动物术侧下肢的运动和感觉功能未见恢复。实验组动物的移植物内见有大量再生的神经纤维,髓鞘结构清晰,腓肠肌内见有再生的神经纤维束和运动终板。实验组移植侧和对照组缺损侧脊髓腰6到骶1节段前角外侧群细胞的数量比正常侧减少,尤以对照组为甚。实验组移植侧前角细胞比正常侧的前角细胞数减少而移植侧前角细胞数比对照组缺损侧明显减少(P<0.01)。结论脱细胞异体神经基质移植物桥接周围神经缺损对运动神经元胞体的存活具有良好的保护作用。
- 刘金超林晓萍佟晓杰孙晓红张旭
- 关键词：神经再生脊髓前角细胞
- 脱细胞同种异体神经移植物的制备及成分分析被引量：16
- 2004年
- 目的 探讨脱细胞同种异体神经移植的制备方法及其含有的成分。方法 采用组织工程化低渗脱细胞方法制备神经异体移植物 ,光电镜观察其结构特征 ;用免疫组织化学法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析神经异体移植物的成分。结果 正常的 (天然的 )周围神经经脱细胞处理后 ,清除了雪旺细胞、神经外膜和束膜的细胞 ,以及神经纤维的髓鞘和轴突 ,保存了由雪旺细胞基底膜管以及神经外膜和束膜的细胞外基质构成的三维支架结构。成分分析结果显示 ,含有LN、FN以及生长相关蛋白GAP 4 3和 6 5kDa蛋白等促进和诱导受体损伤神经再生的重要成分。结论 脱细胞异体神经移植物含有诱导和促进神经再生的相关蛋白 ,有利于受损神经的再生。
- 孙慧哲佟晓杰曹德寿王振宁
- 关键词：脱细胞神经再生神经组织工程周围神经缺损
