上海市科学技术发展基金(003912076)
- 作品数:3 被引量:24H指数:3
- 相关作者:陈明杰潘迎捷孙晓红姚泉洪王美艳更多>>
- 相关机构:上海市农业科学院南京农业大学上海水产大学更多>>
- 发文基金:上海市科学技术发展基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 含绿色荧光蛋白及trp3^(iar)基因的草菇表达载体的构建被引量:10
- 2006年
- 分别用限制性内切酶EcoR I和HindIII酶切质粒pBGgHg,将切下的含双孢蘑菇gpd启动子、EGFP基因和35S终止子的碱基序列连接到含Ap抗性的pBSK II上,再将这一段序列切下连接到含kan抗性的pCAMBIA1300载体上,形成中间质粒载体YH2873。用限制性内切酶HindIII分别酶切质粒YH2873和质粒pDB06,将从pDB06切下的trp3iar基因连接到中间质粒载体YH2873上,得到表达载体pSAGF。中间载体pYH2873经限制性内切酶EcoR I和HindIII酶切,电泳后显示1.3 kb的目的片断和9 kb的载体片断,表达载体pSAGF经限制性内切酶HindIII酶切,电泳后显示4 kb的trp3iar基因的目的片断和10 kb的载体片断,进一步测序证明重组质粒连接正确,成功构建了草菇的表达载体pSAGF。
- 孙晓红姚泉洪陈明杰潘迎捷
- 关键词:草菇EGFP基因
- 草菇低温诱导蛋白分离纯化及其部分性质的测定被引量:5
- 2003年
- 采用硫酸铵分级沉淀和制备电泳分离技术,从低温处理过的草菇菌丝中分离纯化得到三种低温诱导蛋白,分别命名为CspDZG1 ,CspDZG2 ,CspDZG3。IEF测定了等电点,分别为3.7,4.4,4.4。SDS-PAGE结果表明,CspDZG1 ,CspDZG2由一条多肽组成,分子量分别为56kD,54.5kD;CspDZG3由两个亚基组成,分子量分别为54.5 kD,68 kD。经S. aureus V8蛋白酶酶解后,测定了N端氨基酸序列。
- 戴志刚陈明杰潘迎捷
- 关键词:等电点分子量
- 草菇冷诱导相关基因及其上游序列结构分析
- 在利用利用差异显示技术分离获得草菇低温特异DNA片段基础上,通过采用PCR标记技术对获得的低温特异性片段进行DIG标记,以此为探针,对草菇cDNA文库进行筛选,获得阳性克隆,对阳性克隆进行 DNA测序及序列的比较分析发现...
- 孙晓红冯爱萍汪虹陈明杰潘迎捷
- 关键词:草菇低温诱导基因上游调控序列
- 文献传递
- 草菇低温应答研究
- 温度是生物生长的必要条件,然而低温却是限制农作物生产的重要因素,按照低温的不同程度,低温对生物的伤害可分为冷害(Chilling injury;零上低温对植物的伤害)和冻害(freezing injury;零下低温对植物...
- 陈明杰谭琦曹晖王南凌霞芬黄为一潘迎捷
- 关键词:草菇低温诱导基因蛋白酶
- 文献传递
- mRNA差别显示技术分离草菇低温诱导基因
- 本文报道采用改良的mRNA差别筛选法,通过选用3’锚定引物和18—25碱基的PCR随机引物组合,以琼脂糖凝胶电泳,EB显色替代聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影,对低温处理草菇(Volvariella volvacea)及正...
- 陈明杰谭琦曹晖王南黄为一潘迎捷
- 关键词:草菇
- 文献传递