国家自然科学基金(30800547)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：李晓波殷莲华杨晓明许雅丽赵凤娣更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院宁夏医科大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 干扰SULT2B1对Hepa1-6肝癌细胞凋亡的影响及机制研究
- 2013年
- 目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1对小鼠Hepa1-6肝癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法SULT2B1慢病毒干扰载体感染Hepa1-6细胞(MOI=100),Real-time PCR检测其干扰效果。采用流式细胞仪通过Annexin V-APC/7-ADD染色检测干扰SULT2B1后Hepa1-6细胞凋亡率的改变,Western blot检测FAS和p-JNK的蛋白表达水平。结果构建的SULT2B1干扰载体可显著抑制Hepa1-6细胞中SULT2B1的表达(P<0.05)。Hepa1-6细胞中干扰SULT2B1后其凋亡率较对照组相比显著增加(P<0.05),干扰SULT2B1后可显著增加FAS和p-JNK的蛋白表达水平(P<0.05)。结论干扰SULT2B1可促进Hepa1-6细胞的凋亡,其作用主要与增加FAS和p-JNK的蛋白表达水平有关。
- 杨晓明李晓波殷莲华
- 关键词：肝癌细胞细胞凋亡
- Estrogen sulfotransferase regulates inflammatory response and lipid metabolism of human endothelial cells via PPARγ
- Estrogen sulfotransferase（SULT1E1） is a phaseⅡdrug - metabolizing enzyme known to catalyze sulfoconjugation of...
- XU Ya-liTIAN DaiWANG Zheng-yangLI Meng-mengNING Yan-xiaCHEN Si-fengLI Xiao-boYIN Lian-hua
- 关键词：HUVECS
- 构建携带人PAPS合成酶1(hpapss1)全长cDNA的重组腺病毒
- 2009年
- 目的构建携带人PAPS合成酶1(hpapss1)全长cDNA的重组腺病毒,并感染巨噬细胞使PAPSS1过表达,为研究其在胆固醇代谢中的作用提供工具。方法PCR扩增hpapss1全长cDNA,继而构建了真核表达载体pCDNA3.0-hpapss1,再将hpapss1片段亚克隆入腺病毒穿梭质粒pshuttle-CMV,得到转移质粒pshuttle-CMV-hpapss1,并将其转化含腺病毒基因组质粒pAdEasy-1的BJ5183感受态菌(AdEasier-1cells)。筛选并鉴定重组正确的腺病毒质粒pAdEasy-1-hpapss1,在阳离子脂质体介导下,转染腺病毒包装细胞(293细胞)进行包装和扩增。携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒感染THP-1来源的巨噬细胞48h后,用Western blot方法测定蛋白水平来确定PAPSS1的过表达。结果成功制备携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒,滴度为5.3×108pfu/mL,实现了hpapss1基因在巨噬细胞中的过表达。结论携带hpapss1全长cDNA的重组腺病毒的成功制备为进一步探讨PAPSS1及氧化固醇硫酸化在巨噬细胞胆固醇代谢平衡中的作用及机制建立了很好的模型和工具。
- 赵凤娣许雅丽李晓波殷莲华
- 关键词：腺病毒硫酸化
