国家重点基础研究发展计划(2013CB531702)
- 作品数：37 被引量：233H指数：9
- 相关作者：单德红王德山刘文俊刘旭东柴纪严更多>>
- 相关机构：辽宁中医药大学温州医科大学沈阳医学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划辽宁省高等学校杰出青年学者成长计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 附子理中丸灌胃后脾阳虚证大鼠海马组织β-EP、cAMP、PKA、神经元细胞μ受体表达观察被引量：7
- 2018年
- 目的观察附子理中丸灌胃的脾阳虚证模型大鼠海马组织β内啡肽(β-EP)、环磷酸腺苷(c AMP)、蛋白激酶A(PKA)及神经元细胞μ受体的表达变化。方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、中药组、自愈组,每组10只。模型组、中药组、自愈组采用饮食失节+劳倦等复合因素方法制作脾气虚模型,加用"苦寒泻下"法(连续灌服100%番泻叶)制作脾阳虚模型。空白组不做任何处理。造模后中药组予附子理中丸2 m L/(100 g·d)灌胃,1次/d,给药2周。(1)大鼠行为运动功能观察采用旷场实验检测各组大鼠行为学改变(水平运动距离、直立次数)采用YLS-13A大小鼠抓力测定仪检测各组大鼠前肢抓力。(2)分别于第2、4周处死各组大鼠,取海马组织,ELISA法检测海马组织β-EP、c AMP、PKA,免疫组化SABC法检测神经元细胞μ受体。结果与空白组比较,模型组、自愈组大鼠水平运动距离和直立次数均降低(P均<0. 01)。与空白组比较,模型组大鼠前肢抓力下降(P <0. 01);与模型组比较,中药组和自愈组大鼠前肢抓力增强(P均<0. 01)。与空白组比较,模型组及自愈组海马组织中β-EP含量升高、c AMP和PKA含量降低(P均<0. 05);与模型组比较,中药组c AMP和PKA含量升高,自愈组PKA含量升高(P均<0. 05);与自愈组比较,中药组海马组织中β-EP含量降低、c AMP和PKA含量升高(P均<0. 05)。与空白组比较,模型组、自愈组大鼠海马组织μ受体光密度升高(P均<0. 05);与模型组比较,中药组大鼠海马组织中神经元细胞μ受体光密度降低(P <0. 05);与自愈组比较,中药组大鼠海马组织中神经元细胞μ受体光密度降低(P <0. 05)。结论附子理中丸可改善脾阳虚证模型大鼠的脾阳虚证"神疲、乏力"表征,其机制可能降低海马组织β-EP含量、升高c AMP及PKA含量、增加神经元细胞μ受体表达。
- 孙大宇单德红刘旭东刘文俊王德山
- 关键词：附子理中丸脾阳虚证海马Β内啡肽Μ受体
- 易水学派脾胃学说的预防学思想被引量：5
- 2018年
- 从＂固元气,未病先防＂;＂寒温适,四时应＂;＂调饮食,适其寒温＂;＂谨和五味＂;＂少思寡欲＂;＂适劳逸＂六方面阐述了易水医家对疾病从脾论治的预防学观点,以待为当今临床疾病的预防提供多角度思路。
- 尚冰刘自力辛哲刘娟王铎
- 关键词：脾胃学说疾病预防易水学派
- 附子理中丸对脾阳虚大鼠小肠上皮细胞CREB、Sirt1、UCP2表达和ATP合成的影响被引量：3
- 2018年
- 目的探讨附子理中丸对脾阳虚证大鼠小肠上皮细胞CREB、Sirt1、UCP2表达和ATP合成的影响。方法取SPF级SD雄性大鼠40只,按体质量分层随机分为4组,空白组、模型组、中药组、自愈组,每组10只。采用"饮食失节+劳倦"等复合因素方法复制脾气虚动物模型。在此基础上,采用"苦寒泻下"法复制脾阳虚动物模型。动物模型复制成功后,中药组给予附子理中丸1∶1水溶液灌胃治疗。在造模结束和中药治疗干预后,分别采用Western blotting法和RT-PCR法检测大鼠小肠黏膜上皮细胞中CREB、Sirt1及线粒体中UCP2蛋白和mRNA表达。采用免疫荧光法检测小肠上皮组织中ATP含量。结果与空白组相比,模型组大鼠小肠上皮组织中CREB与Sirt1蛋白和mRNA表达降低(P均<0. 01),UCP2蛋白和mRNA表达增加(P均<0. 01);与模型组相比,中药组大鼠小肠上皮组织中CREB与Sirt1蛋白和mRNA表达升高(P均<0. 05),UCP2蛋白和mRNA表达降低(P均<0. 01)。与空白组相比,模型组大鼠小肠组织中ATP含量降低(P <0. 01);与模型组相比,中药组大鼠小肠组织中ATP含量升高(P <0. 01)。结论附子理中丸可使脾阳虚大鼠小肠上皮细胞CREB、SIRT1表达升高,线粒体UCP2蛋白表达上调、肠上皮组织中ATP合成减少。
