国家重点基础研究发展计划(2013CB531802)
- 作品数:64 被引量:645H指数:15
- 相关作者:郑晓珂冯卫生匡海学王小兰袁培培更多>>
- 相关机构:河南中医药大学黑龙江中医药大学河南中医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划博士科研启动基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 独行菜LaMCT基因的克隆、序列分析与原核表达被引量:3
- 2016年
- 强心苷作为药用植物独行菜(Lepidium apetalum)的活性成分,其化学和药理学研究已有良好的基础,但其生物合成途径目前仍不清楚。该研究以独行菜幼苗为材料,通过分析独行菜转录组数据,设计特异性引物,PCR扩增得到了强心苷生物合成MEP途径的关键酶2-C-甲基赤藓醇-4-磷酸胞苷酰转移酶(MCT)基因的开放阅读框(ORF),命名为LaMCT(Genbank注册号KT832554),并进行序列分析和原核表达。序列分析结果表明:LaMCT基因ORF全长为912 bp,编码304个氨基酸。亚细胞定位和保守结构域分析结果表明:LaMCT蛋白位于叶绿体中,不含信号肽,没有跨膜区,含有类异戊二烯合成酶保守结构域(isoprenoid synthase domain)。系统进化树结果表明:LaMCT蛋白与拟南芥的MCT蛋白具有94%的序列相似性,亲缘关系较近。通过构建pET-32a-LaMCT原核表达载体,成功在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达LaMCT重组蛋白,并得到了纯化的LaMCT重组蛋白。该研究首次从独行菜中克隆了LaMCT基因,建立其稳定的原核表达体系,为LaMCT蛋白抗体的制备以及研究LaMCT基因在独行菜强心苷类化合物生物合成途径中的功能奠定了基础。
- 赵乐马利刚李晓阳冯卫生郑晓珂
- 关键词:独行菜MCT基因克隆原核表达
- 铁死亡在心血管疾病中的作用及中药干预研究进展被引量:4
- 2023年
- 在心血管疾病(CVDs)的发病机制中多种细胞死亡形式如凋亡、坏死、焦亡、自噬和铁死亡等在心脏发育和心血管稳态中是长期存在并且是必不可少的。铁死亡是一种新型的程序性细胞死亡,由铁依赖性脂质过氧化物的积累引起。铁死亡已被证明参与了心血管疾病的发生和发展过程,在心肌病、心肌梗死(MI)、缺血/再灌注损伤(IRI)、心力衰竭(HF)和动脉粥样硬化(AS)中起着重要作用,调节细胞与铁死亡之间的平衡可能成为药物干预疾病的重要靶点。本文主要围绕铁死亡在心血管疾病中的调控机制及其中医药研究方面进行探讨,为靶向铁死亡作为心血管疾病的预防和治疗提供新的科学依据与策略。
- 付佳琪于栋华陈平平卢芳王宇刘树民
- 关键词:心血管疾病中药
- 4种上焦水饮内停动物模型的比较被引量:1
- 2018年
- 目的:采用不同造模方法,建立符合中医证候的上焦水饮内停中医模型,并通过不同模型比较,筛选出最佳的造模方法。方法:将大鼠随机分为空白组(NC组)、模型一组(M1组)、模型二组(M2组)、模型三组(M3组)、模型四组(M4组),采用腹部皮下注射ISO、大鼠气管插管、寒冷刺激复合因素干预诱导上焦水饮内停动物模型。造模结束后,检测各组大鼠的心脏指数、肺脏指数、左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、肺通透指数(LPI)、肺湿重/干重的比值(W/D)及死亡率。结果:与NC组比较,M1、M3组大鼠的心脏指数、肺脏指数、W/D、LVEF、LVFS、LPI均显著升高(P<0.01,P<0.05),心、肺组织发生变化,死亡率分别为83%、55%。结论:在符合中医理论的前提下,M3的造模方法为最佳造模方法。
- 郑晓珂孙亚萍孙亚萍司彦坡杨胜利冯卫生
- 关键词:上焦水饮内停动物模型
- 白术配伍桑白皮对肾病综合征大鼠尿液代谢组学的影响被引量:12
- 2018年
- 目的:通过对阿霉素诱导的肾病综合征大鼠尿液代谢物谱的检测,探讨白术配伍桑白皮对肾病综合征大鼠体内代谢的干预作用。方法:采用超高效液相-四级杆串联飞行时间质谱(UHPLC-QTOF-MS)技术分析正常对照组、模型组、贝那普利组、白术组、桑白皮组及白术配伍桑白皮组大鼠的尿液样本。通过SIMCA-P 13.0软件进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA),研究白术配伍桑白皮后对肾病综合征大鼠体内代谢的影响并确定与之相关的潜在生物标志物,构建代谢网络。结果:与模型组比较,给药后大鼠尿液代谢轮廓趋向正常对照组,32个与肾病综合征相关的差异标志物水平有向正常水平回调的趋势,且白术配伍桑白皮治疗相比于仅给白术或桑白皮有更为明显的回调趋势。受干扰的代谢通路主要涉及色氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、2-氧代羧酸代谢等。结论:白术与桑白皮配伍应用后,在一定程度上可改善肾病综合征模型大鼠体内的代谢紊乱,且相比于单独使用白术或桑白皮有更好的疗效。
- 白志尧杨雁芸周宁吴广操冯卫生郑晓珂
- 关键词:代谢组学白术桑白皮配伍肾病综合征
