西京医院学科助推计划(XJZT07M09)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：穆士杰安群星徐志凯雷迎峰陈蕤更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：西京医院学科助推计划陕西省科学技术研究发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生更多>>
- 天花粉蛋白的聚乙二醇定点修饰及其性质的初步研究被引量：6
- 2009年
- 用聚乙二醇(PEG)定点修饰天花粉蛋白(TCS),并比较了修饰前后TCS的生物活性、免疫原性及药代动力学等诸多性质.选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点KR173-174进行定点突变,并将所构建的突变体TCSKR173-174CG在大肠杆菌中表达及纯化.通过该突变体第173位引入的半胱氨酸残基进行PEG定点修饰.通过比较研究,分析所构建的PEG修饰型TCS的DNA酶活性、致核糖体失活活性、免疫原性、急性毒性以及药代动力学性质,研究结果表明,所构建的突变型TCS(mTCS)的活性与野生型TCS(wTCS)活性几乎相当,而免疫原性已显著降低.PEG修饰型TCS虽有活性下降,但其免疫原性、急性毒性以及药代动力学性质得到显著提升.表明通过基因工程及化学修饰方法改造TCS是可行的,所构建的突变型及PEG修饰型TCS值得进一步研究.
- 安群星雷迎峰杨敬黎志东穆士杰徐志凯
- 关键词：天花粉蛋白免疫原性药代动力学人类免疫缺陷病毒
- 天花粉蛋白突变体TCS_(KR173-174CG)生物活性及免疫原性研究
- 2008年
- 目的:对中草药成分天花粉蛋白(TCS)进行定点突变,使其免疫原性有所降低而生物活性不受或少受影响。方法:选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点(KR173-174)进行定点突变,并将所构建的突变体(TCSKR173-174CG)基因在大肠杆菌中表达及纯化。随后与野生型TCS(wTCS)比较,分析其DNA酶活性、致核糖体失活活性、免疫原性和急性毒性。结果:初步检测发现,所构建的突变型TCS活性与wTCS活性几乎相当,而免疫原性有所降低。结论:通过该方法改造TCS是可行的,有可能为抗HIV治疗提供一种高效、低毒、廉价的药物。
- 安群星穆士杰张献清陈蕤雷迎峰余瑞刘宁徐志凯
- 关键词：基因转变
- 天花粉蛋白的定点突变及聚乙二醇修饰
- 2008年
- 目的对天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)进行定点突变及聚乙二醇(PEG)修饰,并对修饰产物进行DNA酶活性分析。方法选择TCS分子上可能的抗原决定簇位点(YFF81-83和KR173-174)进行定点突变,将所构建的两个突变体(TCSYFF81-83ACS和TCSKR173-174CG)在大肠杆菌中表达,并纯化表达产物。通过第82位和173位引入的半胱氨酸残基,分别对突变体蛋白进行PEG定点修饰。通过与突变型TCS比较,分析两个PEG修饰型TCS的DNA酶活性。结果突变的TCS经酶切鉴定及测序分析,证明质粒构建正确,表达的目的蛋白相对分子质量约为30000,经PEG修饰后,相对分子质量约为40000。初步分析显示,与突变型TCS相比,所构建的两个PEG修饰型TCS也显示出类似DNA酶活性。结论成功进行了TCS的定点突变及PEG修饰,为基因工程及化学修饰方法改造TCS提供了一条可行的途径。
- 安群星雷迎峰穆士杰张献清陈蕤夏爱军陈晨易静吴原茹徐志凯
- 关键词：天花粉蛋白定点突变聚乙二醇修饰
