国家重点基础研究发展计划(2012CB517502)
- 作品数：32 被引量：162H指数：7
- 相关作者：洪天配魏蕊黎健刘烨杨进更多>>
- 相关机构：北京大学第三医院中国医学科学院基础医学研究所卫生部北京老年医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miRNA-152和miRNA-200s在IL-6诱导的肝胰岛素抵抗中的作用
- 2013年
- 目的胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要发病机制之一。microRNA（miRNA）是-簇长度约为20—24个核苷酸的单链非编码的小分子RNA。它们在转录后水平对下游靶基因进行调控。miRNA广泛表达于各种组织器官中，对组织器官的功能和发育具有重要的作用。miRNA参与糖尿病及其并发症的发生。它们调控胰岛素的合成、分泌、胰岛素信号通路和糖脂代谢等过程。目前，与肝胰岛素抵抗相关的miRNA报道尚少。研究证明miRNA．152和miRNA-200s与肿瘤的发生密切相关，但miR—NA-152和miRNA-200s是否在肝胰岛素抵抗发生中起重要作用？目前尚不清楚。本研究通过建立IL-6诱导的胰岛素抵抗的细胞和动物模型，分析细胞或肝脏组织中miRNA-152和miRNA-200s的表达变化，探讨miRNA-152和miRNA-200s在IL-6诱导的肝胰岛素抵抗中的作用，明确miRNA-152和miRNA．200s调节P13K／AKT信号通路的分子机制。方法（1）以12周龄db／db小鼠作为胰岛素抵抗模型小鼠，收集小鼠肝脏组织，用miRNA芯片分析肝脏中miRNA表达谱变化，并用Real—timePCR进一步验证芯片结果。（2）10斗∥LIL-6处理小鼠肝细胞系NCTCl469和C57BL／6小鼠原代肝细胞24h，建立胰岛素抵抗的细胞模型，检测P13K／AKT信号和miRNA．152、miRNA-200s表达水平；在c57BL／6J小鼠背部皮下埋泵缓释注射IL-61周，建立IL-6诱导的胰岛素抵抗动物模型，观察肝脏中P13K／AKT信号通路和miRNA-152、miRNA-200s表达水平。（3）合成miRNA-152、miRNA-200smimics和inhibitors，并转染入NCTCl469细胞，用Real—timePCR测定细胞中miRNA-152和miRNA．200S的水平，并且检测P13K／AKT信号通路和糖原水平。（4）用生物信息学方法预测miRNA-200s的下游靶基因；以Westernblot分析miRNA-200s对下游基因FOG2和PTEN表达的影响。（5）利用siRNA干扰FOG2和lrFEN的表达，检测P13K／AKT信号通路和糖原合成水平。结果（1）与对照组小鼠�
- 窦琳黎健
- 关键词：IL-6PTENP13KAKT信号通路糖原合成
- 二肽基肽酶4抑制剂治疗多囊卵巢综合征合并糖代谢异常患者的初步临床研究被引量：6
- 2014年
- 目的比较二肽基肽酶4(DPP-4)抑制剂与二甲双胍对多囊卵巢综合征(PCOS)合并糖代谢异常患者代谢和内分泌参数的影响。方法将24例PCOS合并糖代谢异常患者分为二甲双胍组和DPP-4抑制剂组,各12例。分别服用二甲双胍500mg,3次/d和DPP-4抑制剂100mg,1次/d,治疗12周。评估治疗前后各项代谢指标和性激素水平的变化。结果与治疗前比较,两组HbA1c水平和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)均降低[HbA1c:(5.8±0.7)%vs(6.9±1.7)%,(5.8±0.3)%vs(6.5±1.1)%;HOMA-IR:4.0(3.0,5.2)vs 2.3(1.1,4.2),7.1(5.4,8.6)vs 5.7(3.9,6.7),P<0.05]。二甲双胍组血清睾酮(T)水平降低[1.8(1.2,2.8)vs 1.1(0.7,1.7)nmol/L,P<0.05],DPP-4抑制剂组血清T水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义。结论 DPP-4抑制剂可改善PCOS合并糖代谢异常患者的高血糖和IR,并可能有助于改善高雄激素血症。
- 王琛王海宁洪天配刘烨田勍高洪伟
- 关键词：多囊卵巢综合征二甲双胍
- 关注肥胖与糖尿病相关性及其潜在机制被引量：8
- 2013年
- 随着生活方式和饮食习惯的改变，肥胖和糖尿病近年来呈快速流行的趋势。本文就肥胖与糖尿病相关性及其潜在机制进行评述。
- 洪天配魏蕊
- 关键词：糖尿病肥胖饮食习惯
- 树鼩载脂蛋白AV系列突变体的细胞内定位分析
- <正>目的研究不易感动脉粥样硬化动物-树鼩载脂蛋白AV基因不同结构域对细胞内定位的影响。方法前期我们实验室利用快速扩增cDNA末端技术成功获得了该基因的cDNA全长,该基因有两个转录本,分别为1948 bp和1937 b...