- 桑白皮各化学拆分组分对阿霉素肾病大鼠水钠潴留的影响被引量:7
- 2016年
- 目的:探讨桑白皮各化学拆分组分对阿霉素肾病大鼠水钠潴留的影响及其作用机制。方法:采用一次性尾静脉注射阿霉素(6.5 mg·kg^(-1))建立阿霉素肾病模型,造模7 d后开始ig给药,连续给药21 d。实验期间于第7,14,21,28天留取尿液,检测大鼠尿量,24 h尿蛋白,尿钠及尿渗透压。给药3周后,测定各组大鼠血液渗透压、电解质及血液中总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),白蛋白(ALB),尿素氮(BUN),肌酐(Cr),抗利尿激素(AVP)的含量,同时计算肾脏指数,并检测肾脏中抗利尿激素V2受体(AVPV2R),水通道蛋白-2(AQP2)的水平及Na+-K+-ATP酶的活性等指标,蛋白免疫印迹法(Western bolt)检测肾脏AQP2的表达。结果:桑白皮水煎液能够降低阿霉素肾病大鼠的尿蛋白含量,改善低蛋白血症与高脂血症,并且以低剂量(476 mg·kg^(-1))效果最好;各化学拆分组分中桑白皮30%乙醇洗脱组分能够显著降低阿霉素肾病大鼠24 h尿蛋白,TC,TG,AVP,AVPV2R,AQP2含量,降低Na+-K+-ATP酶活性及肾脏指数(P<0.05,P<0.01),能够明显增加阿霉素肾病大鼠ALB,尿量,尿钠及尿渗透压(P<0.05,P<0.01)。结论:桑白皮水煎液能够显著改善阿霉素肾病大鼠的各项病理症状,其30%乙醇洗脱组分为最佳有效部位,且其改善阿霉素肾病大鼠水钠潴留的机制可能与调节血浆AVP,肾脏AVPV2R,AQP2表达及Na+-K+-ATP酶活性有关。
- 郑晓珂周静于洋王小兰黄岩杰吴广操曾梦楠匡海学冯卫生
- 关键词:桑白皮化学拆分组分水钠潴留
- 中药黄精的化学成分及药理活性研究进展
- 黄精属植物为百合科(Liliaceae)多年生草本植物,全球有40余种,主要分布于北温带和北亚热带,我国约有31种,广泛分布于除南方热带以外的广大地区,其中黄精Polygonatum sibiricum Deler.ex...
- 陈辉郝志友孙彦君冯卫生王彦志
- 关键词:化学成分药理活性
- 淫羊藿及其药对研究进展被引量:4
- 2023年
- 淫羊藿作为临床常用中药,近年来围绕基于网络药理学的淫羊藿药对、传统淫羊藿药对配伍实验研究、淫羊藿药对配伍前后化学成分变化的研究等方面开展的现代研究,为系统揭示含淫羊藿药对应用的内涵阐释以及其配伍应用的科学性提供了参考和依据。淫羊藿药对的现代研究现状与进展及淫羊藿药对配伍理论的研究提供重要依据和方法,为淫羊藿药对使用规律,配伍理论、临床应用等方面提供新方向与新思路。
- 付佳琪于栋华卢芳于纯淼陈平平王宇刘树民
- 关键词:淫羊藿
- 葶苈子水部位组分对心衰大鼠物质代谢的影响
- 目的:检测葶苈子水部位组分(washing elution composition of Descurainiaesophia,DS-WE)对心衰大鼠物质代谢障碍的影响,为DS-WE的性味评价奠定基础。方法:各组给药4周...
- 克迎迎张国顺杨翠兰袁培培王小兰郑晓珂冯卫生
- 关键词:心衰
- 文献传递
- 车前子水提物雌激素样作用筛选及机制探讨被引量:9
- 2016年
- 目的:筛选车前子水提物雌激素样活性,并探讨其作用机制。方法:采用小鼠子宫增重实验和人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖实验对车前子水提物雌激素样活性进行筛选;接着采用ICI182,780拮抗实验及以p ERE-TAL-luc,pβgal-Control,p CXN2-h ERα或p CXN2-h ERβ共转染的HEK293细胞株为模型,结合ERE调控的报告基因luc瞬时表达检测技术,初探车前子雌激素样作用的机制;运用RT-PCR技术,检测车前子对小鼠子宫中雌激素受体ERα,ERβmRNA表达的影响,探讨车前子发挥雌激素样作用的分子机制。结果:车前子水提物低、高剂量均可显著提高性未成熟雌性小鼠的子宫系数(P<0.01或P<0.05);且能促进MCF-7细胞的增殖(P<0.01或P<0.05),但该促增殖作用可被雌激素受体阻断剂ICI182,780抑制;ERE调控的报告基因瞬时表达结果显示,分别由ERα和ERβ介导时,车前子水提物的标准化荧光素酶活性都显著高于正常组(P<0.01);同时,车前子水提物可以显著增加小鼠子宫中ERαmRNA的表达(P<0.01),也可增加ERβmRNA的表达但与正常组比无统计差异。结论:首次发现车前子具有雌激素样活性,且是通过雌激素受体ERα和ERβ共同介导发挥。车前子在体内发挥雌激素样作用的分子机制可能为促进ERαmRNA的表达。
- 王晓帆冯卫生马利刚韩杜菀王小兰时博刘小盼娄永李鹏飞匡海学郑晓珂
- 关键词:雌激素受体报告基因RT-PCR
- 麻黄水煎液及其拆分组分利尿作用的研究
- 目的:研究麻黄的利尿作用,并初步探讨其作用机制。方法:大鼠代谢笼法,观察麻黄水煎液及各拆分组分对大鼠尿量的影响。微板法检测大鼠尿液氯(Cl)、钾离子(K)水平;比浊法检测大鼠尿液钠(Na)水平;ELISA法检测肾素(Re...
- 李苗曾梦楠吴广操韩杜菀杨胜利张靖柯克迎迎王小兰冯卫生郑晓珂
- 关键词:麻黄利尿作用
- 文献传递