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国家基础科学人才培养基金(J1210069): 作品数：49 被引量：247H指数：8; 相关作者：胡宝忠徐永清高继国李凤兰苍晶更多>>; 相关机构：东北农业大学哈尔滨学院黑龙江省农业科学院更多>>; 发文基金：国家基础科学人才培养基金国家自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>

野生大豆碳酸盐胁迫应答基因GsMIPS2的克隆及功能分析被引量：3: 2015年; 为挖掘野生大豆(Glycine soja L.G07256)耐碳酸盐关键功能基因,利用前期高通量转录组测序数据,从构建的碳酸盐胁迫基因表达谱中,选取了一个碳酸盐胁迫下显著上调表达的肌醇-1-磷酸合酶类基因。采用同源克隆的方法,获得该基因的全长cDNA,命名为GsMIPS2。实时荧光定量PCR结果显示该基因受碳酸盐胁迫诱导表达,并且其表达量具有组织特异性。将GsMIPS2基因转化拟南芥,并结合拟南芥中T-DNA插入突变体atmips2来验证其耐碳酸盐功能。结果表明,碳酸盐胁迫条件下,GsMIPS2超量表达拟南芥种子萌发率显著高于野生型,而拟南芥突变体atmips2种子萌发率显著低于野生型。上述结果表明,GsMIPS2基因在植物应答碳酸盐胁迫过程中起重要作用。; 陈晨孙晓丽刘艾林端木慧子于洋肖佳雷朱延明; 关键词：野生大豆

三种东北常见乳汁植物乙醇提取物杀虫性研究被引量：3: 2016年; 对三种中国东北地区常见乳汁植物:萝藦科的萝藦(Metaplexis japonica)、菊科的蒲公英(Taraxacum mongolicum)、兴安毛莲菜(Picris davarlca)的乙醇提取物进行杀虫性研究。分别采用微量点滴法、饲喂法测定了三种植物乙醇提取物对黄粉虫(Tenebrio molitor)三龄幼虫的毒杀活性,结果显示:三种乳汁植物乙醇提取物对黄粉虫三龄幼虫具有一定的毒性,毒性从强到弱依次为萝藦、蒲公英、兴安毛莲菜。萝藦、蒲公英、兴安毛莲菜微量点滴法对黄粉虫三龄幼虫的半数致死量LD_(50)分别为618.07、865.84、1 184.17μg/只。; 冯旭韩萌萌徐永清胡宝忠; 关键词：乙醇提取物

外源ABA对冬小麦越冬期蔗糖代谢的影响被引量：21: 2013年; 以抗寒品种‘东农冬麦1号’和冷敏感品种‘济麦22’为试验材料,在三叶期时对叶片喷施ABA。在冬小麦越冬期间对叶片和分蘖节取样,研究外源ABA对越冬期低温下冬小麦的蔗糖含量及蔗糖代谢相关酶活性的影响。结果表明,外源ABA处理使低温下2个冬小麦品种积累了更多的蔗糖,尤其是‘东农冬麦1号’的分蘖节。零上低温时外源ABA促进了尿苷二磷酸-葡萄糖焦磷酸化酶(UGP)在蔗糖的合成中起主要作用,在零下低温时外源ABA则促进了UGP在蔗糖分解中起作用;外源ABA提高了‘东农冬麦1号’叶片和分蘖节以及‘济麦22’分蘖节中蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶的活性,但‘济麦22’叶片中这两种酶的活性则受到ABA的抑制;外源ABA也不同程度地促进了2个小麦品种叶片和‘济麦22’分蘖节中酸性转化酶和碱性转化酶活性的提高,但却抑制了‘东农冬麦1号’分蘖节中两种酶活性的提高,表明抗寒性强的‘东农冬麦1号’对外源ABA可能更加敏感,其越冬器官分蘖节保持了较高的蔗糖水平,其蔗糖合成能力的提高将有利于冬小麦植株抵御低温,进而维持植株的存活。; 刘丽杰苍晶于晶王健飞黄儒徐琛张成亮; 关键词：冬小麦越冬期蔗糖含量蔗糖代谢相关酶

