国家质检总局科技计划项目(2012IK023)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：何晓杰皮志媛李胜王振宝季新成更多>>
- 相关机构：伊犁出入境检验检疫局伊犁职业技术学院新疆出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 美洲幼虫腐臭病二温式PCR诊断方法的建立及应用被引量：2
- 2015年
- 【目的】为建立蜂及蜂产品中美洲幼虫腐臭病(AFB)二温式PCR诊断方法。【方法】选取幼虫芽孢杆菌基因保守序列设计一对特异性引物,优化反应参数,进行特异性、敏感性和重复性试验验证,建立了诊断AFB的二温式PCR方法。【结果】扩增出130 bp的特异性片段,与参考株序列相似性为100%,DNA灵敏度检测幼虫芽孢杆菌达到33 fg/PCR体系,重复性良好。应用该方法对40份实验室模拟样本和50份临床样本进行了检测,与预期结果一致。【结论】该方法具有特异、灵敏、准确等优点,可用于蜂及蜂产品中AFB的快速诊断。
- 何晓杰阿曼吐尔.阿黑哈提叶尔保勒史秀丽齐鑫皮志媛王振宝
- 关键词：美洲幼虫腐臭病二温式PCR
- 幼虫芽孢杆菌和蜂房蜜蜂球菌双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
- 2018年
- 为快速鉴别诊断蜜蜂美洲幼虫腐臭病(American foulbrood,AFB)和欧洲幼虫腐臭病(European foulbrood,EFB),本研究根据Gen Bank中登录的幼虫芽孢杆菌(Paenibacillus larvae)和蜂房蜜蜂球菌(Melissiciccus pluton)16S r RNA基因序列分别设计特异性引物和探针,建立了双重Taq Man荧光定量PCR检测方法。结果表明,该方法与其他病原无交叉反应;对P.larvae和M.pluton的检测灵敏度均达10 copies/μL的阳性质粒;重复性试验结果显示批内、批间变异系数均小于2%。应用该方法对200份实验室模拟样品和200份临床样品进行了检测,与预期结果一致。本研究建立的方法可用于AFB与EFB的快速鉴别诊断和早期监测,以及蜂产品中P.larvae和M.pluton的定量分析。
- 何晓杰王科珂叶尔保勒阿斯喀张婕妤哈森季新成王振宝
- 关键词：美洲幼虫腐臭病欧洲幼虫腐臭病
- 蜜蜂白垩病病原的分离与鉴定被引量：1
- 2014年
- 为了解伊犁河谷蜜蜂白垩病的流行情况及研究快速诊断方法,本试验开展了该病的流行病学调查,并将50份疑似样品处理后采用分离培养法、镜检法及PCR法对病原菌进行了分离与鉴定。结果5份为阳性,阳性率10%,培养基菌落颜色呈白色,较致密,中央凸起,老化菌落颜色呈浅棕色至棕色;镜检可见树枝状分枝的有隔菌丝,二叉分枝间距较大,菌丝体呈疏松的蛛网状,用乳酸棉监染色液染色后菌丝为蓝色;PCR反应结果为阳性,阳性结果测序后所得序列用Blast软件比对,与球囊菌属的蜜蜂球囊菌基因序列相似性最高,达到99%。上述结果表明,从伊犁河谷病蜂中分离的病原菌为蜜蜂白垩病病原。
- 哈森何晓杰王科珂叶尔保勒李胜王振宝
- 关键词：蜜蜂白垩病