- 孙大宇单德红刘旭东刘文俊王德山
- 关键词：脾阳虚证附子理中丸解耦联蛋白2
- 脾气虚和脾阳虚模型大鼠脑肠肽与下丘脑葡萄糖转运体1及葡萄糖转运体3表达水平变化的实验研究被引量：14
- 2016年
- 目的分析脾虚模型大鼠脑肠肽〔β-内啡肽(β-EP)、胆囊收缩素(CCK)、血管活性肽(VIP)〕、下丘脑葡萄糖转运体(GLUT)1、GLUT3表达水平变化。方法 2015年3—9月,采用随机数字表法将24只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、脾气虚组、脾阳虚组,每组8只。脾气虚模型的建立采用饮食失节结合劳倦过度的原则,脾阳虚模型则是在脾气虚的基础上施加苦寒泻下法完成。观察3组大鼠一般情况(体征状态、体质量、体温、进食量等)及前肢抓力。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定下丘脑、胃、空肠β-EP、CCK、VIP表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法测定下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA表达水平,Western blotting法测定下丘脑GLUT1、GLUT3表达水平。结果脾气虚组大鼠体质量、进食量、前肢抓力低于对照组(P<0.05);脾阳虚组大鼠体质量、体温、进食量、前肢抓力低于对照组(P<0.05);脾阳虚组大鼠体温低于脾气虚组(P<0.05)。脾气虚组大鼠下丘脑β-EP表达水平低于对照组,胃、空肠β-EP表达水平及下丘脑、胃、空肠CCK、VIP表达水平高于对照组(P<0.05);脾阳虚组大鼠下丘脑β-EP表达水平低于对照组,胃、空肠β-EP、CCK表达水平及下丘脑、胃、空肠VIP表达水平高于对照组(P<0.05);脾阳虚组大鼠下丘脑β-EP表达水平及下丘脑、空肠CCK表达水平低于脾气虚组,胃、空肠β-EP表达水平及下丘脑、胃、空肠VIP表达水平高于脾气虚组(P<0.05)。脾气虚组、脾阳虚组大鼠下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA及其蛋白表达水平低于对照组(P<0.05);脾阳虚组大鼠下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA及其蛋白表达水平低于脾气虚组(P<0.05)。结论脾虚状态下,大鼠下丘脑GLUT1、GLUT3 mRNA及其蛋白表达水平下降,导致下丘脑、胃、空肠β-EP、CCK、VIP表达水平异常,这可能是脾虚本质研究的又一新观点。
- 丛培玮尚冰王艳杰赵丹玉张林王德山
- 关键词：脾气虚脾阳虚脑肠肽下丘脑
- 中医脾虚证与线粒体的相关性被引量：22
- 2015年
- 脾为仓廪之官,后天之本,气血生化之源,主运化水湿、统摄血液。在既往关于脾生理学意义与脾虚相关的研究基础上,本研究进一步探讨了脾虚与线粒体二者之间在病理和治疗方面的相互关系。
- 游艳婷金丽琴
- 关键词：脾虚线粒体
- 脾气虚大鼠焦虑样行为及其初步机制研究被引量：4
- 2017年