北细辛丁香酚合成酶基因克隆及其表达分析被引量：1: 2021年; 丁香酚合成酶(eugenol synthase,EGS)是北细辛(Asarum heterotropoides)主要活性成分甲基丁香酚体内合成途径中的关键酶之一。该研究根据北细辛转录组数据库中筛选到的序列设计特异引物,以RT-PCR法扩增获得北细辛丁香酚合成酶基因(AhEGS)的开放阅读框(ORF)序列,进行了相应的生物信息学分析。同时运用实时定量PCR法分析AhEGS在不同发育时期(幼叶期、花期、果期)和不同组织部位(叶、根茎、根)中的表达谱,并进行原核表达分析。结果显示:(1)AhEGS基因ORF序列长为951 bp,编码316个氨基酸,理论分子量为34.93 kD,等电点为6.19,AhEGS蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽序列;同源序列比对发现,北细辛AhEGS与月季RcEGS(AFQ98278.1)同源性最高。(2)实时定量PCR分析表明,AhEGS基因在北细辛幼叶期的根中表达量最高。(3)成功构建了原核表达载体pET28a-AhEGS-BL21,经pET28a-AhEGS重组子转化E.coli BL21(DE3),SDS-PAGE检测显示在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中诱导产生了35 kD左右的特异性蛋白,与理论分子量一致;最佳诱导条件为16℃、14 h,IPTG浓度为0.2 mmol/L。该研究首次克隆了北细辛的EGS基因,构建了原核表达载体,筛选出该蛋白最佳诱导条件,研究结果为北细辛甲基丁香酚代谢工程的应用奠定基础。; 梁岩岩王亚男张银萍王鹰李强吴秀菊; 关键词：北细辛原核表达

“植物生理学与人类生活”视频公开课建设的实践与思考: 2014年; 本文从视频公开课建设的指导思想、课程设计的科学性、授课内容的准确性、授课方式的灵活性,以及后期制作的严谨性等方面简要介绍了在"植物生理学与人类生活"视频公开课建设中的经验和体会,以期为同类课程建设提供借鉴和参考。; 苍晶张达于晶徐庆华王军虹李富恒鞠铁柱; 关键词：植物生理学视频公开课

盐胁迫对有机番茄萌发及苗期生理特性的影响被引量：5: 2015年; 以有机番茄品种“妙红”和对照番茄品种“佳人”为试材，在番茄萌发期设定NaCl溶液浓度为0、30、60、90、120mmol／L，幼苗期设定NaCl溶液浓度为0、50、100、150、200mmol／L，研究不同浓度NaCl溶液对“妙红”和“佳人”萌发期和幼苗期的生理特性的影响。结果表明：在种子萌发期，NaCl溶液浓度为30mmol／L时，“妙红”的发芽率和地上部鲜重与对照差异不显著（P〉0．05），在NaCl溶液浓度为30-120mmol／L时，“妙红”和“佳人”的发芽率、发芽势、地上部鲜重和地下部鲜重均显著降低（P〈O．05）；在幼苗期，“妙红”和“佳人”的超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性、丙二醛（MDA）含量与盐浓度的大小呈正相关。在NaCl溶液浓度为50-200mmol／L时，“妙红”的SOD、POD、CAT活性和可溶性蛋白质含量都显著高于“佳人”，而MDA含量显著低于“佳人”。在不同盐浓度处理下对2个番茄品种生理指标测定的变化规律表明，“妙红”耐盐性强于“佳人”，为耐盐育种的推广和有机栽培提供了参考依据。; 刘丹胡宝忠徐永清李凤兰李飞周晶蔡振学王明晶王旭; 关键词：有机番茄 NACL胁迫萌发期苗期