- 李国平王艳满永王抒黎健陈保生
- 关键词：动脉粥样硬化基因突变体细胞定位
- 文献传递
- 部分炎症因子活化11β-HSD1参与非酒精性脂肪肝发生的研究进展被引量：3
- 2016年
- 非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）是指非过度饮酒及其它明确损肝因素所致的,以肝细胞内大量脂肪沉积为主要特征的,包含非酒精性脂肪肝以及由其发展来的非酒精性脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝硬化和肝细胞癌在内的一系列进展性疾病的统称。中国多个发达地区（北京、上海、香港等）流行病学研究发现：普通成人的NAFLD患病率已高达20%以上（[1-3]）,
- 徐杰李国平唐蔚青黎健
- 关键词：肿瘤坏死因子Α炎症因子
- 小鼠肝脏胰岛素抵抗中microRNA表达谱变化
- <正>目的:胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要发病机制之一。microRNA是一簇长度约为20~24个核苷酸的单链非编码的小分子RNA。它们在转录后水平对下游靶基因进行调控。microRNA广泛表达于各种组织器官中,对组织器官...
- 房伟伟窦琳黎健
- 文献传递
- miR-291b-3p在肝脏脂质代谢中的作用机制研究
- <正>目的:miR-291b-3p是miR-290家族中的一员,在胚胎发育过程中起重要作用,而在脂代谢中的作用尚未见报道,本研究旨在阐明其在肝脏脂质代谢中的作用及其机制。方法:首先在NCTC1469细胞内通过油酸/棕榈酸...
- 孟祥宇郭君李萌黄秀清黎健
- 文献传递
- 在HepG2细胞中11β-HSD1通过SREBP1调控脂代谢
- <正>目的:通过在HepG2细胞中高低表达Ⅰ型羟基固醇脱氢酶(11beta-hydroxystercid dehydrogenase type 1,11β-HSD1),分析其影响脂代谢的分子机制。方法:1、用肿瘤坏因子(...
- 徐杰李国平唐蔚青黎健
- 文献传递
- MiR-301a Mediates the Effect of IL-6 on the AKT/GSK Pathway and Hepatic Glycogenesis by Regulating PTEN Expression
- <正>Objective:IL-6 has been implicated in the pathogenesis of insulin resistance.MiR-301a plays an important ro...
- Shuyue WangLin DouXiangyu MengTao ShenXiuqing HuangJian Li
- 文献传递
- 人载脂蛋白AV原核表达载体的构建与纯化研究被引量：1
- 2013年
- 目的:构建人载脂蛋白AV(apolipoprotein AV,apoAV)的原核载体并表达纯化该蛋白。方法:从人肝癌细胞系HepG2中提取总RNA,以反转录的cDNA第一链为模板,经聚合酶链式反应(PCR)扩增得到含有编码apoAV完整成熟肽段的PCR片段。PCR产物和原核表达载体pET30b经核酸内切酶双切后连接,连接产物经转化至大肠杆菌感受态细胞Top10,挑选克隆测序。重组质粒pET30b-apoAV转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并优化诱导表达条件,重组的apoAV经镍离子螯合树脂纯化获得。结果:经测序证实人apoAV目的基因成功克隆入pET30b原核表达载体中,经过IPTG诱导有约40KD的特异性蛋白表达,与预期大小一致。该蛋白在IPTG诱导下的最佳表达时间为5h,最佳浓度在31.3μmol/L。纯化的apoAV纯度在95%以上,产率约为15 mg/L。结论:成功构建人apoAV的原核表达载体,实现了高效表达和纯化,为进一步研究其结构与功能奠定了基础。
- 李国平隋靖喆毕楠满永王抒陈保生黎健
- 关键词：原核表达蛋白纯化