- 目的研究脾气虚大鼠焦虑程度的变化并探讨其可能机制。方法选取雄性SD大鼠16只,体质量(200±10)g,将其随机分为对照组和脾气虚组(模型组),每组8只。旷场实验评价大鼠焦虑程度;ELISA法测定海马组织ATP和缩胆囊素-8(CCK-8)含量;免疫组化法检测海马CCKB型受体(CCKBR)表达。结果与对照组比较,模型组的焦虑程度显著降低(P<0.01),海马组织的ATP含量降低(P<0.05),海马CCK-8水平变化不明显(P>0.05),但其受体表达下降(P<0.05)。结论脾气虚时焦虑程度下降,其初步机制与海马能量不足和CCKBR表达减少有关。
- 刘文俊柴纪严谢鑫吴成举陈靖单德红
- 关键词：脾气虚焦虑ATP
- ClpP蛋白酶研究进展:从细菌到人线粒体被引量：6
- 2014年
- Caseinolytic protease(ClpP)是一种包含丝氨酸蛋白酶催化三联体结构域的ATP依赖的蛋白水解酶,广泛存在于原核生物以及真核生物的线粒体和叶绿体中。它通常与AAA+家族的分子伴侣ClpX结合形成ClpXP蛋白酶复合物,AAA+家族成员能利用水解ATP提供的能量将蛋白底物去折叠,随后将底物分子转移至ClpP蛋白酶的水解腔体进行降解。ClpP蛋白酶对细胞内蛋白质量控制及维持体内稳态起到至关重要的作用。该文综述了近年来有关ClpP蛋白酶在结构、功能以及与细菌毒力的关系和有关药物开发等方面的研究。
- 陈林蓝林华何海栋陈志博佘诗琦刘永章吕斌
- 关键词：线粒体
- 从空肠AQP3、GLUT1的表达变化探讨脾气虚、脾阳虚证的机理被引量：6
- 2016年
- 目的:通过分析脾气虚、脾阳虚证模型大鼠空肠组织中水通道蛋白3、葡萄糖转运体1基因及蛋白的表达变化,从分子生物学角度,探讨空肠组织中AQP3及GLUT1与脾气虚、脾阳虚证之间的关系,为研究脾气虚、脾阳虚证分子机制提供新思路。方法:动物随机分为对照组、脾气虚组和脾阳虚组,复合因素造模;观察大鼠一般体征,运用Realtime PCR结合Western blot方法检测大鼠AQP3、GLUT1基因及蛋白表达变化。结果:脾气虚、脾阳虚模型大鼠下空肠组织中的AQP3、GLUT1基因及蛋白表达较对照组均有显著降低(P<0.01);阳虚组表达较气虚组也有显著降低(P<0.01)。结论:脾气虚、脾阳虚证状态下大鼠空肠AQP3、GLUT1表达下调,导致对水分和葡萄糖的吸收出现障碍,可能与脾气虚、脾阳虚证的发病机制有关。
- 张林王艳杰王德山洪勇涛杨晔冉博张文吴佳思
- 关键词：葡萄糖转运蛋白1水通道蛋白3脾气虚脾阳虚
- M_2和M_3型胆碱能受体在脾气虚大鼠小肠运动中的作用被引量：13
- 2016年
- 目的:研究M2、M3型胆碱能受体表达与脾气虚小肠运动的关系。方法:20只SD大鼠按随机数字表法分为对照组和脾气虚模型组(模型组)各10只,模型组大鼠复制饮食不节加劳疲型脾气虚模型;小肠运动采用小肠推进率评价;ELISA法检测小肠组织Ach和c AMP含量,免疫组化法观察M2、M3型受体表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠的小肠推进率显著下降,Ach含量无变化,M2受体表达明显上升,M3受体表达和c AMP水平显著下降。结论:脾气虚小肠运动减弱与M2、M3型受体表达异常有关。
- 赵璠刘旭东刘文俊柴纪严于化新王凌志王路王德山单德红
- 关键词：脾气虚小肠运动ACH
- 脾气虚证模型大鼠神疲乏力的客观化评价被引量：54
- 2015年
- 目的:探讨客观评价脾气虚证模型大鼠疲劳程度的实验方法。方法:24只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、脾气虚证模型组和四君子汤治疗组,每组8只。建立脾气虚证(饮食不节加力竭游泳)模型,主要检测大鼠行为学和前肢抓力。结果:与对照组比较,模型组大鼠运动距离、平均运动速度和垂直活动次数显著降低(P<0.05,P<0.01),其在中心和周边停留时间显著延长,而在角落停留时间较短;前肢抓力明显减弱(P<0.01)。结论:神疲乏力宜用于表述脾气虚证模型疲劳程度,可以采用行为学和前肢抓力进行客观评价。
- 刘旭东刘文俊孙大宇崔勇冯晓帆单德红王德山
- 关键词：脾气虚旷场实验