苏云金芽胞杆菌V4菌株cry杀虫基因的鉴定、表达及杀虫活性分析被引量：2: 2014年; 旨在给生物防治提供更多的基因资源,以从本实验室分离的300株苏云金芽胞杆菌基因组为模板,利用cry1类全长通用引物进行PCR cry1类基因鉴定。经过PCR-RFLP鉴定出菌株V4含有cry1Ea基因,进一步研究发现该菌株还含有cry2Aa基因,并成功克隆到了这两个新基因,被Bt国际命名委员会正式命名为cry1Ea12和cry2Aa16。将两种基因在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达,表达蛋白进行杀虫活性测定,结果表明两种蛋白杀虫活性不理想,但对试虫存在明显的体重抑制,而V4菌株蛋白具有较高的杀虫活性。; 何宝楠李海涛刘荣梅王博高继国; 关键词：苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白

Os-miR1435基因对水稻的遗传转化及耐冷功能鉴定被引量：3: 2014年; MicroRNA(miRNA)在植物对各种逆境胁迫的反应中发挥重要的作用。本研究室在前期研究中,通过基因芯片技术构建了水稻冷胁迫miRNA基因表达谱,并筛选获得了冷胁迫诱导表达的miRNA基因2个——Os-miR1435和Os-miR535。本研究针对Os-miR1435基因,首先采用USERTM技术构建植物超量表达载体,采用农杆菌介导法侵染水稻愈伤组织,获得转基因水稻株系。通过对比野生型和转基因水稻植株的生长发育及农艺性状,发现Os-miR1435基因的超量表达降低了转基因水稻的结实率。通过对比野生型和转基因水稻在种子萌发期和幼苗期冷胁迫处理表型,表明Os-miR1435基因没有影响冷胁迫处理下水稻种子的萌发和幼苗生长。进一步采用psRNATarget软件预测了Os-miR1435的靶基因,通过Real-timePCR分析了靶基因在野生型和转基因植株中的表达量差异,并对靶基因进行了进化分析。本研究将为进一步深入研究Os-miR1435的生物学功能奠定重要的基础。; 孙明哲崔娜孙晓丽肖佳雷吕德康朱延明; 关键词：MIRNA 水稻冷胁迫转基因

膨胀素对根系建成影响的研究进展被引量：2: 2017年; 膨胀素(exp ansin)又称扩张素或扩张蛋白,是诱导植物细胞壁松弛的一种蛋白质,亦是细胞壁松弛与伸展的调节剂,对植物根系形态的建成有一定的调控作用。本文主要概述了膨胀素基因家族的发现、结构、进化及其作用机制,从植物根系顶端分生组织、侧根及根毛的发育等方面阐明了膨胀素对根系生长的调节作用,以及有关影响膨胀素在根中表达调控因素的研究进展,为深入了解膨胀素对植物根系建成及其调控机制的研究提供理论依据。; 李飞李凤兰姚树宽董佳敏蔡振学周晶赵巧芩徐永清胡宝忠; 关键词：植物根系膨胀素根系发育

北细辛AhOMT1基因的克隆及原核表达分析: 2022年; 为进一步挖掘甲基丁香酚合成相关酶基因,解析北细辛次生代谢途径,根据北细辛转录组数据库信息,筛选和克隆了AhOMT1基因,并进行了相应的生物信息学分析及原核表达分析。结果表明,AhOMT1基因包含的开放阅读框为1089 bp,编码362个氨基酸,理论分子质量为40.23 ku,等电点为5.34,AhOMT1蛋白为亲水性蛋白,无跨膜结构,无信号肽序列;AhOMT1基因具有二聚化结构域与甲基转移酶结构域,AhOMT1与催化类黄酮、丁香酚类化合物的O-甲基转移酶的同源性较高;构建pET-32b-AhOMT1原核表达载体,成功诱导表达约60 ku的重组蛋白;确定了最佳诱导条件是0.2 mmol/L IPTG,16℃诱导16 h,该诱导条件下的重组蛋白多以可溶性蛋白形式存在;使用Ni^(2+)树脂分离纯化AhOMT1蛋白,以200 mmol/L咪唑洗脱可得到最大量的蛋白。该研究首次克隆了北细辛AhOMT1基因,构建原核表达载体,筛选出AhOMT1蛋白最佳诱导条件。; 王亚男梁岩岩严文培张银萍李强吴秀菊; 关键词：北细辛基因克隆生物信息学分析原核表达

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